| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-31页 |
| 1.文献综述 | 第12-30页 |
| ·植物在非生物逆境胁迫下的细胞信号传导 | 第12-15页 |
| ·植物在非生物逆境胁迫下的细胞信号传导的一般途径 | 第12-14页 |
| ·植物非生物逆境胁迫下信号传递的网络系统 | 第14-15页 |
| ·植物非生物逆境胁迫下的基因应答 | 第15-17页 |
| ·旱、盐、低温胁迫下水稻的生理变化 | 第17-19页 |
| ·蛋白酶抑制子与植物抗逆 | 第19-20页 |
| ·脱水素与植物抗逆 | 第20-21页 |
| ·逆境胁迫诱导型启动子 | 第21-22页 |
| ·启动子基本组成 | 第21页 |
| ·启动子分类及特点 | 第21页 |
| ·启动子逆境相关的顺式作用元件 | 第21-22页 |
| ·植物基因功能研究的主要方法 | 第22-28页 |
| ·超量表达(Over-expression) | 第23-24页 |
| ·RNA干扰(RNAi) | 第24-25页 |
| ·插入突变 | 第25页 |
| ·基因的定点诱变(site-directed mutagenesis,SDM) | 第25-26页 |
| ·微阵列(microarray) | 第26-27页 |
| ·酵母双杂交技术(Yeast two-hybrid system) | 第27-28页 |
| ·根癌农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第28-30页 |
| ·根癌农杆菌的特性 | 第28-29页 |
| ·根癌农杆菌介导转化法 | 第29页 |
| ·水稻中常用的选择标记基因 | 第29-30页 |
| 2.研究的目的和意义 | 第30-31页 |
| 材料和方法 | 第31-40页 |
| 1.实验材料 | 第31-34页 |
| ·实验所用菌株和遗传转化受体材料 | 第31页 |
| ·实验所用载体 | 第31-32页 |
| ·常用试剂及仪器 | 第32-34页 |
| 2.实验方法 | 第34-40页 |
| ·候选基因的选择及验证 | 第35页 |
| ·分离候选基因OCPI1的启动子 | 第35-36页 |
| ·载体构建和遗传转化 | 第36-37页 |
| ·候选基因的表达分析(Northern及RT-PCR) | 第37页 |
| ·转基因植株的超量表达检测及拷贝数检测 | 第37-38页 |
| ·转基因植株抗旱、抗盐性鉴定 | 第38-39页 |
| ·抗旱大棚下干旱胁迫实验 | 第38页 |
| ·OsDhnI的培养基抗盐实验 | 第38页 |
| ·OCPI1的培养基抗盐实验 | 第38-39页 |
| ·OCPI1基因相关分析 | 第39-40页 |
| ·GUS组织化学分析 | 第39页 |
| ·GUS活性测定 | 第39页 |
| ·酶活测定 | 第39-40页 |
| 结果与分析 | 第40-60页 |
| 1.候选基因载体构建结果 | 第40-41页 |
| 2.候选基因的表达分析 | 第41-43页 |
| ·OCPI1、OsCK1及OsDhnI的逆境诱导表达 | 第41-42页 |
| ·OsCK1和OsCBL1组织特异性表达 | 第42-43页 |
| 3.转基因植株表达量与拷贝数检测 | 第43-46页 |
| ·转基因植株阳性检测 | 第43页 |
| ·超量表达检测 | 第43-44页 |
| ·抑制表达检测 | 第44-45页 |
| ·拷贝数检测 | 第45-46页 |
| 4.干旱诱导基因OCPI1相关分析 | 第46-56页 |
| ·OCPI1基因功能鉴定 | 第46-52页 |
| ·OCPI1序列分析 | 第46-48页 |
| ·OCPI1转基因家系孕穗期抗旱性鉴定 | 第48-49页 |
| ·OCPI1转基因植株耐盐性鉴定 | 第49-51页 |
| ·酶活性鉴定 | 第51-52页 |
| ·OCPI1启动子分析 | 第52-56页 |
| ·启动子序列元件分析 | 第52-54页 |
| ·组织GUS染色 | 第54页 |
| ·启动子干旱诱导GUS活性 | 第54-56页 |
| 5.其它候选基因的鉴定 | 第56-60页 |
| ·OsDhnI转基因植株抗逆鉴定 | 第56-58页 |
| ·田间干旱鉴定 | 第56-57页 |
| ·OsDhnI基因培养基抗盐发芽实验 | 第57-58页 |
| ·OsCK1的定点诱变 | 第58-60页 |
| 讨论 | 第60-65页 |
| 1.OCPI1基因功能的探讨 | 第60-61页 |
| 2.有关抗逆基因遗传转化和抗逆性鉴定方法的一些思考 | 第61-63页 |
| ·农杆菌介导法转化水稻的注意问题 | 第61页 |
| ·转基因植株的阳性检测 | 第61-62页 |
| ·作物抗旱性鉴定的复杂性 | 第62页 |
| ·培养基抗盐实验 | 第62-63页 |
| ·用于GUS活性及酶活分析的蛋白质浓度测定 | 第63页 |
| 3.实验展望 | 第63-65页 |
| ·OCPI1启动子的利用前景 | 第63-64页 |
| ·后续工作的开展 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-74页 |
| 附录A | 第74-88页 |
| 附录B | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
