| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-14页 |
| 专业名词縮写中英文对照表 | 第14-15页 |
| 第一章 SPARC在红细胞发育过程中的作用及机理研究 | 第15-45页 |
| ·材料 | 第16-17页 |
| ·实验动物 | 第16页 |
| ·耗材 | 第16页 |
| ·解剖器械 | 第16页 |
| ·培养基和因子 | 第16-17页 |
| ·检测试剂 | 第17页 |
| ·仪器设备 | 第17页 |
| ·方法 | 第17-29页 |
| ·小鼠基因型鉴定 | 第17-18页 |
| ·Western blotting分析 | 第18-20页 |
| ·外周血分析 | 第20页 |
| ·制备骨髓细胞悬液 | 第20-21页 |
| ·制备脾脏细胞悬液 | 第21页 |
| ·流式分析骨髓细胞 | 第21页 |
| ·流式分析脾脏细胞 | 第21页 |
| ·小鼠骨髓细胞体外集落培养 | 第21-22页 |
| ·人脐CD34+细胞体外集落培养 | 第22页 |
| ·脾脏集落形成单位 | 第22-23页 |
| ·苏木素和伊红染色 | 第23页 |
| ·骨髓细胞长期培养 | 第23-24页 |
| ·造血重建 | 第24页 |
| ·归巢实验 | 第24-25页 |
| ·免疫磁珠分选人脐CD34+细胞 | 第25-26页 |
| ·脐血CD34+细胞体外分化为红细胞 | 第26-27页 |
| ·流式细胞技术检测诱导分化产生的红细胞 | 第27-28页 |
| ·联苯胺染色 | 第28页 |
| ·凋亡分析 | 第28页 |
| ·统计学分析 | 第28-29页 |
| ·结果 | 第29-33页 |
| ·小鼠基因型的鉴定 | 第29页 |
| ·SPARC缺失小鼠体内红系祖细胞减少 | 第29-30页 |
| ·SPARC缺失小鼠脾脏造血活跃 | 第30页 |
| ·SPARC缺失型BMCs的体外造血分化能力降低 | 第30页 |
| ·SPARC缺失型骨髓造血微环境支持红系造血的能力受损 | 第30-31页 |
| ·SPARC缺失不影响造血细胞的归巢 | 第31页 |
| ·重组SPARC蛋白促进脐血CD34+细胞形成红系祖细胞 | 第31-32页 |
| ·重组SPARC蛋白促进人红细胞分化过程中Hb的合成 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| ·附图 | 第34-45页 |
| 第二章 SPARC在B淋巴细胞发育过程中的作用及机理研究 | 第45-75页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·实验动物 | 第46页 |
| ·培养基及细胞因子 | 第46页 |
| ·耗材与仪器设备 | 第46页 |
| ·检测试剂 | 第46页 |
| ·方法 | 第46-58页 |
| ·流式分析外周血 | 第46-47页 |
| ·流式分析骨髓中B淋巴祖细胞 | 第47页 |
| ·流式分析骨髓中LSK细胞 | 第47-48页 |
| ·长期培养启动细胞 | 第48-49页 |
| ·脾脏集落形成实验(CFU-S_(12)) | 第49页 |
| ·体外pre-B集落培养 | 第49页 |
| ·收集骨髓基质细胞条件培养液 | 第49-50页 |
| ·体外B淋巴细胞分化 | 第50页 |
| ·流式分析体外分化产生的B淋巴细胞 | 第50页 |
| ·B淋巴细胞增殖的检测 | 第50-51页 |
| ·B淋巴细胞的凋亡检测 | 第51页 |
| ·免疫荧光染色 | 第51-52页 |
| ·Real-time RT-PCR | 第52-53页 |
| ·Western blotting | 第53-54页 |
| ·基因芯片分析(Microarray analysis) | 第54-57页 |
| ·统计学分析 | 第57-58页 |
| ·结果 | 第58-63页 |
| ·SPARC缺失小鼠B淋巴细胞发育障碍 | 第58页 |
| ·SPARC缺失小鼠骨髓中B淋巴祖细胞减少 | 第58页 |
| ·SPARC缺失小鼠骨髓中原始造血细胞(LSK)减少 | 第58-59页 |
| ·SPARC缺失型造血微环境支持B淋巴细胞发育的能力受损 | 第59页 |
| ·SPARC缺失型BMSCs抑制B淋巴细胞的分化 | 第59-60页 |
| ·SPARC缺失型BMSCs抑制B淋巴细胞的增殖 | 第60页 |
| ·重组SPARC蛋白不直接影响B淋巴细胞的分化 | 第60-61页 |
| ·SPARC缺失型BMSCs分泌可溶性因子抑制B淋巴细胞的分化 | 第61页 |
| ·SPARC缺失不影响IL-7和SDF-1的表达 | 第61页 |
| ·基因芯片分析SPARC缺失型和野生型BMSCs | 第61-63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| ·附图 | 第65-75页 |
| 第三章 脂肪细胞对B淋巴细胞发育影响的初步研究 | 第75-88页 |
| ·材料 | 第76页 |
| ·实验动物及细胞系 | 第76页 |
| ·耗材、试剂和仪器设备 | 第76页 |
| ·方法 | 第76-80页 |
| ·OP9细胞分化为脂肪细胞 | 第76页 |
| ·油红O染色 | 第76页 |
| ·RT-PCR | 第76-77页 |
| ·收集脂肪细胞条件培养液 | 第77页 |
| ·B淋巴细胞体外分化 | 第77-78页 |
| ·流式分析B淋巴细胞 | 第78页 |
| ·体外pro-B和pre-B集落培养 | 第78页 |
| ·流式分析pro-B和pre-B集落 | 第78-79页 |
| ·Pro-B细胞分化为pre-B细胞 | 第79页 |
| ·统计学分析 | 第79-80页 |
| ·结果 | 第80-82页 |
| ·OP9细胞诱导分化为脂肪细胞 | 第80页 |
| ·脂肪细胞抑制B淋巴细胞的分化 | 第80页 |
| ·脂肪细胞抑制B淋巴祖细胞的发育 | 第80-81页 |
| ·脂肪细胞条件培养液抑制B淋巴细胞的分化 | 第81页 |
| ·脂肪细胞抑制pro-B分化为pre-B细胞 | 第81-82页 |
| ·讨论 | 第82-83页 |
| ·附图 | 第83-88页 |
| 总结 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-96页 |
| 综述 | 第96-104页 |
| 参考文献 | 第100-104页 |
| 附录 | 第104-111页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第111-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 基金资助 | 第113页 |
