转FSHα/β基因克隆猪分子鉴定及常规生理生化指标测定
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-22页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 1 高繁殖力FSH基因简介 | 第9-10页 |
| 2 动物转基因技术简介 | 第10-13页 |
| ·转基因克隆技术研究进展 | 第10-11页 |
| ·BAC介导的大片段转基因技术简介 | 第11-13页 |
| 3 转基因动物分子鉴定技术 | 第13-20页 |
| ·DNA水平的检测 | 第13-15页 |
| ·基于标记基因的特异性PCR鉴定 | 第14页 |
| ·外源基因特异性序列或SNP的检测 | 第14-15页 |
| ·DNA拷贝数的检测 | 第15页 |
| ·RNA表达水平的检测 | 第15-16页 |
| ·蛋白质表达水平的检测 | 第16-17页 |
| ·Western blot | 第16-17页 |
| ·ELISA | 第17页 |
| ·整合位点的研究 | 第17-20页 |
| ·荧光原位杂交—FISH | 第17-18页 |
| ·染色体步移法 | 第18-20页 |
| ·表观遗传学—甲基化分析 | 第20页 |
| 4 转基因动物生长发育分析 | 第20-21页 |
| 5 本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 实验内容 | 第22-55页 |
| 1 前言 | 第22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-35页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·BAC及菌株 | 第22页 |
| ·转基因猪及对照大白猪 | 第22页 |
| ·主要试剂及配制 | 第22-23页 |
| ·仪器及设备 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-34页 |
| ·整体实验思路 | 第24页 |
| ·DNA及蛋白质提取方法 | 第24页 |
| ·基于标记基因Neo的PCR | 第24-26页 |
| ·Southern检测 | 第26-27页 |
| ·整合位点检测 | 第27-30页 |
| ·FSHα/β基因拷贝数的检测 | 第30-31页 |
| ·FSH蛋白表达水平的检测 | 第31-33页 |
| ·甲基化分析 | 第33-34页 |
| ·转基因猪生长发育水平及血液生理生化指标检测 | 第34页 |
| ·统计分析 | 第34-35页 |
| 3 实验结果 | 第35-50页 |
| ·目的基因FSHaα/β以及标记基因Neo的检测 | 第35-38页 |
| ·转基因猪个体的检测 | 第35-36页 |
| ·转基因猪排泄物的检测 | 第36-38页 |
| ·FSHβ基因Southern检测结果 | 第38-39页 |
| ·外源FSHa/β基因拷贝数结果 | 第39-42页 |
| ·整合位点的获得 | 第42-45页 |
| ·Genome Walking结果 | 第43-45页 |
| ·表达水平结果 | 第45-47页 |
| ·Western blot结果 | 第45-47页 |
| ·FSH-β启动子甲基化结果 | 第47页 |
| ·生理生化指标测定 | 第47-50页 |
| 4 分析和讨论 | 第50-55页 |
| 小结 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 个人简历 | 第66页 |
