| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-26页 |
| ·禽流感病毒(AIV)简介 | 第14-18页 |
| ·AIV 形态结构 | 第14页 |
| ·AIV 生物学特性 | 第14-15页 |
| ·HA、NA 和M 基因结构及其编码蛋白的功能 | 第15-18页 |
| ·HPAI 的危害及公共卫生学意义 | 第18-20页 |
| ·HPAI 给养禽业造成的危害 | 第18页 |
| ·与人流感相关的禽流感事件 | 第18-20页 |
| ·产生导致人流感大流行病毒株的可能机制 | 第20页 |
| ·禽流感的诊断方法及研究进展 | 第20-24页 |
| ·病原学诊断 | 第20-21页 |
| ·血清学诊断 | 第21-24页 |
| ·分子生物学诊断 | 第24页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第24-26页 |
| 2 材料和方法 | 第26-34页 |
| ·材料 | 第26-28页 |
| ·病毒 | 第26页 |
| ·单抗及羊多克隆抗体 | 第26页 |
| ·实验动物 | 第26页 |
| ·实验用阴阳性对照抗原 | 第26页 |
| ·主要仪器设备及耗材 | 第26-27页 |
| ·主要试剂和溶液 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-34页 |
| ·胶体金颗粒的制备 | 第28-29页 |
| ·兔抗鼠抗体的制备 | 第29页 |
| ·单克隆抗体和多克隆抗体的辛酸硫酸铵法纯化及纯度测定 | 第29-30页 |
| ·金标单克隆抗体的制备 | 第30-31页 |
| ·胶体金免疫层析方法的建立 | 第31-32页 |
| ·特异性初步试验 | 第32页 |
| ·敏感性初步试验 | 第32页 |
| ·重复性初步试验 | 第32-33页 |
| ·待组装试剂盒中部分组成成分的保存期试验 | 第33-34页 |
| 3 实验结果 | 第34-46页 |
| ·金标抗体的制备研究结果 | 第34-39页 |
| ·胶体金颗粒大小的确定 | 第34-35页 |
| ·抗体的纯化后浓度确定 | 第35-36页 |
| ·单克隆抗体与胶体金结合最佳PH 确定 | 第36-37页 |
| ·单克隆抗体与胶体金结合最小蛋白浓度的确定 | 第37页 |
| ·抗体标记过程中缓冲液的选择 | 第37页 |
| ·抗体标记过程中封闭液的选择 | 第37-38页 |
| ·抗体标记过程中洗涤液的选择 | 第38页 |
| ·抗体保存液的选择 | 第38页 |
| ·最适合反应时间的确定 | 第38-39页 |
| ·金标抗体的纯化 | 第39页 |
| ·金标抗体的保存 | 第39页 |
| ·试纸条组成部分的确定 | 第39-42页 |
| ·样品垫及其处理液的确定 | 第39-40页 |
| ·结合垫及其处理液的确定 | 第40页 |
| ·硝酸纤维素膜的确定 | 第40页 |
| ·金标抗体、捕获抗体、对照抗体最适喷涂量的确定 | 第40-41页 |
| ·对照抗体、捕获抗体固定在硝酸纤维素膜上的确定 | 第41页 |
| ·硝酸纤维素膜的封闭 | 第41-42页 |
| ·试纸条的组装及测试 | 第42-46页 |
| ·环境湿度实验 | 第42页 |
| ·试剂条组成部分干燥工艺 | 第42页 |
| ·特异性初步实验结果 | 第42-43页 |
| ·敏感性初步实验结果 | 第43-44页 |
| ·重复性初步实验结果 | 第44页 |
| ·试剂盒中部分组成成分的保存期试验 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-51页 |
| ·胶体金层析技术在禽流感病毒诊断的可行性应用 | 第46-47页 |
| ·技术基础 | 第46页 |
| ·可行性 | 第46-47页 |
| ·应用前景 | 第47页 |
| ·影响胶体金免疫层析试纸条条件的优化 | 第47-51页 |
| ·胶体金颗粒炼制条件对试纸条的影响 | 第47-48页 |
| ·金标抗体标记条件对试纸条的影响 | 第48-49页 |
| ·样品垫和结合垫处理条件对试纸条的影响 | 第49页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条的优化 | 第49-50页 |
| ·抗原裂解液的选择 | 第50-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第59页 |