摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-15页 |
第一章 前言 | 第15-27页 |
·流感病毒的概况 | 第15-20页 |
·流感病毒的结构和分类 | 第15-16页 |
·流感病毒大流行 | 第16-17页 |
·流感病毒感染的宿主范围 | 第17-20页 |
·流感病毒的基因重配 | 第20-23页 |
·流感病毒的致病性 | 第23-26页 |
·血凝素 | 第23-24页 |
·聚合酶蛋白 | 第24-25页 |
·非结构蛋白 | 第25-26页 |
·H6亚型流感病毒的现状 | 第26-27页 |
第二章 野鸭源H6N1亚型禽流感病毒SJ275株遗传进化分析和生物学特性研究 | 第27-53页 |
实验一 野鸭源H6N1亚型禽流感病毒SJ275株遗传进化分析 | 第27-40页 |
·材料与方法 | 第27-30页 |
·毒株 | 第27页 |
·菌种、鸡胚和小鼠 | 第27页 |
·主要试剂、仪器 | 第27页 |
·A/H6N1禽流感病毒全长引物的设计 | 第27-28页 |
·目标片段的克隆与扩增 | 第28-30页 |
·重组质粒的鉴定 | 第30页 |
·结果 | 第30-38页 |
·病毒DNAPCR扩增结果 | 第30-31页 |
·H6N1亚型AIV全基因序列 | 第31-37页 |
·PB2序列 | 第31-32页 |
·PB1序列 | 第32-33页 |
·PA序列 | 第33-34页 |
·HA序列 | 第34-35页 |
·NP序列 | 第35-36页 |
·NA序列 | 第36页 |
·M序列 | 第36-37页 |
·NS序列 | 第37页 |
·H6N1亚型AIV全基因进化树分析结果 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-40页 |
实验二 野鸭源H6N1亚型禽流感病毒SJ275株对BALB/c小鼠的致病性研究 | 第40-48页 |
·材料与方法 | 第40-42页 |
·毒株 | 第40页 |
·实验动物 | 第40页 |
·主要试剂和仪器 | 第40页 |
·病毒的纯化及富集 | 第40页 |
·鸡胚半数感染量(EID50)测定 | 第40-41页 |
·A/H6N1对BALB/c小鼠的致病性研究 | 第41-42页 |
·结果 | 第42-46页 |
·鸡胚半数感染量(EID50) | 第42页 |
·小鼠临床症状及体重变化情况 | 第42-43页 |
·小鼠半数致死量(MLD50) | 第43页 |
·病毒在小鼠体内复制水平检测 | 第43-44页 |
·小鼠血清HI抗体水平检测结果 | 第44-45页 |
·小鼠各脏器病理学切片检测结果 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-48页 |
实验三 野鸭源H6N1亚型禽流感病毒SJ275株对犬的致病性研究 | 第48-53页 |
·材料与方法 | 第48-49页 |
·毒株 | 第48页 |
·实验动物 | 第48页 |
·A/H6N1对犬的致病性研究 | 第48-49页 |
·结果 | 第49-52页 |
·接种组和非接种组体温变化情况 | 第49页 |
·攻毒后肺脏病毒分布情况 | 第49页 |
·攻毒后犬排毒情况评估 | 第49-50页 |
·病理切片及免疫组化情况 | 第50-51页 |
·抗体水平检测 | 第51-52页 |
·讨论 | 第52-53页 |
第三章 A/H6N1与A/H1N1在哺乳动物体内的重配及重配病毒的传播性研究 | 第53-61页 |
·材料与方法 | 第53-55页 |
·毒株 | 第53页 |
·实验动物 | 第53页 |
·主要试剂、仪器 | 第53页 |
·A/H6N1与A/H1N1的特异鉴定引物的设计合成 | 第53-54页 |
·重配病毒的获得 | 第54-55页 |
·体外拯救相关的H6亚型的重配病毒 | 第55页 |
·重配病毒的传播能力的评估 | 第55页 |
·结果 | 第55-59页 |
·A/H6N1与A/H1N1EID50的测定结果 | 第55-56页 |
·A/H6N1与A/H1N1混合感染豚鼠病毒复制情况评估 | 第56页 |
·鼻洗液噬斑纯化的鉴定结果 | 第56-57页 |
·重配病毒的分离及鉴定结果 | 第57-58页 |
·重配病毒传播特性的评估 | 第58页 |
·抗体水平检测 | 第58-59页 |
·4株H6亚型重配病毒受体结合特异性结果 | 第59页 |
·讨论 | 第59-61页 |
第四章 A/H6N1流感病毒致病性变异分子机制研究 | 第61-91页 |
实验一 A/H6N1流感病毒在小鼠肺内的适应性传代 | 第61-68页 |
·材料与方法 | 第61-62页 |
·毒株 | 第61页 |
·实验动物 | 第61页 |
·主要试剂和仪器 | 第61页 |
·A/H6N1流感病毒变异株的获得 | 第61页 |
·3株A/H6N1流感病毒变异株病毒的富集 | 第61-62页 |
·3株A/H6N1流感病毒变异株EID50的测定 | 第62页 |
·3株A/H6N1流感病毒变异株致病性研究 | 第62页 |
·结果 | 第62-67页 |
·鸡胚半数感染量(EID50) | 第62页 |
·小鼠半数死亡量(MLD50) | 第62-63页 |
·小鼠体重变化情况 | 第63-64页 |
·病毒在小鼠体内复制水平检测 | 第64-65页 |
·小鼠血清HI抗体水平检测结果 | 第65-66页 |
·小鼠各脏器病理学切片检测结果 | 第66-67页 |
·讨论 | 第67-68页 |
实验二 野鸭源A/H6N1亚型禽流感病毒SJ275株反向遗传操作系统的建立 | 第68-78页 |
·材料与方法 | 第68-73页 |
·毒株与质粒 | 第68页 |
·菌种、细胞、鸡胚和小鼠 | 第68-69页 |
·主要试剂 | 第69页 |
·反向遗传引物的设计合成 | 第69页 |
·转染质粒的构建 | 第69-71页 |
·转染质粒的提取 | 第71-72页 |
·转染质粒的鉴定 | 第72页 |
·病毒的拯救 | 第72页 |
·拯救病毒测序鉴定 | 第72页 |
·拯救病毒鸡胚半数感染量(EID50)测定 | 第72页 |
·rA/H6N1对BALB/c小鼠致病性实验 | 第72-73页 |
·结果 | 第73-77页 |
·A/H6N1亚型禽流感病毒RT-PCR扩增产物的鉴定结果 | 第73-74页 |
·拯救病毒rA/H6N1测序鉴定结果 | 第74页 |
·拯救病毒rA/H6N1EID50测定结果 | 第74页 |
·拯救病毒rA/H6N1MLD50测定结果 | 第74页 |
·rA/H6N1感染小鼠的发病率和死亡率 | 第74-75页 |
·各组织病毒滴定结果 | 第75-76页 |
·病理组织变化结果 | 第76-77页 |
·小鼠血清HI抗体水平检测结果 | 第77页 |
·讨论 | 第77-78页 |
实验三 A/H6N1流感病毒致病力变异分子机制研究 | 第78-91页 |
·材料与方法 | 第78-82页 |
·毒株 | 第78页 |
·实验动物 | 第78页 |
·主要试剂和仪器 | 第78页 |
·3株A/H6N1流感病毒变异株相关氨基酸位点的初步筛选 | 第78页 |
·变异株A/H6N1-P8M3毒力标记的筛选 | 第78-80页 |
·变异株相关病毒的致病性研究 | 第80页 |
·变异株相关病毒各脏器组织嗜性的滴定 | 第80-81页 |
·病理学切片观察 | 第81页 |
·HI抗体水平检测 | 第81页 |
·7株A/H6N1亚型流感病毒复制动力学的测定 | 第81-82页 |
·结果 | 第82-89页 |
·3株A/H6N1流感病毒变异株的变异位点 | 第82页 |
·拯救病毒测序鉴定结果 | 第82页 |
·拯救病毒的EID50 | 第82页 |
·拯救病毒的MLD50 | 第82-83页 |
·感染小鼠死亡率 | 第83-84页 |
·感染组小鼠的体重变化情况 | 第84页 |
·组织嗜性情况 | 第84-85页 |
·小鼠血清HI抗体水平检测结果 | 第85-86页 |
·病理及免疫组化 | 第86-89页 |
·7株A/H6N1亚型流感病毒复制动力学结果 | 第89页 |
·讨论 | 第89-91页 |
参考文献 | 第91-101页 |
创新和特色 | 第101-102页 |
结论 | 第102-103页 |
致谢 | 第103-105页 |
导师简介 | 第105-106页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第106-107页 |
导师评阅表 | 第107页 |