| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-12页 |
| 引言 | 第12-15页 |
| 第一章 人死亡受体5真核表达载体的构建 | 第15-35页 |
| 1 前言 | 第15-16页 |
| 2 材料 | 第16-21页 |
| ·主要试剂 | 第16-20页 |
| ·细胞系及细胞培养的试剂 | 第16-17页 |
| ·核酸提取扩增主要试剂 | 第17-18页 |
| ·核酸提取、扩增缓冲液及主要试剂的配制: | 第18-20页 |
| ·引物设计 | 第20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 3 方法 | 第21-28页 |
| ·细胞培养 | 第21页 |
| ·人Jurkat细胞总RNA的提取 | 第21-22页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第22页 |
| ·RT-PCR | 第22-24页 |
| ·逆转录 | 第22-23页 |
| ·PCR反应 | 第23页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第23-24页 |
| ·DR5的真核表达质粒构建及鉴定 | 第24-28页 |
| ·双酶切pcDNA3.0真核表达载体片段制备 | 第24页 |
| ·重组表达质粒pcDNA3.0/DR5的构建(连接) | 第24-25页 |
| ·制备JM109宿主菌感受态细胞 | 第25-26页 |
| ·重组表达质粒pcDNA3.0/DR5转化及扩增 | 第26页 |
| ·重组表达质粒的提取及鉴定 | 第26-28页 |
| 4 结果 | 第28-33页 |
| ·Jurkat细胞总RNA的提取 | 第28页 |
| ·DR5真核表达载体pcDNA3.0/DR5酶切鉴定 | 第28-29页 |
| ·真核表达载体的DNA测序结果 | 第29-33页 |
| 5 讨论 | 第33页 |
| 参考文献 | 第33-35页 |
| 第二章 水流动力学制备高效价的抗DR5多克隆抗体 | 第35-53页 |
| 1 前言 | 第35-36页 |
| 2 材料与方法 | 第36-47页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·试剂 | 第36页 |
| ·主要溶液 | 第36-42页 |
| ·LB培养基 | 第36-37页 |
| ·蛋白质免疫印迹 | 第37-40页 |
| ·免疫组化 | 第40-41页 |
| ·ELISA试剂 | 第41-42页 |
| ·方法 | 第42-47页 |
| ·质粒大量快速提取 | 第42-43页 |
| ·小鼠免疫 | 第43页 |
| ·抗体滴度的ELISA测定 | 第43-44页 |
| ·Western blot | 第44-46页 |
| ·免疫组织化学检查 | 第46-47页 |
| 3 结果 | 第47-50页 |
| ·质粒DNA提取浓度测定 | 第47页 |
| ·抗体滴度的ELISA鉴定 | 第47-48页 |
| ·抗DR5多克隆抗体的鉴定 | 第48-49页 |
| ·抗DR5多克隆抗体的免疫组织化学检测 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-53页 |
| 第三章 抗DR5单克隆抗体的研制 | 第53-64页 |
| 1 前言 | 第53-54页 |
| 2 材料和方法 | 第54-59页 |
| ·细胞系 | 第54页 |
| ·主要仪器设备 | 第54-55页 |
| ·重组质粒pcDNA3.0/DR5免疫小鼠 | 第55页 |
| ·融合前的准备 | 第55-56页 |
| ·细胞融合和杂交瘤的筛选 | 第56-57页 |
| ·ELISA法筛选单克隆抗体 | 第57页 |
| ·单抗亚类测定 | 第57-58页 |
| ·单抗亲合力的测定 | 第58页 |
| ·单抗特异性鉴定 | 第58-59页 |
| 3 结果 | 第59-61页 |
| ·抗DR5单克隆抗体的产生及亚型 | 第59页 |
| ·抗DR5单克隆抗体的亲和力测定 | 第59-60页 |
| ·单抗特异性鉴定 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-64页 |
| 结论 | 第64-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 在读期间发表的学术论文与研究成果 | 第82页 |