中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-13页 |
第一部分 EV71感染患儿细胞因子检测 | 第13-38页 |
前言 | 第13-16页 |
材料与方法 | 第16-23页 |
1 研究对象及样本采集 | 第16页 |
·研究对象 | 第16页 |
·样本采集 | 第16页 |
2 实验材料 | 第16-17页 |
·试剂 | 第16-17页 |
·仪器和设备 | 第17页 |
3 引物 | 第17-18页 |
4 实验方法和步骤 | 第18-22页 |
·通过PCR扩增EV71片段进行标本的复核 | 第18-20页 |
·血浆细胞因子检测 | 第20-22页 |
5 统计分析 | 第22-23页 |
结果 | 第23-32页 |
1 血浆样本研究结果 | 第23-27页 |
·一般情况 | 第23页 |
·实验室检查 | 第23-24页 |
·细胞因子表达变化 | 第24-27页 |
2 脑脊液研究结果 | 第27-32页 |
·一般情况及实验室检查 | 第27页 |
·前炎症因子及抑炎因子表达变化 | 第27-28页 |
·趋化因子表达变化 | 第28-29页 |
·干扰素表达变化 | 第29-30页 |
·激素或丙球治疗对细胞因子的影响 | 第30-32页 |
讨论 | 第32-38页 |
第二部分 EV71感染患儿PRRs基因表达分析 | 第38-55页 |
前言 | 第38-40页 |
材料与方法 | 第40-48页 |
1 研究对象及样本采集 | 第40页 |
·研究对象 | 第40页 |
·样本采集 | 第40页 |
2 实验材料及仪器 | 第40-41页 |
·试剂 | 第40-41页 |
·主要溶液的配制 | 第41页 |
·仪器和设备 | 第41页 |
3 实验方法和步骤 | 第41-46页 |
·PBMC的分选 | 第41-42页 |
·血液标本PBMCmRNA的提取 | 第42-43页 |
·mRNA反转录 | 第43页 |
·Real-time PCR标准品的制备 | 第43-45页 |
·Real-time PCR | 第45-46页 |
4 统计分析 | 第46-48页 |
结果 | 第48-51页 |
1 EV71感染患儿TLR1-10 mRNA表达变化 | 第48-49页 |
2 EV71感染患儿RIG-Ⅰ,Mda-5 mRNA表达变化 | 第49-50页 |
3 EV71感染患儿NLRs mRNA表达变化 | 第50-51页 |
讨论 | 第51-55页 |
第三部分:EV71感染巨噬细胞的免疫应答反应 | 第55-74页 |
前言 | 第55-57页 |
材料与方法 | 第57-66页 |
1 实验材料及仪器 | 第57-58页 |
·实验材料 | 第57-58页 |
·Western blot所需溶液的配制 | 第58页 |
·仪器和设备 | 第58页 |
2 实验方法及步骤 | 第58-65页 |
·病毒的扩增及滴度的测定 | 第58-60页 |
·人类原代巨噬细胞的分选、培养 | 第60-61页 |
·EV71感染巨噬细胞 | 第61-62页 |
·EV71病毒复制的检测 | 第62-64页 |
·EV71感染巨噬细胞细胞因子检测 | 第64-65页 |
·EV71感染巨噬细胞PRRs mRNA表达的测定 | 第65页 |
3 统计学分析 | 第65-66页 |
结果 | 第66-71页 |
1 EV71有效感染人原代培养巨噬细胞 | 第66页 |
2. EV71在巨噬细胞中的复制 | 第66-68页 |
3. EV71诱导前炎症因子而非干扰素分泌 | 第68-69页 |
4. EV71诱导巨噬细胞分泌趋化因子 | 第69页 |
5. EV71激活巨噬细胞TLRs的表达 | 第69-71页 |
讨论 | 第71-74页 |
结论 | 第74-75页 |
附录 中英文缩略词表 | 第75-81页 |
参考文献 | 第81-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
论文发表 | 第88页 |