| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 縮率词表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-37页 |
| 1 玉米转基因研究进展 | 第13-26页 |
| ·玉米转基因技术的研究进展 | 第14-22页 |
| ·玉米转化技术的概括 | 第14-18页 |
| ·表达载体构建的研究进展 | 第18-22页 |
| ·筛选技术的研究进展 | 第22页 |
| ·玉米转基因育种的研究进展 | 第22-26页 |
| ·抗虫转基因玉米育种 | 第22-24页 |
| ·抗除草剂转基因玉米育种 | 第24页 |
| ·抗逆转基因育种 | 第24-25页 |
| ·改良玉米品质 | 第25-26页 |
| ·抗病转基因玉米 | 第26页 |
| 2 玉米抗纹枯病转基因研究 | 第26-28页 |
| 3 植物细胞凋亡的研究进展 | 第28-36页 |
| ·细胞凋亡的相关概念 | 第28-29页 |
| ·植物细胞凋亡 | 第29页 |
| ·植物细胞凋亡的调控机制 | 第29-32页 |
| ·植物细胞程序性死亡过程中的相关信号分子 | 第29-31页 |
| ·植物细胞程序性死亡过程中的类Caspase蛋白酶 | 第31-32页 |
| ·细胞凋亡抑制与抗病育种 | 第32-36页 |
| ·细胞凋亡抑制 | 第32-35页 |
| ·凋亡抑制基因与植物抗性育种 | 第35-36页 |
| 4 研究目的和意义 | 第36-37页 |
| 第二章 材料与方法 | 第37-67页 |
| 1 试验材料 | 第37-42页 |
| ·玉米品种 | 第37页 |
| ·基因 | 第37页 |
| ·菌株 | 第37页 |
| ·载体 | 第37-38页 |
| ·酶和试剂 | 第38页 |
| ·引物设计 | 第38-40页 |
| ·培养基 | 第40-41页 |
| ·LB培养基 | 第40页 |
| ·玉米转化培养基 | 第40-41页 |
| ·主要试剂配制 | 第41-42页 |
| 2 试验方法 | 第42-67页 |
| ·融合基因植物表达载体(pCA3301-p35-LP4/2A-iap)的构建 | 第42-55页 |
| ·构建融合基因表达载体的iap、p35、nos和Ω基因的PCR扩增 | 第42-44页 |
| ·各基因片段PCR产物的回收 | 第44-45页 |
| ·融合基因p35-LP4/2A-iap的PCR扩增 | 第45页 |
| ·融合基因片段PCR产物的回收 | 第45-46页 |
| ·双酶切质粒和回收后的PCR产物片段 | 第46-55页 |
| ·双价植物表达载体(pCA3301-p35-iap)的构建 | 第55-60页 |
| ·构建双价表达载体的p35和iap基因的PCR扩增 | 第55页 |
| ·PCR产物的回收 | 第55页 |
| ·克隆载体的构建 | 第55-56页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 | 第56页 |
| ·目的基因的鉴定 | 第56-57页 |
| ·碱裂解法小量提取质粒DNA | 第57页 |
| ·双酶切质粒与目的片段的回收 | 第57-60页 |
| ·植物表达载体转化农杆菌EHA105 | 第60-61页 |
| ·植物表达载体的保存 | 第60页 |
| ·农杆菌电击感受态细胞的制备 | 第60-61页 |
| ·表达载体转化农杆菌EHA105(电击法) | 第61页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第61页 |
| ·农杆菌介导玉米遗传转化及转基因玉米植株的获得 | 第61-64页 |
| ·玉米的授粉 | 第61-62页 |
| ·玉米幼胚的剥离 | 第62页 |
| ·愈伤组织的诱导及继代 | 第62页 |
| ·农杆菌浸染及共培养 | 第62-63页 |
| ·恢复培养(R) | 第63页 |
| ·筛选培养(S) | 第63-64页 |
| ·胚状体的诱导(D) | 第64页 |
| ·分化再生(ZⅠ) | 第64页 |
| ·生根壮苗(ZⅡ) | 第64页 |
| ·炼苗和移栽 | 第64页 |
| ·转基因玉米分子检测 | 第64-66页 |
| ·转基因玉米抗纹枯病的鉴定 | 第66-67页 |
| 第三章 结果与分析 | 第67-88页 |
| 1 融合基因表达载体(pCA3301-p35-LP4/2A-iap)的构建 | 第67-77页 |
| ·各基因片段的PCR扩增结果 | 第67-70页 |
| ·融合基因表达载体的构建 | 第70-77页 |
| ·融合基因表达载体的构建策略 | 第70-71页 |
| ·融合基因表达载体的构建流程图 | 第71-72页 |
| ·融合基因表达载体的最终鉴定 | 第72-77页 |
| 2 双价表达载体(pCA3301-p35-iap)的构建 | 第77-81页 |
| ·iap和p35基因的PCR扩增结果 | 第77-78页 |
| ·克隆载体的构建和测序验证 | 第78-79页 |
| ·双价表达载体的构建 | 第79-81页 |
| ·构建双价表达载体的流程图 | 第79-80页 |
| ·双价表达载体的构建策略 | 第80页 |
| ·双价表达载体的鉴定 | 第80-81页 |
| 3 农杆菌介导玉米遗传转化及转基因玉米植株的获得 | 第81-85页 |
| ·植物表达载体转化农杆菌 | 第81-82页 |
| ·转基因玉米植株的获得 | 第82-85页 |
| 4 转基因玉米的PCR检测 | 第85-87页 |
| 5 T0代转基因玉米抗纹枯病的鉴定 | 第87-88页 |
| 第四章 讨论 | 第88-92页 |
| 1 植物表达载体的构建 | 第88-90页 |
| ·融合基因表达载体的构建 | 第88-89页 |
| ·双价表达载体的构建 | 第89-90页 |
| 2 农杆菌介导的玉米遗传转化 | 第90-91页 |
| 3 T0代转基因玉米抗纹枯病 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-108页 |
| 附录 | 第108-111页 |
| 致谢 | 第111页 |
