蛋白质酪氨酸磷酸酶1B抑制剂的筛选
| 第一章 引言 | 第1-14页 |
| 一、蛋白酪氨酸磷酸化概述 | 第7-9页 |
| 1、酪氨酸磷酸化的意义 | 第7页 |
| 2、蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP) | 第7-9页 |
| ·PTP 的发现 | 第7-8页 |
| ·PTP 作为治疗靶点的前景 | 第8-9页 |
| 二、hPTP1B 的研究现状 | 第9-11页 |
| 1、hPTP1B 基因及其表达产物简介 | 第9页 |
| 2、PTP1B 与 II 型糖尿病 | 第9-11页 |
| 三、酶反应动力学原理 | 第11-13页 |
| 1、Km 及测定方法 | 第11页 |
| 2、IC_(50) 及测定方法 | 第11页 |
| 3、抑制类型及Ki 的测定方法 | 第11-13页 |
| 四、本论文实验方案 | 第13-14页 |
| 第二章 PTP1B 催化结构域的分离纯化及表征 | 第14-23页 |
| 一、实验材料 | 第14-15页 |
| 1、试剂 | 第14页 |
| 2、缓冲液 | 第14页 |
| 3、仪器 | 第14-15页 |
| 4、培养基 | 第15页 |
| 二、实验方法 | 第15-17页 |
| 1、菌体培养 | 第15页 |
| 2、目的蛋白的提取 | 第15页 |
| 3、阴离子交换柱层析 | 第15页 |
| 4、凝胶层析 | 第15页 |
| 5、蛋白浓度测定 | 第15-16页 |
| 6、酶活力分析 | 第16页 |
| 7、纯度鉴定 | 第16页 |
| 8、酶促反应动力学分析 | 第16-17页 |
| 三、结果与讨论 | 第17-22页 |
| 1、离子交换柱层析结果 | 第17-18页 |
| 2、凝胶层析结果 | 第18-19页 |
| 3、各步骤提纯结果 | 第19页 |
| 4、SDS-PAGE 鉴定纯度 | 第19-20页 |
| 5、酶促反应动力学分析 | 第20-22页 |
| 四、小结 | 第22-23页 |
| 第三章 ΔPTP1B 非肽类抑制剂的考察 | 第23-29页 |
| 一、实验材料 | 第23页 |
| 1、试剂 | 第23页 |
| 2、仪器 | 第23页 |
| 3、培养基和细胞系 | 第23页 |
| 二、实验方法 | 第23-24页 |
| 1. IC_(50) 的测定 | 第23-24页 |
| 2、抑制类型及Ki 的测定 | 第24页 |
| 3、细胞内PTP1B 的抑制效果 | 第24页 |
| 三、结果与讨论 | 第24-28页 |
| 1. IC_(50) 的测定结果 | 第24-25页 |
| 2、抑制剂抑制类型及Ki 的测定结果 | 第25-27页 |
| 3、细胞内PTP1B 的抑制结果 | 第27-28页 |
| 四、小结 | 第28-29页 |
| 结论 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-33页 |
| 中文摘要 | 第33-35页 |
| Abstract | 第35-37页 |
| 致谢 | 第37页 |
