| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩写名词表 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-17页 |
| ·植物细胞壁研究进展 | 第9-11页 |
| ·细胞壁结构 | 第9-10页 |
| ·细胞壁组成 | 第10-11页 |
| ·纤维素合酶 | 第11-16页 |
| ·纤维素合酶的发现 | 第11-12页 |
| ·纤维素合酶结构 | 第12-13页 |
| ·纤维素合酶复合体的组成与功能 | 第13-14页 |
| ·纤维素合成相关基因 | 第14-15页 |
| ·纤维素合酶活性分析 | 第15-16页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 2 材料和方法 | 第17-36页 |
| ·材料和试剂 | 第17-20页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·载体与菌株 | 第17-19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·仪器设备 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-36页 |
| ·RACE | 第20-24页 |
| ·PCR扩增与产物回收 | 第24-26页 |
| ·PCR产物与载体连接 | 第26页 |
| ·大肠杆菌和农杆菌感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| ·转化 | 第27页 |
| ·阳性克隆的检测与测序 | 第27-28页 |
| ·质粒提取方法 | 第28页 |
| ·农杆菌质粒的提取 | 第28页 |
| ·棉花RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·棉花自交方法 | 第29页 |
| ·棉花花粉管通道法转基因 | 第29-30页 |
| ·原核表达与纯化 | 第30-33页 |
| ·棉花膜蛋白的提取 | 第33-34页 |
| ·免疫共沉淀(Co-IP) | 第34页 |
| ·Western Bloting检测 | 第34-35页 |
| ·纤维素合酶酶活分析 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-56页 |
| ·GhCesA5、GhCesA8和GhCesA10 cDNA克隆 | 第36-40页 |
| ·序列比对与引物设计 | 第36-38页 |
| ·GhCesA5和GhCesA10 cDNA序列克隆 | 第38-39页 |
| ·GhCesA5和GhCesA10锌指结构区克隆 | 第38页 |
| ·GhCesAS和GhCesA105’端序列扩增 | 第38-39页 |
| ·GhCe刘0j3’端序歹Jl扩增 | 第39页 |
| ·GhCesA8 cDNA序列克隆 | 第39-40页 |
| ·GhCesA5、GhCesA8和GhCesA10生物信息学分析 | 第40-46页 |
| ·催化活性区分析 | 第40-41页 |
| ·跨膜结构域分析 | 第41-42页 |
| ·磷酸化位点预测 | 第42-43页 |
| ·分子量和等电点分析 | 第43页 |
| ·CESAs保守域分析 | 第43-44页 |
| ·CESA家族蛋白聚类分析 | 第44-45页 |
| ·在棉纤维不同发育时期表达分析 | 第45-46页 |
| ·GhCESA5、GhCESA8和GhCESA10抗原制备 | 第46-48页 |
| ·抗原区段的选择 | 第46-47页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第47页 |
| ·蛋白的表达 | 第47-48页 |
| ·GhCESA1、GhCESA2和GhSUSY1蛋白表达分析 | 第48-51页 |
| ·棉花纤维不同发育时期蛋白表达检测 | 第48-49页 |
| ·棉花下胚轴光暗处理蛋白表达分析 | 第49-50页 |
| ·陆地棉24天纤维素合酶复合体的组成分析 | 第50-51页 |
| ·纤维素合酶活性分析 | 第51-52页 |
| ·膜片段大小对纤维素合酶活性的影响 | 第51-52页 |
| ·棉纤维不同发育时期纤维素合酶的体外活性分析 | 第52页 |
| ·棉花转基因 | 第52-56页 |
| ·GhSGT1和GhSuSy1超表达载体构建 | 第52-53页 |
| ·GhSGT和GhCa1 RNAi载体构建 | 第53-54页 |
| ·农杆菌的转化及棉花花粉管通道注射 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-60页 |
| ·不同棉花RNA提取方法比较 | 第56页 |
| ·GhCesAs生物信息学分析 | 第56-57页 |
| ·棉纤维不同发育时期蛋白表达模式分析 | 第57页 |
| ·纤维素合酶体外活性分析 | 第57-58页 |
| ·GhSGT1和GhSuSy1在纤维发育中的作用 | 第58页 |
| ·总结和展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录 | 第66-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
