中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-7页 |
缩略语 | 第7-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-25页 |
·链霉菌简介 | 第10-11页 |
·抗生素生物合成的分子生物学 | 第11页 |
·聚酮合酶的分子生物学 | 第11-18页 |
·简介 | 第11-12页 |
·Ⅰ型PKS | 第12-15页 |
·红霉素生物合成基因 | 第12-14页 |
·Ⅰ型PKS基因的操作 | 第14-15页 |
·Ⅱ型PKS | 第15-18页 |
·适合构建与表达重组PKS的特殊寄主-载体系统 | 第15-16页 |
·Minimal PKS | 第16-17页 |
·Ⅱ型PKS合成聚酮体机理的研究 | 第17-18页 |
·抗生素FR-008生物合成基因簇研究概况 | 第18-19页 |
·SCP2*的分子生物学 | 第19-24页 |
·SCP2*的基本特征 | 第19-23页 |
·SCP2*衍生载体的发展 | 第23-24页 |
·SCP2*的应用 | 第24页 |
·研究目的 | 第24-25页 |
第二章 材料与方法 | 第25-40页 |
·菌株 | 第25-26页 |
·质粒 | 第26-28页 |
·培养基和化学试剂 | 第28-31页 |
·实验方法 | 第31-40页 |
第三章 抗生素FR-008生物合成基因簇pabAB上游区域的研究 | 第40-55页 |
·前言 | 第40-42页 |
·结果与分析 | 第42-53页 |
·链霉菌FR-008对某些常用抗生素天然抗性水平的检测 | 第42页 |
·载体的选择 | 第42-44页 |
·质粒pHZ2000的构建及其限制性内切酶图谱分析 | 第44页 |
·基因置换质粒pHZ2007和pHZ2008的构建 | 第44-48页 |
·基因置换菌株的获得和分子验证 | 第48-51页 |
·基因置换菌株产素的生物活性测定及其发酵产物的HPLC分析 | 第51-53页 |
·讨论 | 第53-55页 |
第四章 抗生素FR-008生物合成基因簇的截短 | 第55-71页 |
·前言 | 第55页 |
·结果与分析 | 第55-70页 |
·基因置换质粒的构建 | 第55-64页 |
·基因置换菌株的分子杂交验证 | 第64页 |
·基因置换菌株的生物学活性测定 | 第64页 |
·基因置换菌株发酵产物的HPLC分析 | 第64-70页 |
·讨论 | 第70-71页 |
第五章 SCP2*衍生载体克隆和异源表达大片段DNA的初探 | 第71-83页 |
·前言 | 第71页 |
·结果与分析 | 第71-79页 |
·载体的选择 | 第71-73页 |
·基因置换结构pHZ2029的构建 | 第73-75页 |
·基因置换菌株的获得 | 第75页 |
·基因置换菌株的验证 | 第75-79页 |
·普通琼脂糖凝胶电泳的Southern杂交 | 第75页 |
·高压脉冲电泳及其Southern杂交 | 第75-79页 |
·讨论 | 第79-83页 |
·PKS基因簇从链霉菌FR-008向变铅青链霉菌3200的接合转移 | 第79页 |
·PKS基因簇从链霉菌FR-008向天蓝色链霉菌的接合转移 | 第79-83页 |
第六章 总结与展望 | 第83-85页 |
·总结 | 第83-84页 |
·展望 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-93页 |
致谢 | 第93页 |