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致倦库蚊三种解毒酶基因的表达及组织定位研究

中文摘要第1-14页
ABSTRACT第14-17页
第一章 综述第17-27页
 1 蚊虫生活史与其传播的疾病第17页
 2 蚊虫的防治及其抗药性第17-18页
   ·蚊虫的防治第17-18页
   ·蚊虫的抗药性第18页
 3 CCE、GST和P450三大解毒酶家族特点及其抗性机制研究第18-23页
   ·酯酶家族分类第19页
   ·酯酶解毒机理第19-20页
   ·酯酶抗性机制第20-21页
   ·谷胱甘肽-S-转移酶的分类第21页
   ·谷胱甘肽-S-转移酶的解毒机理第21页
   ·谷胱甘肽-S-转移酶的抗性机制第21-22页
   ·P450基因家族分类、解毒机理与抗性机制第22-23页
 4 原位杂交技术原理及其应用第23-25页
 5 新一代测序技术:数字基因表达谱的原理与应用第25-26页
 6 本文研究目的及意义第26-27页
第二章 致倦库蚊解毒酶系家族基因的系统分类第27-45页
 1 实验材料第27页
 2 实验方法第27-28页
   ·CCE、GST和P450序列下载第27-28页
   ·致倦库蚊CCE、P450和GST三大家族数字基因表达谱分析第28页
 3 实验结果第28-43页
   ·致倦库蚊解毒酶基因序列下载第28页
   ·致倦库蚊羧酸酯酶基因家族第28-33页
   ·致倦库蚊P450基因家族第33-39页
   ·致倦库蚊谷胱甘肽-S-转移酶家族第39-41页
   ·CCE、GST和P450三大解毒酶基因家族表达谱第41-43页
 4 讨论第43-45页
第三章 致倦库蚊数字基因表达谱分析第45-55页
 1 实验材料第45页
 2 实验方法第45-47页
   ·不同龄期致倦库蚊的收集第45页
   ·RNA的提取、cDNA合成和tag制备第45-46页
   ·SOLEXA/Illumina系统测序第46页
   ·测序结果分析第46-47页
     ·测序质量评估与测序饱和度分析第46页
     ·去除杂质序列产生clean tag及其拷贝数分布统计第46页
     ·标签与参考基因标签数据库比对分析与基因表达注释第46页
     ·差异表达基因筛选第46-47页
     ·差异表达基因聚类分析、GO和pathway分析第47页
     ·新转录本检测第47页
     ·反义链转录分析第47页
 3 实验结果第47-53页
   ·致倦库蚊不同发育阶段样品测序结果第47-48页
   ·测序质量与测序饱和度分析第48-50页
   ·表达标签在基因上的分布位置第50页
   ·差异表达基因识别与发育阶段特异表达基因识别第50页
   ·差异表达基因GO与pathway分析第50-52页
   ·阶段特异表达基因GO与pathway分析第52页
   ·sense-antisense调控与新转录本的发现第52-53页
 4 讨论第53-55页
第四章 致倦库蚊羧酸酯酶基因在蚊虫体内的组织表达第55-67页
 1 实验材料第55-57页
   ·实验主要仪器第55页
   ·实验试剂及主要试剂配制方法第55-57页
   ·实验蚊虫第57页
 2 实验方法第57-62页
   ·蚊虫总RNA提取(Trizol法)第57页
   ·总RNA反转录合成cDNA第一链第57-58页
   ·羧酸酯酶基因探针模板合成第58-59页
   ·RNA探针合成第59-60页
   ·蚊虫的固定与包埋第60-61页
   ·石蜡切片制作第61页
   ·原位杂交实验第61-62页
 3 实验结果第62-63页
   ·原位杂交基因的选择第62页
   ·原位杂交条件与结果第62-63页
 4 分析与讨论第63-67页
第五章 致倦库蚊主要组织结构的石蜡切片观察第67-75页
 1 材料与方法第67-68页
   ·实验材料第67页
   ·蚊虫的解剖第67页
   ·蚊虫连续石蜡切片的制备及染色第67-68页
     ·主要试剂及仪器第67-68页
     ·蚊虫的固定第68页
     ·包埋第68页
     ·脱水、透明和浸蜡第68页
     ·切片第68页
     ·HE染色第68页
 2 结果第68-72页
   ·消化排泄系统第70-71页
   ·生殖系统第71页
   ·神经系统与感觉器官第71页
   ·背支囊与腹支囊第71页
   ·脂肪体第71-72页
 3 讨论第72-75页
参考文献第75-85页
攻读学位期间取得的研究成果第85-86页
致谢第86-87页
个人简况及联系方式第87-89页

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