摘要 | 第1-15页 |
Abstract | 第15-19页 |
第一章 前言 | 第19-43页 |
1 蛋白质组分离鉴定研究的主要技术手段 | 第20-26页 |
·双向凝胶电泳 | 第20-22页 |
·液相色谱 | 第22-23页 |
·生物质谱技术 | 第23页 |
·生物信息学 | 第23-24页 |
·预分离手段 | 第24-25页 |
·其它分离分析技术 | 第25-26页 |
2 蛋白质N-末端区域的重要性 | 第26-28页 |
·蛋白质结构 | 第26页 |
·蛋白质鉴定 | 第26-27页 |
·蛋白质功能 | 第27-28页 |
·制药应用 | 第28页 |
3 蛋白质N-末端肽的研究策略 | 第28-33页 |
·非质谱技术的N端分析方法 | 第28-30页 |
·基于质谱技术的N端分析策略 | 第30-33页 |
4 本文的研究工作和意义 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-43页 |
第二章 异硫氰酸苯酯-磁性纳米材料的合成与封闭N-末端肽的分离鉴定研究.. | 第43-81页 |
1 表面键合DITC的氨基四氧化三铁磁性纳米材料的合成与表征 | 第44-51页 |
·材料与方法 | 第44-47页 |
·结果与讨论 | 第47-51页 |
2 DITC-磁性纳米材料用于分离封闭N端肽段的条件优化与性能考察 | 第51-58页 |
·材料与方法 | 第51-52页 |
·结果与讨论 | 第52-58页 |
3 DITC-磁性纳米材料在标准蛋白质混合物封闭N端肽分离鉴定中的应用.. | 第58-63页 |
·材料与方法 | 第58-59页 |
·结果与讨论 | 第59-63页 |
4 肽段N端残基的环化现象探讨 | 第63-68页 |
·材料与方法 | 第64-66页 |
·结果与讨论 | 第66-68页 |
5 DITC-磁性纳米材料用于肝癌HepG2 细胞蛋白质N端肽的分离鉴定 | 第68-75页 |
·材料与方法 | 第68-72页 |
·结果与讨论 | 第72-75页 |
6 小结 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-81页 |
第三章 酸酐同系物标记结合质谱技术用于蛋白质N-末端肽鉴定及相对定量 | 第81-100页 |
1 材料与方法 | 第82-85页 |
·化学试剂与药品 | 第82页 |
·仪器与软件 | 第82-83页 |
·技术路线 | 第83页 |
·蛋白质的酸酐同系物标记与酶切 | 第83-84页 |
·蛋白质混合物的配制与标记 | 第84页 |
·蛋白质混合物的一维凝胶电泳分离及胶上酶切 | 第84-85页 |
·质谱分析条件 | 第85页 |
2 结果与讨论 | 第85-96页 |
·酸酐同系物标记反应原理 | 第85页 |
·标记反应效率考查 | 第85-88页 |
·同系物标记与稳定同位素标记进行蛋白质相对定量的比较 | 第88-90页 |
·蛋白质混合物的SDS-PAGE分离 | 第90-91页 |
·蛋白质N-末端肽的鉴定 | 第91-94页 |
·蛋白质的相对定量 | 第94-96页 |
3 小结 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-100页 |
第四章 磺酸化修饰结合离子交换色谱和质谱方法富集鉴定大肠杆菌蛋白质的末端肽 | 第100-115页 |
1 材料和方法 | 第102-106页 |
·化学试剂和仪器 | 第102-103页 |
·大肠杆菌全蛋白质提取 | 第103-104页 |
·蛋白质的反相色谱预分离 | 第104页 |
·蛋白质的磺酸化标记和酶切 | 第104页 |
·肽段的胍基化和SPE脱盐 | 第104页 |
·离子交换色谱富集端肽 | 第104-105页 |
·LC-LTQ-FT分析条件 | 第105页 |
·数据检索 | 第105-106页 |
2 结果和讨论 | 第106-112页 |
·大肠杆菌蛋白质的提取效果 | 第106-107页 |
·蛋白质的反相色谱预分离结果 | 第107-108页 |
·端肽的强阳离子交换色谱富集结果 | 第108-109页 |
·LTQ-FT质谱分析结果 | 第109-112页 |
3 小结 | 第112页 |
参考文献 | 第112-115页 |
全文总结 | 第115-117页 |
附录:SDS-PAGE相关溶液的配制方法 | 第117-118页 |
个人简历 | 第118-119页 |
攻读学位期间发表与撰写的文章 | 第119-120页 |
致谢 | 第120页 |