利用SSH技术筛选冬枣果实衰老软化相关基因
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1. 文献综述 | 第11-21页 |
| ·冬枣果实衰老软化的生理生化研究进展 | 第11-15页 |
| ·冬枣果实呼吸类型的研究 | 第11页 |
| ·冬枣采后内源激素的研究 | 第11-12页 |
| ·冬枣采后相关酶活性的研究 | 第12-14页 |
| ·主要氧化酶活性变化 | 第12-13页 |
| ·主要水解酶活性变化 | 第13-14页 |
| ·其它酶活性变化 | 第14页 |
| ·冬枣采后乙醇乙醛含量的研究 | 第14-15页 |
| ·外源激素对冬枣衰老软化的影响 | 第15页 |
| ·冬枣分子生物学研究进展 | 第15-17页 |
| ·基因工程育种 | 第16页 |
| ·基因遗传转化 | 第16页 |
| ·功能基因克隆 | 第16页 |
| ·分子标记研究 | 第16-17页 |
| ·病菌分子研究 | 第17页 |
| ·抑制性差减杂交技术(SSH) | 第17-19页 |
| ·主要研究内容与技术路线 | 第19-21页 |
| 2. 构建冬枣果实正反向抑制性差减文库 | 第21-40页 |
| ·材料与方法 | 第21-29页 |
| ·试验材料 | 第21-22页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·菌种和质粒 | 第21-22页 |
| ·试验仪器 | 第22页 |
| ·试验试剂 | 第22页 |
| ·SSH文库构建所需试剂 | 第22页 |
| ·斑点杂交所需试剂 | 第22页 |
| ·试验方法 | 第22-29页 |
| ·RNA的提取与纯化 | 第22页 |
| ·mRNA的分离纯化 | 第22-23页 |
| ·cDNA的第一链合成 | 第23页 |
| ·cDNA的二链合成 | 第23-24页 |
| ·cDNA的纯化 | 第24页 |
| ·cDNA的Rsal酶切 | 第24-25页 |
| ·接头连接 | 第25页 |
| ·差减杂交 | 第25页 |
| ·两轮差减PCR | 第25-26页 |
| ·两次差减PCR扩增产物的纯化 | 第26页 |
| ·差减文库的克隆 | 第26页 |
| ·转化 | 第26-27页 |
| ·PCR鉴定 | 第27页 |
| ·斑点杂交 | 第27-28页 |
| ·序列分析 | 第28页 |
| ·荧光定量PCR | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-37页 |
| ·总RNA提取结果 | 第29-30页 |
| ·mRNA质量检测 | 第30-31页 |
| ·Rsa I酶切效率检测 | 第31页 |
| ·差减杂交效率检测 | 第31-32页 |
| ·抑制性差减文库筛选 | 第32-33页 |
| ·斑点杂交筛选 | 第33页 |
| ·EST序列分析 | 第33-34页 |
| ·功能分类分析 | 第34-36页 |
| ·基因表达谱分析 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| ·关于Blast hits结果 | 第37-38页 |
| ·关于基因功能分类 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| 3. 过氧化氢酶基因的克隆及表达分析 | 第40-49页 |
| ·材料与方法 | 第41-42页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-42页 |
| ·总RNA的提取 | 第41页 |
| ·引物设计 | 第41页 |
| ·RACE扩增 | 第41-42页 |
| ·序列分析 | 第42页 |
| ·荧光定量表达分析 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-47页 |
| ·全长序列克隆和氨基酸序列分析 | 第42-46页 |
| ·系统进化树分析 | 第46页 |
| ·ZjCAT基因在冬枣不同组织和果实成熟期的表达 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| 4. 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-62页 |
| 个人简介 | 第62-64页 |
| 导师简介 | 第64-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
