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通用型禽流感病毒胶体金免疫层析诊断方法的建立

 摘要第1-11页
Abstract第11-13页
1 引言第13-26页
   ·禽流感病毒(AIV)简介第14-18页
     ·AIV 形态结构第14页
     ·AIV 生物学特性第14-15页
     ·HA、NA 和M 基因结构及其编码蛋白的功能第15-18页
   ·HPAI 的危害及公共卫生学意义第18-20页
     ·HPAI 给养禽业造成的危害第18页
     ·与人流感相关的禽流感事件第18-20页
     ·产生导致人流感大流行病毒株的可能机制第20页
   ·禽流感的诊断方法及研究进展第20-24页
     ·病原学诊断第20-21页
     ·血清学诊断第21-24页
     ·分子生物学诊断第24页
   ·本研究的目的和意义第24-26页
2 材料和方法第26-34页
   ·材料第26-28页
     ·病毒第26页
     ·单抗及羊多克隆抗体第26页
     ·实验动物第26页
     ·实验用阴阳性对照抗原第26页
     ·主要仪器设备及耗材第26-27页
     ·主要试剂和溶液第27-28页
   ·实验方法第28-34页
     ·胶体金颗粒的制备第28-29页
     ·兔抗鼠抗体的制备第29页
     ·单克隆抗体和多克隆抗体的辛酸硫酸铵法纯化及纯度测定第29-30页
     ·金标单克隆抗体的制备第30-31页
     ·胶体金免疫层析方法的建立第31-32页
     ·特异性初步试验第32页
     ·敏感性初步试验第32页
     ·重复性初步试验第32-33页
     ·待组装试剂盒中部分组成成分的保存期试验第33-34页
3 实验结果第34-46页
   ·金标抗体的制备研究结果第34-39页
     ·胶体金颗粒大小的确定第34-35页
     ·抗体的纯化后浓度确定第35-36页
     ·单克隆抗体与胶体金结合最佳PH 确定第36-37页
     ·单克隆抗体与胶体金结合最小蛋白浓度的确定第37页
     ·抗体标记过程中缓冲液的选择第37页
     ·抗体标记过程中封闭液的选择第37-38页
     ·抗体标记过程中洗涤液的选择第38页
     ·抗体保存液的选择第38页
     ·最适合反应时间的确定第38-39页
     ·金标抗体的纯化第39页
     ·金标抗体的保存第39页
   ·试纸条组成部分的确定第39-42页
     ·样品垫及其处理液的确定第39-40页
     ·结合垫及其处理液的确定第40页
     ·硝酸纤维素膜的确定第40页
     ·金标抗体、捕获抗体、对照抗体最适喷涂量的确定第40-41页
     ·对照抗体、捕获抗体固定在硝酸纤维素膜上的确定第41页
     ·硝酸纤维素膜的封闭第41-42页
   ·试纸条的组装及测试第42-46页
     ·环境湿度实验第42页
     ·试剂条组成部分干燥工艺第42页
     ·特异性初步实验结果第42-43页
     ·敏感性初步实验结果第43-44页
     ·重复性初步实验结果第44页
     ·试剂盒中部分组成成分的保存期试验第44-46页
4 讨论第46-51页
   ·胶体金层析技术在禽流感病毒诊断的可行性应用第46-47页
     ·技术基础第46页
     ·可行性第46-47页
     ·应用前景第47页
   ·影响胶体金免疫层析试纸条条件的优化第47-51页
     ·胶体金颗粒炼制条件对试纸条的影响第47-48页
     ·金标抗体标记条件对试纸条的影响第48-49页
     ·样品垫和结合垫处理条件对试纸条的影响第49页
     ·胶体金免疫层析试纸条的优化第49-50页
     ·抗原裂解液的选择第50-51页
5 结论第51-52页
致谢第52-53页
参考文献第53-59页
攻读硕士期间发表的学术论文第59页

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