摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-23页 |
1. 传毒介体 | 第9-10页 |
·蚜虫简介 | 第9页 |
·蚜虫口针 | 第9-10页 |
2 蚜虫传播非持久性病毒的机制 | 第10-13页 |
·三种病毒的研究概况 | 第10-13页 |
·芜菁花叶病毒概况 | 第10-11页 |
·甘蔗花叶病毒 | 第11-12页 |
·大豆花叶病毒 | 第12-13页 |
·非持久性病毒的传播机制 | 第13页 |
3. 花叶型植物病毒致病机制研究进展 | 第13-16页 |
·植物病毒CP与花叶症状的相关性 | 第14页 |
·植物病毒对寄主光合作用的影响 | 第14-15页 |
·植物病毒对寄主叶绿体结构及电子传递活性的影响 | 第15-16页 |
4. 蛋白质转运到叶绿体的研究进展 | 第16-21页 |
·引导蛋白转运和定位的信号——引导肽 | 第16-17页 |
·前体蛋白从胞质转运到叶绿体外膜 | 第17页 |
·前体蛋白的外膜转运 | 第17-19页 |
·叶绿体外膜易位子 | 第17-18页 |
·转运模型 | 第18-19页 |
·前体蛋白跨过叶绿体外膜 | 第19页 |
·前体蛋白的内膜转运 | 第19-20页 |
·叶绿体内膜易位子 | 第19-20页 |
·前体蛋白跨过叶绿体内膜 | 第20页 |
·前体蛋白的加工和折叠 | 第20页 |
·定位于类囊体的蛋白 | 第20-21页 |
5. 研究目的与意义 | 第21-23页 |
第二章 病原鉴定与病毒提纯 | 第23-41页 |
摘要 | 第23-24页 |
1. 病原鉴定 | 第24-28页 |
·实验材料、试剂 | 第24页 |
·材料 | 第24页 |
·试剂 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-28页 |
·植物总RNA的提取 | 第24-25页 |
·引物设计 | 第25页 |
·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第25-26页 |
·PCR产物的割胶纯化 | 第26页 |
·利用T-A连接构建克隆载体 | 第26页 |
·转化和筛选 | 第26-27页 |
·重组质粒的制备和鉴定 | 第27页 |
·目的序列的测定及分析 | 第27-28页 |
2. 病毒提纯 | 第28-29页 |
·实验材料与试剂 | 第28页 |
·材料 | 第28页 |
·试剂 | 第28页 |
·方法 | 第28-29页 |
·病毒粒子电镜观察 | 第29页 |
·提纯病毒紫外检测 | 第29页 |
3 结果与分析 | 第29-40页 |
·病毒检测 | 第29-31页 |
·序列的测定与同源性分析 | 第31-38页 |
·青菜病样扩增得到的NJ-TuMV-CP基因序列分析 | 第31-32页 |
·大豆病样扩增得到的HZ-SMV-CP基因序列分析 | 第32-34页 |
·玉米病样扩增得到的JY-SCMV-CP、JY-HC-Pro、JY-Vpg和JY-NIb基因序列分析 | 第34-38页 |
·病毒提纯及紫外检测 | 第38-39页 |
·病毒粒子的电镜观察 | 第39-40页 |
4. 结论与讨论 | 第40-41页 |
第三章 三种蚜传病毒外壳蛋白叶绿体离体跨膜运输 | 第41-55页 |
摘要 | 第41页 |
1 材料与方法 | 第41-45页 |
·材料 | 第41-42页 |
·方法 | 第42-45页 |
·抗血清制备 | 第42页 |
·效价测定 | 第42页 |
·Western-blot检测抗血清Tu11、S21和SC31特异性 | 第42-43页 |
·完整游离叶绿体的制备 | 第43页 |
·叶绿体表面附着蛋白的去除 | 第43页 |
·叶绿体蛋白的抽提 | 第43页 |
·三种病毒外壳蛋白的叶绿体离体跨膜运输 | 第43-44页 |
·SDS-PAGE电泳和Western blot检测 | 第44-45页 |
2 结果与分析 | 第45-52页 |
·抗血清效价测定 | 第45-46页 |
·抗血清特异性检测 | 第46-47页 |
·完整游离的叶绿体的制备 | 第47-48页 |
·三种病毒外壳蛋白的青菜、大豆和玉米叶绿体离体跨膜运输 | 第48页 |
·不同孵育时间TuMV-CP、SMV-CP和SCMV-CP的叶绿体离体跨膜运输 | 第48-51页 |
·TuMV-CP、SMV-CP和SCMV-CP的叶绿体离体跨膜运输与各自浓度的关系 | 第51-52页 |
3. 结论与讨论 | 第52-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
附录1 本研究所用的试剂与缓冲液的配制 | 第63-67页 |
附录2 缩写词和英汉对照 | 第67-69页 |
附录3 常用生化及分子生物学试剂与仪器 | 第69-71页 |
致谢 | 第71-73页 |