中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
1 前言 | 第11-23页 |
·病毒的生物学特性 | 第11-14页 |
·形态特征 | 第11页 |
·病毒基因组结构及功能 | 第11-13页 |
·口蹄疫病毒的抗原位点 | 第13-14页 |
·口蹄疫在亚洲及国内的流行情况 | 第14-15页 |
·免疫机制 | 第15页 |
·口蹄疫病毒检测方法研究进展 | 第15-20页 |
·病毒分离 | 第16页 |
·血清学检测技术 | 第16-18页 |
·分子生物学检测技术 | 第18-20页 |
·利用非结构蛋白鉴别自然感染动物和注射疫苗动物的研究 | 第20-22页 |
·研究的目的和意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-35页 |
·实验材料 | 第23-25页 |
·病毒与细胞 | 第23页 |
·载体和质粒 | 第23页 |
·生物学试剂 | 第23页 |
·主要仪器 | 第23-24页 |
·参考序列及其扩增引物 | 第24-25页 |
·实验方法 | 第25-35页 |
·RT-PCR检测口蹄疫病毒方法的建立 | 第25-26页 |
·FMDV结构蛋白VP2和非结构蛋白3ABC的表达 | 第26-32页 |
·VP2抗体和3ABC抗体间接ELISA检测方法的建立 | 第32-35页 |
3 结果与分析 | 第35-52页 |
·FMDV RT-PCR检测方法的建立 | 第35-39页 |
·检测引物PCR扩增结果 | 第35页 |
·检测引物的敏感性试验 | 第35-36页 |
·检测引物的特异性试验 | 第36-37页 |
·RT-PCR检测方法在临床中应用 | 第37-39页 |
·FMDV结构蛋白VP2抗体间接ELISA检测方法的建立 | 第39-46页 |
·VP2基因的扩增及序列测定 | 第39-40页 |
·VP2基因在杆状病毒表达系统中的表达 | 第40-42页 |
·VP2基因在原核表达系统中的表达 | 第42-44页 |
·VP2抗体间接ELISA检测方法的建立 | 第44-46页 |
·非结构蛋白3ABC抗体间接ELISA检测方法的建立 | 第46-52页 |
·3ABC基因克隆扩增及序列测定 | 第46-47页 |
·原核表达载体pGEX-3ABC构建 | 第47页 |
·非结构蛋白3ABC在大肠杆菌中诱导表达 | 第47-48页 |
·目的蛋白的纯化及Western blotting检测 | 第48页 |
·非结构蛋白3ABC抗体间接ELISA检测方法的建立 | 第48-52页 |
4 讨论 | 第52-55页 |
·RT-PCR检测FMDV及分型方法的研究 | 第52页 |
·特异性检测引物的设计 | 第52页 |
·在临床中初步应用 | 第52页 |
·蛋白VP2和3ABC的表达及纯化 | 第52-53页 |
·应用3ABC蛋白鉴别自然感染和疫苗免疫动物 | 第53-54页 |
·VP2蛋白抗体间接ELISA检测方法的研究 | 第54-55页 |
5 结论 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-64页 |
附录 | 第64-68页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第68页 |