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ENU诱导小鼠突变及对一种白斑突变基因的定位鉴定

致谢第1-5页
摘要第5-6页
ABSTRACT第6-7页
目录第7-9页
符号说明第9-10页
1 综述:ENU诱导小鼠突变的研究进展第10-34页
   ·ENU和小鼠第10-13页
     ·ENU及其诱变机制第10-12页
       ·ENU物理化学性质简介第10-11页
       ·ENU诱变的分子机制第11-12页
     ·实验动物小鼠简介第12-13页
   ·ENU诱变小鼠实验的历史背景第13-17页
     ·功能基因组学的产生第13-15页
     ·分子标记和基因定位、克隆技术的应用第15-17页
   ·ENU诱变小鼠实验的兴起第17-20页
   ·当今ENU诱变小鼠实验的概况第20-28页
     ·ENU诱变小鼠的实验方法第20-21页
     ·ENU诱导小鼠突变的突变率第21-23页
     ·ENU诱变小鼠的变异的分布状态和范围第23-24页
     ·ENU诱导小鼠突变的筛查方法第24-27页
       ·突变体小鼠异常表型的筛查方法第24-26页
       ·ENU诱变小鼠的分子变异的筛查方法第26-27页
     ·ENU诱导的突变体小鼠文库的建立第27-28页
   ·小鼠中的ENU诱变和基因敲除技术第28-32页
     ·小鼠中的基因敲除技术第28-29页
     ·ENU诱变技术同基因敲除的比较第29-31页
     ·ENU诱变技术是小鼠基因敲除研究的重要补充第31-32页
   ·展望第32-34页
2 ENU诱导小鼠突变的研究第34-45页
   ·材料与方法第34-35页
     ·实验材料第34页
       ·实验动物第34页
       ·实验药品第34页
       ·动物饲养环境第34页
     ·实验方法第34-35页
       ·ENU处理C57BL/6J雄鼠第35页
       ·繁殖突变小鼠G1代第35页
       ·筛查可见的突变表型第35页
       ·显性遗传表型的检测第35页
       ·突变表型遗传模式的确定第35页
   ·实验结果第35-42页
     ·ENU处理后雄鼠的生殖情况第35-36页
     ·筛查G1代小鼠后获得的突变表型第36-41页
     ·获得9种能够传代的G1代突变系小鼠第41-42页
   ·讨论第42-44页
     ·ENU诱变的注射剂量及小鼠品系的选择第42页
     ·ENU诱变小鼠实验的异常表型的筛查方法第42-43页
     ·ENU诱变小鼠实验的筛查工具第43页
     ·ENU诱变实验的问题第43-44页
   ·ENU诱变小鼠实验的优势第44-45页
3 Kitl~(-2Bao)小鼠白斑突变基因的定位和鉴定第45-61页
   ·实验材料第45-47页
     ·实验动物第45页
     ·动物饲养条件第45页
     ·主要仪器和设备第45页
     ·主要试剂第45-46页
     ·主要试剂的配置第46-47页
   ·实验方法第47-52页
     ·繁殖Kitl~(-2Bao)白斑突变小鼠的F2代第47页
     ·提取F2代小鼠的DNA样本第47页
     ·PCR扩增F2代DNA样本第47-48页
     ·PCR产物电泳第48页
     ·计算LOD值第48-49页
     ·进一步精确定位第49页
     ·准备Kitl~(-2Bao)白斑突变小鼠基因鉴定的实验材料第49页
     ·设计并合成RT-PCR引物第49页
     ·提取Kitl~(-2Bao)白斑突变小鼠的RNA第49-50页
     ·将上面提取的RNA逆转录成cDNA第50页
     ·PCR扩增Kitl基因第50-51页
     ·将RT-PCR的产物电泳第51页
     ·将RT-PCR的产物胶回收纯化并测序第51-52页
     ·RT-PCR产物测序之后的序列比对第52页
   ·实验结果第52-58页
     ·Kitl~(-2Bao)白斑突变小鼠的表型特征及遗传模式第52-53页
     ·Kitl~(-2Bao)白斑突变基因的染色体定位第53-56页
     ·Kitl~(-2Bao)白斑突变基因的鉴定第56-58页
   ·讨论第58-61页
     ·分子标记和基因定位、克隆技术的应用第58-59页
     ·Kitl~(-2Bao)白斑突变小鼠价值第59-61页
4 参考文献第61-66页

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