| 提要 | 第1-5页 |
| 英文缩略表 | 第5-9页 |
| 第1章 前言 | 第9-32页 |
| ·布鲁氏菌病的危害及流行现状 | 第9-11页 |
| ·布鲁氏菌病原生物学特性 | 第11-12页 |
| ·布鲁氏菌病的发病机理及病理变化 | 第12-13页 |
| ·布鲁氏菌胞内生存的可能影响因素 | 第13-16页 |
| ·吞噬小体内酸化与布鲁氏菌的胞内生存 | 第14页 |
| ·血红素与布鲁氏菌的胞内生存 | 第14页 |
| ·外膜与布鲁氏菌的胞内生存 | 第14-15页 |
| ·不同血清与布鲁氏菌的胞内生存 | 第15页 |
| ·胸腺与布鲁氏菌的胞内生存 | 第15-16页 |
| ·细胞凋亡与布鲁氏菌的胞内生存 | 第16页 |
| ·布鲁氏菌的致病机制 | 第16-25页 |
| ·调控系统 | 第17-21页 |
| ·毒力因子 | 第21-25页 |
| ·功能基因组学在细菌基因功能研究中的应用 | 第25-30页 |
| ·DNA微点阵芯片技术在细菌基因转录谱中的应用 | 第25-28页 |
| ·蛋白质组学在布鲁氏菌研究中的应用 | 第28-30页 |
| ·功能基因组学的研究策略 | 第30页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第30-32页 |
| 第2章 材料与方法 | 第32-46页 |
| ·实验材料 | 第32-34页 |
| ·细胞系、菌株、质粒和培养基 | 第32页 |
| ·实验动物 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32-33页 |
| ·主要仪器 | 第33页 |
| ·引物 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-46页 |
| ·突变株16MΔvjbR的构建 | 第34-36页 |
| ·互补株16MΔvjbR-C的构建 | 第36-37页 |
| ·突变株16MΔvjbR和互补株16MΔvjbR-C的逆转录PCR验证 | 第37-38页 |
| ·突变株的毒力表型分析 | 第38-40页 |
| ·布鲁氏菌全基因组芯片的研制 | 第40-42页 |
| ·vjbR突变株和野生株转录谱比较分析 | 第42-46页 |
| 第3章 结果 | 第46-80页 |
| ·vjbR基因缺失突变株和互补株的构建与验证 | 第46-51页 |
| ·pUC19K质粒的构建及抗性替换构建突变株的原理 | 第46-47页 |
| ·pUC19K载体的构建 | 第47-48页 |
| ·突变盒载体的构建 | 第48-49页 |
| ·vjbR突变株的构建与PCR验证 | 第49-50页 |
| ·vjbR互补株的构建与PCR验证 | 第50-51页 |
| ·16MΔvjbR突变株和16MΔvjbR-C互补株的逆转录PCR验证 | 第51页 |
| ·vjbR突变株的毒力表型分析 | 第51-60页 |
| ·生长曲线 | 第51-52页 |
| ·布鲁氏菌胞内存活实验 | 第52-53页 |
| ·感染后小鼠脾脏和肝脏中布鲁氏菌CFU的变化 | 第53-55页 |
| ·感染后小鼠脾脏和肝脏的解剖学变化 | 第55-57页 |
| ·体外应激实验 | 第57-58页 |
| ·多粘菌素B敏感性实验 | 第58-59页 |
| ·脱氧胆酸钠敏感性实验 | 第59-60页 |
| ·突变株与野生株的转录谱 | 第60-63页 |
| ·全基因组芯片的研制 | 第60-61页 |
| ·基于全基因组芯片的比较转录谱方法的建立 | 第61-63页 |
| ·野生株和突变株转录谱的比较分析 | 第63-80页 |
| ·vjbR体外诱导表达条件的确定 | 第63-65页 |
| ·野生株和突变株转录谱的比较 | 第65-78页 |
| ·转录谱的逆转录PCR验证 | 第78-80页 |
| 第4章 讨论 | 第80-88页 |
| ·vjbR基因缺失突变株和vjbR互补株的构建与验证 | 第80-83页 |
| ·几种突变株构建的方法及其优缺点 | 第80-81页 |
| ·优化的电转化条件有利于高效筛选重组克隆 | 第81页 |
| ·抗性替换构建vjbR基因的缺失突变株 | 第81-82页 |
| ·染色体整合法构建vjbR互补株 | 第82页 |
| ·从转录水平验证突变株与互补株 | 第82-83页 |
| ·vjbR相关的毒力表型分析 | 第83-85页 |
| ·vjbR基因缺失影响布鲁氏菌的生长特性 | 第83页 |
| ·vjbR调控了布鲁氏菌在巨噬细胞和小鼠体内的生存能力 | 第83-84页 |
| ·vjbR调控了布鲁氏菌对各种刺激环境中的抵抗和适应 | 第84-85页 |
| ·基于DNA芯片的布鲁氏菌转录谱比较分析 | 第85-86页 |
| ·vjbR体外诱导表达条件的确定 | 第85-86页 |
| ·vjbR缺失后布鲁氏菌转录谱的变化 | 第86页 |
| ·vjbR在布鲁氏菌胞内生存中的作用机制 | 第86-88页 |
| 第5章 结论 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-98页 |
| 在读期间发表论文 | 第98-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 中文摘要 | 第101-103页 |
| Abstract | 第103-105页 |
