| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述：丝氨酸蛋白酶抑制剂 SPINK3 研究概况 | 第9-13页 |
| ·SPINK3/PSTI-I 的结构 | 第9页 |
| ·SPINK3/PSTI-I 的功能 | 第9-10页 |
| ·SPINK3/PSTI-I 与急性期反应 | 第10-11页 |
| ·本论文研究目的和意义 | 第11-13页 |
| 第二章 spink3 基因对肝癌细胞株 BEL-7402 的作用研究 | 第13-61页 |
| ·实验材料 | 第13-16页 |
| ·主要试剂与配制 | 第13-15页 |
| ·主要仪器和耗材 | 第15-16页 |
| ·菌株、质粒、细胞株 | 第16页 |
| ·实验动物 | 第16页 |
| ·实验方法 | 第16-38页 |
| ·大鼠 2/3 肝切除模型制作 | 第16页 |
| ·spink3 基因在大鼠再生肝中的实时定量 RT-PCR | 第16-17页 |
| ·spink3 基因的克隆 | 第17-22页 |
| ·spink3 表达载体的构建 | 第22-24页 |
| ·spink3 干涉载体的构建 | 第24-26页 |
| ·spink3 检验载体的构建 | 第26-28页 |
| ·最佳干涉靶序列的筛选 | 第28-29页 |
| ·稳定转染细胞株的筛选 | 第29-31页 |
| ·细胞爬片 HE 染色 | 第31页 |
| ·计数法测定细胞生长曲线 | 第31-32页 |
| ·MTT 法检测 | 第32-34页 |
| ·PCNA 的细胞免疫化学检测 | 第34-36页 |
| ·Hoechst33258 染色 | 第36-37页 |
| ·集落形成率检测 | 第37页 |
| ·统计学分析 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-55页 |
| ·Real-time PCR 检测内源性 spink3 在再生肝中的表达情况 | 第38页 |
| ·spink3 及其 siRNA 重组质粒的结构及鉴定结果 | 第38-46页 |
| ·最佳干涉载体的筛选结果 | 第46-47页 |
| ·稳定转染细胞株的鉴定结果 | 第47-48页 |
| ·spink3 及其 siRNA 对肝癌细胞株 BEL-7402 形态结构的影响 | 第48-50页 |
| ·spink3 及其 siRNA 对肝癌细胞株 BEL-7402 生长的影响 | 第50-51页 |
| ·spink3 及其 siRNA 对肝癌细胞株 BEL-7402 中 PCNA 表达的影响 | 第51页 |
| ·spink3 及其 siRNA 对肝癌细胞株 BEL-7402 凋亡的影响 | 第51-52页 |
| ·spink3 及其 siRNA 对肝癌细胞株 BEL-7402 集落形成率的影响 | 第52-53页 |
| ·spink3 及其 siRNA 对肝癌细胞株 BEL-7402 耐药性的影响 | 第53-55页 |
| ·讨论 | 第55-61页 |
| ·spink3 相关载体的构建及其最佳干涉载体的筛选 | 第55页 |
| ·稳定转染与转染效率 | 第55-56页 |
| ·spink3 及其 siRNA 对肝癌细胞株 BEL-7402 的作用 | 第56-61页 |
| 结论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 攻读硕士学位期间参加的科研项目和发表的论文 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
