| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-23页 |
| 1. 传毒介体 | 第9-10页 |
| ·蚜虫简介 | 第9页 |
| ·蚜虫口针 | 第9-10页 |
| 2 蚜虫传播非持久性病毒的机制 | 第10-13页 |
| ·三种病毒的研究概况 | 第10-13页 |
| ·芜菁花叶病毒概况 | 第10-11页 |
| ·甘蔗花叶病毒 | 第11-12页 |
| ·大豆花叶病毒 | 第12-13页 |
| ·非持久性病毒的传播机制 | 第13页 |
| 3. 花叶型植物病毒致病机制研究进展 | 第13-16页 |
| ·植物病毒CP与花叶症状的相关性 | 第14页 |
| ·植物病毒对寄主光合作用的影响 | 第14-15页 |
| ·植物病毒对寄主叶绿体结构及电子传递活性的影响 | 第15-16页 |
| 4. 蛋白质转运到叶绿体的研究进展 | 第16-21页 |
| ·引导蛋白转运和定位的信号——引导肽 | 第16-17页 |
| ·前体蛋白从胞质转运到叶绿体外膜 | 第17页 |
| ·前体蛋白的外膜转运 | 第17-19页 |
| ·叶绿体外膜易位子 | 第17-18页 |
| ·转运模型 | 第18-19页 |
| ·前体蛋白跨过叶绿体外膜 | 第19页 |
| ·前体蛋白的内膜转运 | 第19-20页 |
| ·叶绿体内膜易位子 | 第19-20页 |
| ·前体蛋白跨过叶绿体内膜 | 第20页 |
| ·前体蛋白的加工和折叠 | 第20页 |
| ·定位于类囊体的蛋白 | 第20-21页 |
| 5. 研究目的与意义 | 第21-23页 |
| 第二章 病原鉴定与病毒提纯 | 第23-41页 |
| 摘要 | 第23-24页 |
| 1. 病原鉴定 | 第24-28页 |
| ·实验材料、试剂 | 第24页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·试剂 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-28页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第24-25页 |
| ·引物设计 | 第25页 |
| ·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第25-26页 |
| ·PCR产物的割胶纯化 | 第26页 |
| ·利用T-A连接构建克隆载体 | 第26页 |
| ·转化和筛选 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的制备和鉴定 | 第27页 |
| ·目的序列的测定及分析 | 第27-28页 |
| 2. 病毒提纯 | 第28-29页 |
| ·实验材料与试剂 | 第28页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·试剂 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-29页 |
| ·病毒粒子电镜观察 | 第29页 |
| ·提纯病毒紫外检测 | 第29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-40页 |
| ·病毒检测 | 第29-31页 |
| ·序列的测定与同源性分析 | 第31-38页 |
| ·青菜病样扩增得到的NJ-TuMV-CP基因序列分析 | 第31-32页 |
| ·大豆病样扩增得到的HZ-SMV-CP基因序列分析 | 第32-34页 |
| ·玉米病样扩增得到的JY-SCMV-CP、JY-HC-Pro、JY-Vpg和JY-NIb基因序列分析 | 第34-38页 |
| ·病毒提纯及紫外检测 | 第38-39页 |
| ·病毒粒子的电镜观察 | 第39-40页 |
| 4. 结论与讨论 | 第40-41页 |
| 第三章 三种蚜传病毒外壳蛋白叶绿体离体跨膜运输 | 第41-55页 |
| 摘要 | 第41页 |
| 1 材料与方法 | 第41-45页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·方法 | 第42-45页 |
| ·抗血清制备 | 第42页 |
| ·效价测定 | 第42页 |
| ·Western-blot检测抗血清Tu11、S21和SC31特异性 | 第42-43页 |
| ·完整游离叶绿体的制备 | 第43页 |
| ·叶绿体表面附着蛋白的去除 | 第43页 |
| ·叶绿体蛋白的抽提 | 第43页 |
| ·三种病毒外壳蛋白的叶绿体离体跨膜运输 | 第43-44页 |
| ·SDS-PAGE电泳和Western blot检测 | 第44-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-52页 |
| ·抗血清效价测定 | 第45-46页 |
| ·抗血清特异性检测 | 第46-47页 |
| ·完整游离的叶绿体的制备 | 第47-48页 |
| ·三种病毒外壳蛋白的青菜、大豆和玉米叶绿体离体跨膜运输 | 第48页 |
| ·不同孵育时间TuMV-CP、SMV-CP和SCMV-CP的叶绿体离体跨膜运输 | 第48-51页 |
| ·TuMV-CP、SMV-CP和SCMV-CP的叶绿体离体跨膜运输与各自浓度的关系 | 第51-52页 |
| 3. 结论与讨论 | 第52-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 附录1 本研究所用的试剂与缓冲液的配制 | 第63-67页 |
| 附录2 缩写词和英汉对照 | 第67-69页 |
| 附录3 常用生化及分子生物学试剂与仪器 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71-73页 |