| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 1 绪论 | 第11-24页 |
| ·迟缓爱德华氏菌研究概况 | 第11-16页 |
| ·迟缓爱德华氏菌简介 | 第11页 |
| ·迟缓爱德华氏菌的流行病学 | 第11-12页 |
| ·迟缓爱德华氏菌的感染途径 | 第12-14页 |
| ·迟缓爱德华氏菌的毒力调控网络 | 第14-15页 |
| ·迟缓爱德华氏菌病的防治 | 第15-16页 |
| ·细菌唾液酸酶研究概况 | 第16-24页 |
| ·细菌唾液酸酶简介 | 第16-21页 |
| ·细菌唾液酸酶的结构 | 第21-23页 |
| ·细菌唾液酸酶的功能 | 第23-24页 |
| ·本论文的研究目的及意义 | 第24页 |
| 2 迟缓爱德华氏菌唾液酸酶 NanA 的克隆、表达与活性检测 | 第24-40页 |
| ·材料和方法 | 第25-36页 |
| ·基因的克隆 | 第26-30页 |
| ·基因组 DNA 的提取 | 第26-27页 |
| ·nanA 基因的扩增 | 第27页 |
| ·nanA 基因的序列鉴定和分析 | 第27-30页 |
| ·基因的表达 | 第30-36页 |
| ·NanA 蛋白原核表达菌株的构建 | 第30-32页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第32-34页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第34页 |
| ·重组蛋白的复性 | 第34-35页 |
| ·重组蛋白的活性检测 | 第35-36页 |
| ·结果与讨论 | 第36-40页 |
| ·基因的克隆与序列分析 | 第36-37页 |
| ·重组蛋白的表达纯化 | 第37-38页 |
| ·复性蛋白的唾液酸酶活性 | 第38-40页 |
| ·本章小结 | 第40页 |
| 3 nanA 基因突变型菌株的构建和功能分析 | 第40-55页 |
| ·材料和方法 | 第41-49页 |
| ·nanA 突变型菌株的构建 | 第42-43页 |
| ·同源重组片段的克隆 | 第42页 |
| ·重组自杀质粒的构建 | 第42-43页 |
| ·同源重组获得突变体 | 第43页 |
| ·菌株生长状况的分析 | 第43页 |
| ·菌株对牙鲆致死率的测定 | 第43-44页 |
| ·菌株对牙鲆组织侵染能力的测定 | 第44页 |
| ·菌株对牙鲆巨噬细胞呼吸爆发影响的测定 | 第44-45页 |
| ·菌株在巨噬细胞中复制能力的测定 | 第45-46页 |
| ·菌株对牙鲆巨噬细胞免疫相关基因表达影响的测定 | 第46-49页 |
| ·结果和讨论 | 第49-55页 |
| ·突变型菌株的构建 | 第49页 |
| ·菌株生长状况的比较 | 第49-50页 |
| ·菌株对牙鲆致病力的比较 | 第50-52页 |
| ·菌株对牙鲆巨噬细胞免疫指标影响的比较 | 第52-53页 |
| ·菌株在牙鲆巨噬细胞中复制能力的比较 | 第53-54页 |
| ·菌株刺激牙鲆巨噬细胞免疫相关基因表达情况的比较 | 第54-55页 |
| ·本章小结 | 第55页 |
| 4 rNanA 的抗原保护效应检测 | 第55-58页 |
| ·材料和方法 | 第56-57页 |
| ·重组蛋白保护效应的检测 | 第56页 |
| ·抗体效价的检测 | 第56-57页 |
| ·免疫后牙鲆血清杀菌能力检测 | 第57页 |
| ·结果和讨论 | 第57-58页 |
| ·本章小结 | 第58页 |
| 5 结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 附录 | 第64-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 个人简历 | 第70页 |
| 已发表文章 | 第70页 |