摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
目录 | 第8-9页 |
前言 | 第9-13页 |
第一章 材料与方法 | 第13-35页 |
·实验材料 | 第13-15页 |
·实验所使用的菌株、质粒和细胞株 | 第13页 |
·主要试剂及来源 | 第13-14页 |
·实验所需主要仪器设备 | 第14-15页 |
·实验技术路线 | 第15-16页 |
·重组质粒以及复制缺陷重组质粒的构建 | 第15-16页 |
·重组质粒以及复制缺陷重组质粒在HEK-293T细胞中的表达 | 第16页 |
·实验方法 | 第16-35页 |
·pSL304和pSL305质粒的提取 | 第16-18页 |
·重组质粒的构建 | 第18-23页 |
·复制缺陷型重组质粒构建 | 第23-28页 |
·细胞培养 | 第28页 |
·细胞转染 | 第28-29页 |
·萤火虫荧光素酶测定 | 第29页 |
·半定量RT-PCR检测HCV RNA的表达 | 第29-32页 |
·荧光定量PCR检测细胞培养液中HCV RNA量 | 第32-34页 |
·统计学分析 | 第34-35页 |
第二章 结果 | 第35-43页 |
·pSL307质粒结构及质粒构建 | 第35-37页 |
·质粒pSL308的构建 | 第37-39页 |
·转染细胞中荧光素酶的表达 | 第39-40页 |
·HCV RNA在转染细胞中的表达和复制 | 第40-41页 |
·荧光定量PCR测定细胞培养基中HCV RNA量 | 第41-43页 |
第三章 讨论 | 第43-48页 |
·HCV的研究模型 | 第43-45页 |
·含萤火虫荧光素酶基因的复制子的构建 | 第45-48页 |
第四章 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
综述 | 第53-64页 |
参考文献 | 第60-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
攻读学位期间的主要成果 | 第65页 |