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白细胞介素24的生物制备、纯化及初步药效学分析

摘要第1-4页
Abstract第4-5页
目录第5-8页
第一章 绪论第8-14页
   ·肿瘤治疗现状第8页
     ·肿瘤治疗现状第8页
     ·肿瘤药物治疗现状第8页
   ·人白细胞介素 24第8-12页
     ·概述第8-9页
     ·白介素 24 的生理作用第9-11页
     ·IL-24 的作用机制第11-12页
   ·IL-24 的临床研究现状第12页
   ·立题背景及意义第12-13页
   ·研究内容第13-14页
第二章 诱导 IL-24 的可溶性表达第14-24页
   ·材料第14-15页
     ·质粒和菌种第14页
     ·培养基第14页
     ·工具酶第14-15页
     ·主要试剂第15页
     ·仪器与设备第15页
   ·方法第15-20页
     ·质粒 pET21a(+)/IL-24 的扩增第15-16页
     ·质粒 pET21a(+)/IL-24 的提取第16页
     ·质粒 pET21a(+)/IL-24 的双酶切验证第16页
     ·IL-24 的核苷酸序列验证第16-17页
     ·重组质粒的转化至大肠杆菌 BL21第17页
     ·IL-24 表达形式的确定第17页
     ·IL-24 的可溶性表达第17-20页
   ·结果第20-22页
     ·质粒 pET21a(+)/IL-24 的双酶切验证及序列测定第20页
     ·IL-24 表达形式的确定第20-21页
     ·IL-24 的可溶性表达第21-22页
   ·讨论第22-23页
   ·小结第23-24页
第三章 IL-24 的表达与分离纯化第24-35页
   ·材料第24-26页
     ·工程菌株第24页
     ·培养基第24-25页
     ·相关试剂及配制第25-26页
     ·仪器与设备第26页
   ·方法第26-29页
     ·种子液的准备第26-27页
     ·发酵罐准备第27页
     ·工程菌的发酵培养第27页
     ·包涵体的获取第27页
     ·包涵体的洗涤第27-28页
     ·IL-24 的分离纯化第28页
     ·IL-24 的 Western blot 鉴定第28-29页
     ·IL-24 纯化过程回收率分析第29页
   ·结果第29-33页
     ·工程菌的发酵培养第29-30页
     ·目的蛋白的分离纯化第30-32页
     ·目的蛋白的 Western blot 鉴定第32-33页
     ·目的蛋白的纯化回收率第33页
   ·讨论第33-34页
   ·小结第34-35页
第四章 IL-24 的复性及活性研究第35-48页
   ·材料第35-36页
     ·蛋白样品第35页
     ·细胞第35页
     ·主要试剂第35页
     ·仪器与设备第35-36页
   ·方法第36-41页
     ·IL-24 的复性第36-39页
     ·B16 细胞的培养第39页
     ·多种复性方案 IL-24 的活性比较第39-40页
     ·A549 细胞的培养第40页
     ·HepG-2 细胞的培养第40页
     ·HeLa 细胞的培养第40页
     ·MCF-7 细胞的培养第40页
     ·IL-24 敏感细胞株的筛选第40页
     ·IL-24 对 B16 细胞的诱导凋亡检测第40-41页
     ·IL-24 对 B16 细胞生长抑制可逆性的初步探究第41页
   ·结果第41-46页
     ·多种复性方案 IL-24 的活性比较第41-43页
     ·IL-24 敏感细胞株的筛选第43页
     ·IL-24 对 B16 细胞的诱导凋亡检测第43-44页
     ·IL-24 对 B16 细胞生长抑制可逆性的初步探究第44-46页
   ·讨论第46-47页
   ·小结第47-48页
第五章 结论与展望第48-50页
   ·结论第48页
   ·展望第48-50页
致谢第50-51页
参考文献第51-54页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第54页

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