| 致谢 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-32页 |
| 第一节 高等植物K~+吸收运转及调节 | 第12-26页 |
| 1 K~+转运体基因的克隆 | 第12-18页 |
| 2 钾转运蛋白的调节 | 第18-23页 |
| 3 讨论 | 第23-26页 |
| 第二节 植物对低钾环境的应答机制及信号转导 | 第26-30页 |
| 1 转运体的调节 | 第26-27页 |
| 2 通道的调节 | 第27-28页 |
| 3 低K~+反应调节信号的转导 | 第28-30页 |
| 第三节 本研究的立论依据及意义 | 第30-32页 |
| 第二章 ATCIPK23在烟草中过表达的钾效率响应研究 | 第32-74页 |
| ·引言钙信号转导与植物对钾的吸收 | 第32-36页 |
| ·试验材料与方法 | 第36-55页 |
| ·主要仪器和药品 | 第36-37页 |
| ·培养基与培养条件 | 第37-40页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第40-43页 |
| ·烟草的遗传转化 | 第43-44页 |
| ·烟草DNA的提取 | 第44-45页 |
| ·烟草总RNA的提取 | 第45-46页 |
| ·转基因烟草后代的PCR检测 | 第46-47页 |
| ·T_1代转基因烟草植株的潮霉素筛选 | 第47页 |
| ·Northern杂交 | 第47-49页 |
| ·Western Blot检测 | 第49-54页 |
| ·培养基中基础钾含量的测定 | 第54页 |
| ·植株生物量的测定 | 第54页 |
| ·植株钾含量的测定 | 第54页 |
| ·幼苗根生长量测定 | 第54-55页 |
| ·K~+吸收动力学参数测定 | 第55页 |
| ·试验结果与分析 | 第55-69页 |
| ·植物表达载体的构建与鉴定 | 第55-56页 |
| ·烟草的遗传转化及转基因阳性材料的获得 | 第56-57页 |
| ·转基因阳性材料的分子检测结果 | 第57-58页 |
| ·AtCIPK23在转基因烟草中表达的Western Blot分析 | 第58-61页 |
| ·转基因烟草耐低钾性状的表型分析 | 第61-63页 |
| ·转基因烟草与野生型主根生长量的比较 | 第63-64页 |
| ·转基因烟草及野生型生物量的比较 | 第64-66页 |
| ·转基因烟草及野生型含钾量的比较 | 第66-68页 |
| ·转基因材料与野生型K~+吸收动力学参数的比较与分析 | 第68-69页 |
| ·结论与讨论 | 第69-74页 |
| 第三章 烟草钾转运体基因NTHAK1的克隆及其表达模式的分析 | 第74-102页 |
| ·引言 | 第74-76页 |
| ·试验材料与试验方法 | 第76-84页 |
| ·试验材料与试剂 | 第76页 |
| ·常用的溶液及缓冲液 | 第76-77页 |
| ·实验方法 | 第77-78页 |
| ·目的基因的克隆 | 第78-81页 |
| ·DNA的回收纯化、克隆载体的连接与测序 | 第81-83页 |
| ·氨基酸序列的预测 | 第83-84页 |
| ·跨膜区的分析 | 第84页 |
| ·组织表达分析 | 第84页 |
| ·目的基因的低钾诱导表达 | 第84页 |
| ·结果与分析 | 第84-99页 |
| ·目的基因同源片段的克隆 | 第84-87页 |
| ·目的基因3'端的扩增(3'RACE) | 第87-90页 |
| ·目的基因5'端的扩增(5'RACE) | 第90-93页 |
| ·烟草推测钾转运体基因NtHAK1全长的获得及全序列的验证 | 第93-94页 |
| ·烟草推测钾吸收转运相关蛋白NtHAK1序列的生物信息学分析 | 第94-96页 |
| ·烟草推测钾吸收转运相关蛋白NtHAK1跨膜区的分析 | 第96-98页 |
| ·烟草推测钾吸收转运相关蛋白NtHAK1的组织表达部位分析 | 第98页 |
| ·NtHAK1对低钾诱导的响应 | 第98-99页 |
| ·结论与讨论 | 第99-102页 |
| 第四章 拟南芥主要钾吸收转运基因在烟草中的转化及ATHAK5与ATKUP1的功能初步研究 | 第102-124页 |
| ·引言 | 第102-104页 |
| ·材料与试剂 | 第104-106页 |
| ·试验材料与试剂 | 第104-105页 |
| ·常用培养基、缓冲液及试剂的配制 | 第105-106页 |
| ·试验方法 | 第106-114页 |
| ·烟草的遗传转化 | 第106-107页 |
| ·拟南芥T-DNA插入突变体的纯合鉴定 | 第107页 |
| ·植物过表达载体的构建 | 第107-112页 |
| ·拟南芥突变体及过表达材料基因表达水平的检测 | 第112-113页 |
| ·拟南芥突变体及过表达材料的表型观察 | 第113-114页 |
| ·拟南芥植株钾含量的测定 | 第114页 |
| ·结果分析 | 第114-121页 |
| ·烟草的遗传转化及转基因阳性材料的获得 | 第114-115页 |
| ·植物材料的鉴定 | 第115-117页 |
| ·拟南芥T-DNA插入突变体及过表达材料的RT-PCR分析 | 第117-119页 |
| ·拟南芥敲除突变体及过表达材料的生长分析 | 第119-120页 |
| ·拟南芥植株含钾量的分析 | 第120-121页 |
| ·结论与讨论 | 第121-124页 |
| 参考文献 | 第124-138页 |
| ABSTRACT | 第138-140页 |
| 作者简历 | 第140页 |
