| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-21页 |
| ·转录因子的研究背景 | 第10-13页 |
| ·植物转录因子的结构 | 第10-12页 |
| ·转录因子的研究进展 | 第12-13页 |
| ·锌指蛋白的研究进展 | 第13-19页 |
| ·C2H2锌指蛋白的起源 | 第13-14页 |
| ·锌指蛋白的分类及C2H2型锌指蛋白的基本结构 | 第14-15页 |
| ·锌指蛋白调控基因转录的功能 | 第15-16页 |
| ·植物C2H2型锌指蛋白 | 第16-19页 |
| ·立题目的、意义 | 第19-20页 |
| ·技术路线 | 第20-21页 |
| 第二章 锌指蛋白转录因子GMC2H2基因的克隆 | 第21-37页 |
| ·前言 | 第21页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·菌种及载体 | 第21页 |
| ·酶及化学试剂 | 第21页 |
| ·试剂盒 | 第21页 |
| ·引物 | 第21页 |
| ·测序 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·DNA和蛋白质序列分析 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-28页 |
| ·大豆基因组DNA的提取 | 第22页 |
| ·大豆总RNA的提取及纯化 | 第22-23页 |
| ·总RNA的的质量及浓度测定 | 第23-24页 |
| ·RT-PCR | 第24页 |
| ·PCR | 第24-25页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第25页 |
| ·连接反应 | 第25-26页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第26页 |
| ·重组质粒的转化 | 第26页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第26-27页 |
| ·酶切反应 | 第27页 |
| ·PCR产物及酶切产物的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第27-28页 |
| ·DNA序列测定 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-36页 |
| ·目的基因片段的获得 | 第28-30页 |
| ·目标片段的T载体重组体构建 | 第30-31页 |
| ·重组体的筛选和鉴定 | 第31-32页 |
| ·目标基因序列、结构及功能分析 | 第32-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| 第三章 GMC2H2的表达特性与GMC2H2及其突变体的体外结合特异性及转基因植物分析 | 第37-65页 |
| ·材料 | 第37-38页 |
| ·植物材料 | 第37页 |
| ·菌株及载体 | 第37页 |
| ·酶及化学试剂 | 第37-38页 |
| ·试剂盒 | 第38页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-48页 |
| ·GmC2H2基因的表达特性分析 | 第38页 |
| ·GmC2H2蛋白及其突变体的体外结合特异性分析 | 第38-44页 |
| ·转化载体的构建和转基因植物分析 | 第44-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-63页 |
| ·GmC2H2基因的表达特性分析 | 第48-49页 |
| ·GmC2H2蛋白及其突变体的体外结合特异性分析 | 第49-57页 |
| ·GmC2H2基因转基因植物分析 | 第57-63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| 第四章 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 作者简历 | 第75页 |