| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-26页 |
| ·大豆根腐病 | 第12-14页 |
| ·大豆根腐病的分布与危害 | 第12页 |
| ·大豆根腐病的症状 | 第12-13页 |
| ·大豆根腐病的病原 | 第13页 |
| ·大豆根腐病的防治 | 第13-14页 |
| ·植物-病原菌相互作用的研究 | 第14-17页 |
| ·防卫反应基因 | 第14页 |
| ·病原菌致病相关基因 | 第14-15页 |
| ·植物－病原物相互作用关系 | 第15-17页 |
| ·大豆与病原物尖孢镰刀菌的互作机理 | 第17页 |
| ·差异表达基因的分离方法 | 第17-21页 |
| ·mRNA 差异显示技术 | 第18页 |
| ·抑制消减杂交 | 第18-19页 |
| ·cDNA 代表性差异分析 | 第19页 |
| ·基因表达系列分析法 | 第19-20页 |
| ·RC4D | 第20页 |
| ·cDNA 微列阵 | 第20-21页 |
| ·cDNA－AFLP 技术及其应用 | 第21-24页 |
| ·cDNA－AFLP 基本原理 | 第21页 |
| ·cDNA－AFLP 技术特点 | 第21-22页 |
| ·cDNA－AFLP 技术的应用 | 第22-24页 |
| ·研究目的、意义与内容 | 第24-26页 |
| ·研究目的与意义 | 第24-25页 |
| ·研究内容 | 第25页 |
| ·技术路线 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-42页 |
| ·仪器设备和试剂 | 第26-29页 |
| ·仪器设备 | 第26-27页 |
| ·培养基及试剂 | 第27-29页 |
| ·试验材料 | 第29-30页 |
| ·大豆栽培 | 第29-30页 |
| ·致病性尖孢镰刀菌的培养 | 第30页 |
| ·大豆植株与致病性尖孢镰刀菌互作 | 第30页 |
| ·大豆根总RNA 提取 | 第30-31页 |
| ·器皿准备 | 第30页 |
| ·RNA 提取方法 | 第30页 |
| ·大豆根总RNA 定量 | 第30-31页 |
| ·mRNA 的提取 | 第31-32页 |
| ·器皿准备 | 第31页 |
| ·mRNA 提取方法 | 第31-32页 |
| ·cDNA-AFLP 分析 | 第32-37页 |
| ·cDNA 合成 | 第32页 |
| ·接头和引物的合成 | 第32-34页 |
| ·cDNA 酶切 | 第34页 |
| ·接头准备 | 第34-35页 |
| ·接头的连接 | 第35页 |
| ·cDNA 酶切片段的预扩增 | 第35-36页 |
| ·预扩增产物定量 | 第36页 |
| ·预扩产物的选择性扩增 | 第36-37页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第37-38页 |
| ·电泳 | 第37页 |
| ·银染 | 第37-38页 |
| ·AFLP 多态性片段的回收、纯化、测序 | 第38-39页 |
| ·差异片段的回收 | 第38页 |
| ·重新扩增差异片段 | 第38页 |
| ·差异片段纯化 | 第38-39页 |
| ·差异片段克隆 | 第39-42页 |
| ·回收片段与pGM-T 克隆载体连接 | 第39-40页 |
| ·大肠杆菌JM109 感受态细胞的制备 | 第40页 |
| ·连接产物转化JM109 感受态细胞 | 第40页 |
| ·质粒的提取(碱裂解法) | 第40-41页 |
| ·质粒酶切和电泳验证 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-55页 |
| ·大豆根总RNA 提取 | 第42-43页 |
| ·双链cDNA 的合成 | 第43页 |
| ·cDNA 酶切片段的预扩增 | 第43-44页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第44-47页 |
| ·回收片段的重新扩增 | 第47-48页 |
| ·差异片段的序列测定 | 第48-51页 |
| ·序列同源性比较分析 | 第51-53页 |
| ·差异片段的克隆 | 第53-55页 |
| 4 讨论 | 第55-59页 |
| ·cDNA-AFLP 分析大豆-尖孢镰刀菌亲和性互作体系的基因表达变化 | 第55页 |
| ·分离差异片段代表的生物学意义 | 第55-56页 |
| ·cDNA-AFLP 技术 | 第56-59页 |
| ·cDNA-AFLP 技术的优点 | 第56-57页 |
| ·银染与放射性标记比较 | 第57页 |
| ·cDNA-AFLP 试验体系中应注意的问题 | 第57-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 致 谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 附 录 | 第68-69页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第69页 |