摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
目录 | 第6-8页 |
第一章 绪论 | 第8-16页 |
1 作物耐热性研究进展 | 第8-12页 |
·高温对作物生长发育的影响 | 第8页 |
·髙温对作物生理生化特性的影响 | 第8-12页 |
·高温对作物光合作用及相关酶的影响 | 第8-9页 |
·高温时作物细胞内Ca~(2+)浓度变化的影响 | 第9页 |
·高温时作物体内内源激素变化的影响 | 第9-10页 |
·高温时作物体内多胺及游离脯氨酸含量的影响 | 第10-11页 |
·高温时作物细胞内热稳定性和酶保护系统的影响 | 第11页 |
·高温与作物的热激蛋白及热激转录因子 | 第11-12页 |
2 棉花高温耐性研究进展 | 第12-13页 |
3 SSH和EST技术的研究进展 | 第13-14页 |
·抑制差减杂交(SSH) | 第13-14页 |
·表达序列标签 | 第14页 |
4 展望 | 第14-15页 |
5 本研究的内容和目的 | 第15-16页 |
·不同发育时期花粉中应答高温胁迫的基因克隆 | 第15页 |
·对耐高温基因进行测序及生物信息学分析 | 第15-16页 |
第二章 不同耐高温类型棉花的总RNA提取 | 第16-20页 |
1.材料 | 第16-17页 |
·实验材料 | 第16页 |
·试剂 | 第16页 |
·仪器和设备 | 第16-17页 |
2 试验方法 | 第17页 |
3 实验步骤 | 第17页 |
·总RNA的提取(Trizol法)及检测 | 第17页 |
·mRNA纯化和检测 | 第17页 |
·cDNA反转录机检测 | 第17页 |
·cDNA第一链的合成 | 第17页 |
·cDNA第二链的合成 | 第17页 |
4 结果与分析 | 第17-19页 |
·提取的总RNA产量及纯度分析 | 第17-18页 |
·cDNA合成电泳检测 | 第18-19页 |
5 讨论 | 第19-20页 |
第三章 棉花高温耐性相关基因的SSH文库构建及序列分析 | 第20-40页 |
1 材料 | 第20页 |
·实验材料 | 第20页 |
·实验药品与仪器 | 第20页 |
2 试验方法 | 第20页 |
3 实验步骤 | 第20-22页 |
·cDNA RsaI酶切 | 第20页 |
·接头拼接 | 第20页 |
·差减文库克隆 | 第20-22页 |
·2次PCR扩增差减文库 | 第20-21页 |
·差减文库的克隆 | 第21页 |
·克隆插入片断的PCR鉴定 | 第21-22页 |
4 结果与分析 | 第22-38页 |
·cDNA酶切效果分析 | 第22页 |
·第二次抑制PCR扩增反应结果 | 第22-23页 |
·连接、转化及SSH文库的获得 | 第23页 |
·差减文库质量检测 | 第23-24页 |
·EST功能注释和代谢途径分析 | 第24-29页 |
·Gh-HSP70基因相关分析 | 第29-32页 |
·HSP70基因(T-C05)酶切图谱分析 | 第29页 |
·氨基酸序列分析 | 第29页 |
·功能保守域分析 | 第29-30页 |
·氣基酸多重序列比对及进化树分析 | 第30-32页 |
·Gh-庶糖转化酶基因相关分析 | 第32-35页 |
·蔗糖转化酶基因(T-G15)酶切图谱分析 | 第32页 |
·氣基酸序列分析 | 第32页 |
·功能保守域分析 | 第32-33页 |
·氨基酸多重序列比对及进化树分析 | 第33-35页 |
·Gh-尿昔二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因相关分析 | 第35-38页 |
·尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因(H-H29)酶切图谱分析 | 第35页 |
·氨基酸序列分析 | 第35页 |
·功能保守域分析 | 第35-36页 |
·氨基酸多重序列比对及进化树分析 | 第36-38页 |
5 讨论 | 第38-39页 |
6 结论 | 第39-40页 |
缩略词表 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-48页 |
附录 | 第48-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
作者简介 | 第52页 |