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鸡Nramp1基因的遗传变异、表达以及与部分免疫性状的关联分析

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
第一章 文献综述第11-23页
 1 抗病育种概述第11-14页
   ·抗病育种的遗传基础第11-12页
   ·抗性基因第12页
   ·表型选择第12页
   ·标记辅助选择第12-13页
   ·转基因与抗病育种第13页
   ·候选基因法与抗病育种第13-14页
 2 免疫概述第14-15页
   ·免疫球蛋白第14-15页
 3 免疫指标测定方法第15-17页
   ·免疫器官指数检测方法第15页
   ·H/L值的测定第15页
   ·MTT法第15-16页
   ·ELISA法第16-17页
 4 Nramp1基因的研究进展第17-19页
   ·Nramp1基因的序列结构第17-18页
   ·Nramp1的可能功能与作用机制第18页
   ·Nramp1基因的研究现状第18-19页
 5 PCR-SSCP技术第19-20页
 6 荧光定量PCR第20-22页
   ·荧光定量PCR原理第20-21页
   ·荧光化学第21页
   ·荧光定量PCR的应用第21-22页
 7 本研究的目的和意义第22-23页
第二章 鸡Nramp1基因PCR-SSCP多态性研究第23-34页
 1 实验材料与试剂第23-25页
   ·试验材料第23页
   ·采样方法和测定时间第23页
   ·主要仪器设备第23-24页
   ·主要试剂第24页
   ·常规溶液及试剂配制第24-25页
 2 实验方法第25-26页
   ·实验引物第25页
   ·禽血DNA的提取第25页
   ·DNA浓度和纯度的检测第25页
   ·稀释引物第25-26页
   ·PCR最佳反应条件的确定第26页
   ·PCR扩增产物检测第26页
   ·PCR-SSCP分析第26页
 3 统计方法第26-27页
   ·基因频率和基因型频率的计算第26-27页
   ·15个品种的Hardy-Weinberg平衡检验第27页
   ·群体遗传参数及系统树的绘制第27页
   ·杂合度(Heterozygosity,H),即基因多样性第27页
   ·多态信息含量(Polymrphism Information Content,PIC)第27页
   ·有效等位基因数(Effective Number of Alleles,Ne)第27页
 4 结果第27-33页
   ·鸡基因组DNA的提取第27-28页
   ·PCR产物的扩增结果第28页
   ·PCR-SSCP结果第28-30页
   ·不同品种基因型分布第30页
   ·不同品种的基因频率的差异比较第30-32页
   ·Nramp1基因的群体遗传变异分析第32-33页
 5 讨论第33-34页
第三章 免疫性状以及生产性状的测定第34-48页
 1 实验材料与试剂第34-35页
   ·试验材料第34页
   ·采样方法和测定时间第34页
   ·主要仪器设备第34页
   ·主要试剂第34页
   ·常规试剂配制第34-35页
 2 实验方法第35-38页
   ·免疫指数的测定第35页
   ·H/L比值的测定第35页
   ·淋巴细胞转化率的测定第35-37页
   ·IgG和IgM含量的测定第37页
   ·12周龄如皋鸡生产性能的测定第37-38页
   ·统计模型第38页
 3 结果第38-45页
   ·如皋鸡不同周龄之间免疫指标的比较第38-39页
   ·如皋鸡免疫指标不同周龄间的比较第39-41页
   ·不同鸡品种的免疫性状的比较第41-42页
   ·不同基因型与免疫指数之间的相关分析第42-43页
   ·不同基因型免疫性状的比较第43页
   ·如皋鸡不同基因型经济性状的比较第43-45页
 4 讨论第45-48页
   ·如皋鸡免疫指数的变化规律第45页
   ·如皋鸡淋巴细胞转化率的变化规律第45页
   ·如皋鸡免疫球蛋白的变化规律第45-46页
   ·不同品种之间免疫性状的比较第46页
   ·Nramp1基因多态性与免疫指标和经济性状的相关分析第46-48页
第四章 Nramp1基因的动态表达规律第48-58页
 1 试验材料第48页
 2 实验试剂与材料第48-49页
   ·主要仪器设备第48页
   ·主要试剂第48页
   ·实验引物第48-49页
 3 实验方法第49-51页
   ·提取RNA前的准备工作第49页
   ·总RNA的提取第49页
   ·RNA质量和浓度测第49页
   ·RT-PCR扩增第49-50页
   ·实时荧光定量PCR检测第50-51页
   ·统计方法第51页
 4 结果第51-56页
   ·如皋鸡总RNA的提取第51页
   ·Nramp1基因扩增产物的特异性第51-52页
   ·如皋鸡11个组织Nramp1基因表达量的研究第52页
   ·Nramp1在如皋鸡中的表达规律第52-53页
   ·Nramp1基因在如皋鸡的不同性别,不同周龄免疫器官中的差异表达第53-54页
   ·Nramp1基因在12周龄的不同品种中的差异表达第54-55页
   ·Nramp1基因在不同基因型个体的免疫器官中的表达规律第55-56页
 5 讨论第56-58页
第五章 结论第58-59页
参考文献第59-67页
致谢第67-68页
攻读学位期间发表和参与发表的学术论文目录第68-69页

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