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口蹄疫病毒RT-PCR与抗体ELISA检测方法的建立及初步应用

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 前言第11-23页
   ·病毒的生物学特性第11-14页
     ·形态特征第11页
     ·病毒基因组结构及功能第11-13页
     ·口蹄疫病毒的抗原位点第13-14页
   ·口蹄疫在亚洲及国内的流行情况第14-15页
   ·免疫机制第15页
   ·口蹄疫病毒检测方法研究进展第15-20页
     ·病毒分离第16页
     ·血清学检测技术第16-18页
     ·分子生物学检测技术第18-20页
   ·利用非结构蛋白鉴别自然感染动物和注射疫苗动物的研究第20-22页
   ·研究的目的和意义第22-23页
2 材料与方法第23-35页
   ·实验材料第23-25页
     ·病毒与细胞第23页
     ·载体和质粒第23页
     ·生物学试剂第23页
     ·主要仪器第23-24页
     ·参考序列及其扩增引物第24-25页
   ·实验方法第25-35页
     ·RT-PCR检测口蹄疫病毒方法的建立第25-26页
     ·FMDV结构蛋白VP2和非结构蛋白3ABC的表达第26-32页
     ·VP2抗体和3ABC抗体间接ELISA检测方法的建立第32-35页
3 结果与分析第35-52页
   ·FMDV RT-PCR检测方法的建立第35-39页
     ·检测引物PCR扩增结果第35页
     ·检测引物的敏感性试验第35-36页
     ·检测引物的特异性试验第36-37页
     ·RT-PCR检测方法在临床中应用第37-39页
   ·FMDV结构蛋白VP2抗体间接ELISA检测方法的建立第39-46页
     ·VP2基因的扩增及序列测定第39-40页
     ·VP2基因在杆状病毒表达系统中的表达第40-42页
     ·VP2基因在原核表达系统中的表达第42-44页
     ·VP2抗体间接ELISA检测方法的建立第44-46页
   ·非结构蛋白3ABC抗体间接ELISA检测方法的建立第46-52页
     ·3ABC基因克隆扩增及序列测定第46-47页
     ·原核表达载体pGEX-3ABC构建第47页
     ·非结构蛋白3ABC在大肠杆菌中诱导表达第47-48页
     ·目的蛋白的纯化及Western blotting检测第48页
     ·非结构蛋白3ABC抗体间接ELISA检测方法的建立第48-52页
4 讨论第52-55页
   ·RT-PCR检测FMDV及分型方法的研究第52页
     ·特异性检测引物的设计第52页
     ·在临床中初步应用第52页
   ·蛋白VP2和3ABC的表达及纯化第52-53页
   ·应用3ABC蛋白鉴别自然感染和疫苗免疫动物第53-54页
   ·VP2蛋白抗体间接ELISA检测方法的研究第54-55页
5 结论第55-56页
致谢第56-57页
参考文献第57-64页
附录第64-68页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第68页

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