Ri质粒介导fps基因转化烟草的研究
| 摘要 | 第1-8页 |
| 1.文献综述 | 第8-16页 |
| 2.引言 | 第16-17页 |
| 3.材料与方法 | 第17-27页 |
| ·材料 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-27页 |
| ·无菌苗的培养 | 第17页 |
| ·发状根的诱导与培养 | 第17-20页 |
| ·质粒DNA的提取与纯化 | 第17-18页 |
| ·pBinARfps质粒对Ar1334的转化 | 第18-19页 |
| ·发状根的诱导 | 第19-20页 |
| ·烟草发状根的分子鉴定 | 第20-25页 |
| ·发根基因组DNA提取与纯化(CTAB) | 第20-21页 |
| ·ro1C基因PCR检测 | 第21页 |
| ·fps基因PCR检测 | 第21页 |
| ·fps基因的PCR-Southern检测 | 第21-23页 |
| ·发根基因组RNA的提取与纯化 | 第23-24页 |
| ·fps基因Northern-blot检测 | 第24-25页 |
| ·转基因发状根生长特性研究 | 第25-26页 |
| ·发根固体培养 | 第25页 |
| ·发根液体培养 | 第25页 |
| ·转基因发状根生长动态测定 | 第25页 |
| ·发根大规模培养特性研究 | 第25-26页 |
| ·发根株系浸提液的抗性研究 | 第26-27页 |
| ·粗毒素的制备及其对发状根的诱导 | 第26页 |
| ·发根浸提液对赤星病病菌的抗性研究 | 第26-27页 |
| ·发根浸提液对黑胫病病菌的抗性研究 | 第27页 |
| 4.结果与分析 | 第27-36页 |
| ·发状根的诱导及筛选 | 第27-30页 |
| ·pBinARfps质粒转化Ar1334 | 第27-28页 |
| ·发状根的诱导及植株再生 | 第28页 |
| ·发根转化频率的影响因子 | 第28-30页 |
| ·烟草叶片生理期对转化率的影响 | 第28-29页 |
| ·菌液浓度对转化率的影响 | 第29页 |
| ·叶片在菌液中浸泡时间对转化率的影响 | 第29-30页 |
| ·发状根分子检测 | 第30-31页 |
| ·ro1C基因PCR检测 | 第30页 |
| ·fps基因PCR检测 | 第30-31页 |
| ·fps基因PCR-Southern检测 | 第31页 |
| ·fps基因Northern-blot检测 | 第31页 |
| ·转基因发状根生长特性研究 | 第31-33页 |
| ·发状根的固体培养 | 第31-32页 |
| ·不同发状根株系生长特性研究 | 第32-33页 |
| ·发状根大规模培养 | 第33页 |
| ·发状根浸提液的抗性研究 | 第33-36页 |
| ·发状根浸提液对赤星病病菌的抗性研究 | 第33-34页 |
| ·发根株系3浸提液对黑胫病病菌的抗性研究 | 第34-36页 |
| 5.结论与讨论 | 第36-38页 |
| ·讨论 | 第36-38页 |
| ·转fps基因发状根的获得 | 第36-37页 |
| ·转基因发状根生长特性及离体培养 | 第37页 |
| ·fps转基因发状根浸提液的抗性研究 | 第37-38页 |
| ·结论 | 第38页 |
| 6.存在问题和需要进一步开展的工作 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-46页 |
| Abstract | 第46-47页 |
