| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-19页 |
| ·植物低磷胁迫研究进展 | 第9-12页 |
| ·植物磷营养研究 | 第9-10页 |
| ·植物磷营养的生理功能 | 第9页 |
| ·土壤中及植物体内磷素存在的形态及分布情况 | 第9-10页 |
| ·植物磷营养效率的研究 | 第10-12页 |
| ·磷营养效率概念 | 第10页 |
| ·植物磷营养效率基因型差异 | 第10-11页 |
| ·植物磷营养效率与磷高效基因型 | 第11-12页 |
| ·小麦磷营养效率评价指标 | 第12页 |
| ·植物对磷饥饿的自我拯救机制 | 第12-16页 |
| ·磷胁迫下植物根系形态的变化 | 第12-13页 |
| ·磷胁迫下植物生理生化上的变化 | 第13-14页 |
| ·有机酸和质子的分泌 | 第13页 |
| ·磷酸酶和核糖核酸酶的分泌 | 第13-14页 |
| ·植物适应低磷胁迫的分子生物学机制 | 第14-16页 |
| ·磷转运蛋白基因 | 第14页 |
| ·酸性磷酸酶基因 | 第14-15页 |
| ·低磷胁迫相关转录因子 | 第15-16页 |
| ·克隆小麦基因常用的方法 | 第16-17页 |
| ·同源克隆 | 第16-17页 |
| ·抑制性差减杂交技术 | 第17页 |
| ·mRNA 差异显示技术 | 第17页 |
| ·实现小麦生产的可持续高产稳产面临的“磷危机”与发展途径 | 第17-19页 |
| 2 引言 | 第19-20页 |
| 3 小麦紫色酸性磷酸酶基因的cDNA片段克隆 | 第20-29页 |
| ·材料与方法 | 第20-25页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·磷胁迫水培试验 | 第20页 |
| ·磷胁迫诱导紫色酸性磷酸酶同源基因搜索及简并引物设计 | 第20-21页 |
| ·Trizol 法提取小麦叶片总RNA 及总RNA 的纯化 | 第21-22页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第22页 |
| ·RT-PCR 扩增 | 第22页 |
| ·RT-PCR 产物的克隆及测序 | 第22-25页 |
| ·RT-PCR 产物的回收 | 第22-23页 |
| ·目的DNA 片段与载体的连接 | 第23页 |
| ·CaCl2 法制备DH5α感受态细胞 | 第23页 |
| ·重组DNA 热激转化大肠杆菌DH5α | 第23-24页 |
| ·重组转化子的鉴定及测序 | 第24-25页 |
| ·结果与分析 | 第25-29页 |
| ·筛选出的简并引物 | 第25页 |
| ·小麦总RNA 检测 | 第25-26页 |
| ·小麦内参基因扩增 | 第26页 |
| ·RT-PCR 产物电泳检测及cDNA 片段序列相似性分析 | 第26-29页 |
| 4 小麦磷调控转录因子基因的cDNA片段克隆 | 第29-32页 |
| ·材料与方法 | 第29页 |
| ·材料和磷胁迫水培试验 | 第29页 |
| ·磷调控转录因子同源基因搜索及简并引物设计 | 第29页 |
| ·RT-PCR 扩增及RT-PCR 产物克隆测序 | 第29页 |
| ·结果与分析 | 第29-32页 |
| ·筛选出的简并引物 | 第29-30页 |
| ·小麦总RNA 检测及内参基因扩增 | 第30页 |
| ·RT-PCR 产物电泳检测和cDNA 片段序列相似性分析 | 第30-32页 |
| 5 候选小麦磷胁迫诱导基因的表达模式分析 | 第32-36页 |
| ·材料与方法 | 第32-33页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·小麦材料的培养 | 第32页 |
| ·0d-8d 缺磷处理 | 第32页 |
| ·7d-28d 缺磷处理 | 第32页 |
| ·半定量RT-PCR 引物设计 | 第32页 |
| ·RNA 提取和纯化及反转录cDNA 第一链 | 第32页 |
| ·半定量RT-PCR | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-36页 |
| ·小麦总RNA 检测 | 第33页 |
| ·半定量RT-PCR 引物设计 | 第33-34页 |
| ·半定量RT-PCR 产物电泳检测 | 第34-36页 |
| ·0d~8d 缺磷处理 | 第34-35页 |
| ·7d~28d 缺磷处理： | 第35-36页 |
| 6 结论与讨论 | 第36-37页 |
| ·小麦磷胁迫诱导酸性磷酸酶基因cDNA 片段克隆与表达分析 | 第36页 |
| ·小麦磷调控转录因子基因cDNA 片段克隆与表达分析 | 第36-37页 |
| ABSTRACT | 第37-39页 |
| 参考文献 | 第39-45页 |
| 附录 | 第45-50页 |
| 1 实验中用到的仪器、主要酶类及试剂等 | 第45-47页 |
| ·仪器 | 第45页 |
| ·实验中用到的主要酶类 | 第45页 |
| ·实验中用到的主要试剂以及部分溶液和培养基的配制方法 | 第45-47页 |
| ·主要的试剂 | 第45-46页 |
| ·部分试剂、缓冲液和常用培养基的配制方法 | 第46-47页 |
| 2 测序cDNA 片段的序列 | 第47-50页 |
