摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-24页 |
·柠檬枝枯病综述 | 第10-14页 |
·病原菌 | 第10页 |
·寄主范围及其分布 | 第10-11页 |
·危害及症状 | 第11页 |
·传播与流行 | 第11页 |
·致病机理研究 | 第11-12页 |
·防治方法 | 第12页 |
·检测方法 | 第12-14页 |
·柑桔脚腐病综述 | 第14-24页 |
·危害症状 | 第14页 |
·柑桔根腐病和脚腐病的区别与联系 | 第14-15页 |
·柑桔脚腐病病原菌 | 第15-16页 |
·病原菌形态特征 | 第16页 |
·病原菌的寄主范围 | 第16-17页 |
·寄生疫霉与烟草疫霉之间的关系 | 第17-18页 |
·发病规律 | 第18页 |
·防治方法 | 第18-19页 |
·柑桔脚腐病菌的检测 | 第19-24页 |
第二章 引言 | 第24-26页 |
第三章 柠檬枝枯病的PCR检测 | 第26-40页 |
·实验材料 | 第26页 |
·主要化学试剂 | 第26页 |
·常用储备液及缓冲液 | 第26-27页 |
·主要实验仪器 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-32页 |
·病原菌P.tracheiphila特异性引物的设计与筛选 | 第27-28页 |
·PCR反应体系的初步建立 | 第28页 |
·PCR反应体系的优化 | 第28页 |
·PCR反应程序的优化 | 第28-29页 |
·PCR扩增产物的检测 | 第29页 |
·PCR产物序列测定 | 第29-30页 |
·PCR检测体系的特异性测试 | 第30页 |
·PCR检测体系的灵敏度 | 第30页 |
·国外已发表的PCR检测体系扩增效果 | 第30-32页 |
·结果与分析 | 第32-40页 |
·病原菌P.tracheiphila特异性引物的设计与筛选结果 | 第32-34页 |
·PCR反应体系的初步建立 | 第34页 |
·PCR扩增产物的测序结果 | 第34-35页 |
·引物Pta-1/Pta-2的退火温度梯度实验结果 | 第35页 |
·Pta-1/Pta-2反应体系的优化 | 第35-36页 |
·引物Ptb-1/Ptb-2的退火温度梯度实验结果 | 第36-37页 |
·Touchdown PCR实验结果 | 第37页 |
·Ptb-1/Ptb-2反应体系的优化 | 第37-38页 |
·PCR检测体系的特异性测试 | 第38页 |
·Pta-1/Pta-2与国外已发表的柠檬枝枯病PCR检测体系灵敏度比较结果 | 第38-40页 |
第四章 柑桔脚腐病菌的PCR检测 | 第40-46页 |
·实验材料 | 第40页 |
·主要化学试剂 | 第40页 |
·常用储备液及缓冲液 | 第40页 |
·主要实验仪器 | 第40页 |
·实验方法 | 第40-42页 |
·胡萝卜琼脂(CA)培养基的制备 | 第40页 |
·选择性培养基的制备 | 第40页 |
·疫霉菌的分离和纯化 | 第40-41页 |
·水培法诱导产生孢子囊与游动孢子 | 第41页 |
·微量快速的总核酸提取方法 | 第41页 |
·柑桔脚腐病组织DNA的提取 | 第41页 |
·疫霉菌的PCR检测 | 第41页 |
·应用巢式PCR技术对木质化带病材料的检测 | 第41-42页 |
·结果与分析 | 第42-46页 |
·柑桔脚腐病菌的分离培养结果 | 第42页 |
·疫霉菌的PCR检测结果 | 第42-46页 |
第五章 结论与讨论 | 第46-50页 |
·结论 | 第46-47页 |
·柠檬枝枯病(Mal Secco)PCR检测技术研究结论 | 第46页 |
·柑桔脚腐病菌PCR检测技术研究结论 | 第46-47页 |
·讨论 | 第47-50页 |
·柠檬枝枯病的PCR检测体系 | 第47-48页 |
·柑桔脚腐病菌的分离培养 | 第48-49页 |
·柑桔脚腐病菌PCR检测技术的灵敏度 | 第49页 |
·寄生疫霉与烟草黑胫病菌的序列比对 | 第49页 |
·有待解决的问题和需要进一步完善的工作 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-62页 |
致谢 | 第62-64页 |
攻读硕士学位期间发表论文及参加科研项目 | 第64页 |