| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-19页 |
| ·肝癌研究现状 | 第11页 |
| ·溶瘤腺病毒和基因-病毒治疗癌症研究 | 第11-14页 |
| ·腺病毒 | 第11-12页 |
| ·溶瘤腺病毒 | 第12-14页 |
| ·miR-34a 研究进展 | 第14-18页 |
| ·本课题的研究目的和研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 病毒的构建、扩增和滴度的测定 | 第19-42页 |
| ·实验器材 | 第19-21页 |
| ·实验仪器 | 第19页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·实验试剂 | 第19-20页 |
| ·引物合成 | 第20页 |
| ·实验试剂的配制 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-29页 |
| ·pDC329-miR-34a 质粒载体的构建 | 第21-25页 |
| ·pDC329-P53 质粒载体的构建 | 第25-27页 |
| ·pDC329-P53-miR-34a 质粒载体的构建 | 第27-29页 |
| ·质粒载体 pDC329-miR-34a、pDC329-P53 和 pDC329-P53-miR-34a 的大量提取 | 第29页 |
| ·病毒的重组及鉴定 | 第29-34页 |
| ·病毒包装（Lipofectamine2000 共转染法） | 第29-30页 |
| ·病毒的鉴定 | 第30-34页 |
| ·病毒的大量扩增 | 第34-35页 |
| ·病毒的纯化和滴度测定 | 第35-36页 |
| ·病毒的纯化 | 第35页 |
| ·病毒的滴度测定 | 第35-36页 |
| ·实验结果 | 第36-40页 |
| ·载体构建结果 | 第36-39页 |
| ·病毒的鉴定结果 | 第39-40页 |
| ·病毒滴度测定结果 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 腺病毒在治疗肝癌的体外试验研究 | 第42-59页 |
| ·实验器材和试剂 | 第42-46页 |
| ·实验所需材料 | 第42页 |
| ·实验所需仪器 | 第42-43页 |
| ·实验所需主要试剂 | 第43-44页 |
| ·主要试剂配置方法 | 第44-46页 |
| ·RT-PCR 引物 | 第46页 |
| ·细胞培养及传代 | 第46-47页 |
| ·细胞杀伤实验 | 第47-48页 |
| ·RT-PCR 检测 miR-34a 和 P53 的表达 | 第48-50页 |
| ·样品准备 | 第48-50页 |
| ·利用 Western Blot 检测 P53 蛋白表达 | 第50-52页 |
| ·实验结果 | 第52-57页 |
| ·细胞杀伤实验结果 | 第52-54页 |
| ·RT-PCR 实验结果 | 第54-56页 |
| ·Western Blot 检测 P53 蛋白表达 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| 第四章 腺病毒在治疗肝癌的体内试验研究 | 第59-65页 |
| ·实验器材和试剂 | 第59-60页 |
| ·仪器设备 | 第59页 |
| ·实验用到的试剂 | 第59-60页 |
| ·实验动物 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-61页 |
| ·裸鼠肝癌移植瘤模型的建立 | 第60页 |
| ·分组治疗及肿瘤观测 | 第60-61页 |
| ·统计处理 | 第61页 |
| ·免疫组化 | 第61-62页 |
| ·收集样品 | 第61页 |
| ·石蜡切片处理 | 第61页 |
| ·对组织抗原进行修复 | 第61页 |
| ·免疫组化染色过程 | 第61-62页 |
| ·实验结果 | 第62-63页 |
| ·裸鼠肝癌 Huh7 移植瘤模型的建立 | 第62页 |
| ·瘤内注射治疗 Huh7 移植瘤疗效观察 | 第62-63页 |
| ·结论和讨论 | 第63-65页 |
| 全文小结 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 文献综述：miR-34 的调节机制研究进展 | 第71-79页 |
| 参考文献 | 第76-79页 |
| 攻读学位期间本人出版或公开发表的论著、论文 | 第79-80页 |
| 缩略词表 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
