水稻Xa21抗病相关蛋白质的筛选
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 1 引言 | 第8-12页 |
| ·研究意义 | 第8页 |
| ·水稻抗病基因Xa21抗病相关研究 | 第8-10页 |
| ·XA21生化特性研究 | 第8-9页 |
| ·Xa21介导的抗病途径研究 | 第9-10页 |
| ·双向电泳技术 | 第10-12页 |
| ·双向电泳技术原理 | 第10页 |
| ·双向电泳技术的特点 | 第10-11页 |
| ·双向电泳技术在植物抗病研究中的应用 | 第11-12页 |
| 2 材料与方法 | 第12-27页 |
| ·试验材料 | 第12-16页 |
| ·水稻材料 | 第12页 |
| ·质粒和菌株 | 第12页 |
| ·主要试剂和用品 | 第12页 |
| ·仪器与设备 | 第12-13页 |
| ·水稻叶片蛋白提取液配制 | 第13页 |
| ·双向电泳中溶液配制 | 第13-14页 |
| ·细菌培养基制备 | 第14-15页 |
| ·水稻白叶枯病菌Xoo培养基制备 | 第15-16页 |
| ·水稻种植 | 第16页 |
| ·操作步骤 | 第16页 |
| ·培养水稻白叶枯病菌Xoo P6小种 | 第16-17页 |
| ·操作步骤 | 第16-17页 |
| ·水稻叶片接种和接水 | 第17页 |
| ·操作步骤 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-27页 |
| ·TCA丙酮法提取水稻叶片蛋白质 | 第17-18页 |
| ·改良的Bradford法测定蛋白含量 | 第18-19页 |
| ·双向电泳分离蛋白质 | 第19-21页 |
| ·用PDquest软件分析双向电泳胶图 | 第21页 |
| ·双向电泳考染点酶解消化 | 第21页 |
| ·双向电泳差异点质谱分析 | 第21页 |
| ·寡核苷酸引物的设计合成及PCR产物扩增 | 第21-22页 |
| ·PCR产物纯化 | 第22-23页 |
| ·PCR产物和载体酶切 | 第23页 |
| ·重组载体 | 第23页 |
| ·细菌感受态制备 | 第23-24页 |
| ·热激法将重组载体转入宿主细胞 | 第24页 |
| ·提取质粒DNA并酶切鉴定 | 第24页 |
| ·测序验证目的片段 | 第24-25页 |
| ·诱导表达及SDS-PAGE检测 | 第25页 |
| ·融合蛋白大量表达纯化制备抗体 | 第25页 |
| ·水稻叶片全蛋白粗提 | 第25页 |
| ·Western检测 | 第25-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-37页 |
| ·水稻双向电泳体系的建立 | 第27页 |
| ·水稻叶片全蛋白双向电泳分离 | 第27-28页 |
| ·双向电泳图谱差异点分析 | 第28-29页 |
| ·差异蛋白点的MALDI-TOF-MS分析 | 第29-31页 |
| ·差异表达蛋白质功能分类 | 第31-32页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第32页 |
| ·重组质粒的酶切验证 | 第32-33页 |
| ·重组蛋白质的表达及纯化 | 第33-34页 |
| ·抗体制备及Western验证 | 第34页 |
| ·差异表达蛋白质验证 | 第34-37页 |
| 4 讨论 | 第37-41页 |
| ·关于水稻双向电泳技术 | 第37-39页 |
| ·差异表达蛋白质与水稻抗病基因Xa21 | 第39-41页 |
| 5 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第47-48页 |
| 作者简历 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
