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新的丙型肝炎病毒细胞培养模型建立的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
目录第8-9页
前言第9-13页
第一章 材料与方法第13-35页
   ·实验材料第13-15页
     ·实验所使用的菌株、质粒和细胞株第13页
     ·主要试剂及来源第13-14页
     ·实验所需主要仪器设备第14-15页
   ·实验技术路线第15-16页
     ·重组质粒以及复制缺陷重组质粒的构建第15-16页
     ·重组质粒以及复制缺陷重组质粒在HEK-293T细胞中的表达第16页
   ·实验方法第16-35页
     ·pSL304和pSL305质粒的提取第16-18页
     ·重组质粒的构建第18-23页
     ·复制缺陷型重组质粒构建第23-28页
     ·细胞培养第28页
     ·细胞转染第28-29页
     ·萤火虫荧光素酶测定第29页
     ·半定量RT-PCR检测HCV RNA的表达第29-32页
     ·荧光定量PCR检测细胞培养液中HCV RNA量第32-34页
     ·统计学分析第34-35页
第二章 结果第35-43页
   ·pSL307质粒结构及质粒构建第35-37页
   ·质粒pSL308的构建第37-39页
   ·转染细胞中荧光素酶的表达第39-40页
   ·HCV RNA在转染细胞中的表达和复制第40-41页
   ·荧光定量PCR测定细胞培养基中HCV RNA量第41-43页
第三章 讨论第43-48页
   ·HCV的研究模型第43-45页
   ·含萤火虫荧光素酶基因的复制子的构建第45-48页
第四章 结论第48-49页
参考文献第49-53页
综述第53-64页
 参考文献第60-64页
致谢第64-65页
攻读学位期间的主要成果第65页

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