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柠檬枝枯病与柑桔脚腐病菌的PCR检测技术研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
第一章 文献综述第10-24页
   ·柠檬枝枯病综述第10-14页
     ·病原菌第10页
     ·寄主范围及其分布第10-11页
     ·危害及症状第11页
     ·传播与流行第11页
     ·致病机理研究第11-12页
     ·防治方法第12页
     ·检测方法第12-14页
   ·柑桔脚腐病综述第14-24页
     ·危害症状第14页
     ·柑桔根腐病和脚腐病的区别与联系第14-15页
     ·柑桔脚腐病病原菌第15-16页
     ·病原菌形态特征第16页
     ·病原菌的寄主范围第16-17页
     ·寄生疫霉与烟草疫霉之间的关系第17-18页
     ·发病规律第18页
     ·防治方法第18-19页
     ·柑桔脚腐病菌的检测第19-24页
第二章 引言第24-26页
第三章 柠檬枝枯病的PCR检测第26-40页
   ·实验材料第26页
   ·主要化学试剂第26页
   ·常用储备液及缓冲液第26-27页
   ·主要实验仪器第27页
   ·实验方法第27-32页
     ·病原菌P.tracheiphila特异性引物的设计与筛选第27-28页
     ·PCR反应体系的初步建立第28页
     ·PCR反应体系的优化第28页
     ·PCR反应程序的优化第28-29页
     ·PCR扩增产物的检测第29页
     ·PCR产物序列测定第29-30页
     ·PCR检测体系的特异性测试第30页
     ·PCR检测体系的灵敏度第30页
     ·国外已发表的PCR检测体系扩增效果第30-32页
   ·结果与分析第32-40页
     ·病原菌P.tracheiphila特异性引物的设计与筛选结果第32-34页
     ·PCR反应体系的初步建立第34页
     ·PCR扩增产物的测序结果第34-35页
     ·引物Pta-1/Pta-2的退火温度梯度实验结果第35页
     ·Pta-1/Pta-2反应体系的优化第35-36页
     ·引物Ptb-1/Ptb-2的退火温度梯度实验结果第36-37页
     ·Touchdown PCR实验结果第37页
     ·Ptb-1/Ptb-2反应体系的优化第37-38页
     ·PCR检测体系的特异性测试第38页
     ·Pta-1/Pta-2与国外已发表的柠檬枝枯病PCR检测体系灵敏度比较结果第38-40页
第四章 柑桔脚腐病菌的PCR检测第40-46页
   ·实验材料第40页
   ·主要化学试剂第40页
   ·常用储备液及缓冲液第40页
   ·主要实验仪器第40页
   ·实验方法第40-42页
     ·胡萝卜琼脂(CA)培养基的制备第40页
     ·选择性培养基的制备第40页
     ·疫霉菌的分离和纯化第40-41页
     ·水培法诱导产生孢子囊与游动孢子第41页
     ·微量快速的总核酸提取方法第41页
     ·柑桔脚腐病组织DNA的提取第41页
     ·疫霉菌的PCR检测第41页
     ·应用巢式PCR技术对木质化带病材料的检测第41-42页
   ·结果与分析第42-46页
     ·柑桔脚腐病菌的分离培养结果第42页
     ·疫霉菌的PCR检测结果第42-46页
第五章 结论与讨论第46-50页
   ·结论第46-47页
     ·柠檬枝枯病(Mal Secco)PCR检测技术研究结论第46页
     ·柑桔脚腐病菌PCR检测技术研究结论第46-47页
   ·讨论第47-50页
     ·柠檬枝枯病的PCR检测体系第47-48页
     ·柑桔脚腐病菌的分离培养第48-49页
     ·柑桔脚腐病菌PCR检测技术的灵敏度第49页
     ·寄生疫霉与烟草黑胫病菌的序列比对第49页
     ·有待解决的问题和需要进一步完善的工作第49-50页
参考文献第50-62页
致谢第62-64页
攻读硕士学位期间发表论文及参加科研项目第64页

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