| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-15页 |
| 缩略词 | 第15-17页 |
| 引言 | 第17-19页 |
| 上篇 文献综述 | 第19-52页 |
| 第一章 植物抗病分子机制研究进展 | 第19-30页 |
| 1 植物诱导抗病性的遗传基础和分子机制 | 第19-20页 |
| 2 植物诱导抗病中的多种防卫反应 | 第20-22页 |
| ·产生活性氧(ROS) | 第20-21页 |
| ·植物抗病相关蛋白的产生 | 第21页 |
| ·植保素的产生 | 第21页 |
| ·细胞壁物质的沉积与氧化交联 | 第21-22页 |
| ·过敏反应 | 第22页 |
| 3 诱导植物抗病反应的激发子 | 第22-23页 |
| ·生物激发子 | 第22-23页 |
| ·非生物激发子 | 第23页 |
| 4 植物诱导防卫反应中的信号转导 | 第23-29页 |
| ·水杨酸依赖途径 | 第24-25页 |
| ·茉莉酸(JA)乙烯(ET)途径 | 第25页 |
| ·两种信号传导途径诱发的抗性强弱的平衡和调节 | 第25-26页 |
| ·参与植物诱导防卫反应的其他信号分子及其作用 | 第26-29页 |
| ·一氧化氮 | 第26-27页 |
| ·Ca~(2+) | 第27页 |
| ·β-氨基丁酸(BABA) | 第27-28页 |
| ·寡糖 | 第28-29页 |
| 5 结束语 | 第29-30页 |
| 第二章 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白研究进展 | 第30-45页 |
| 1 PGIP的生化性质 | 第30-31页 |
| 2 PGIP的生物学功能 | 第31-32页 |
| 3 PGIP含量分布的差异与植物抗性强弱的关系 | 第32-34页 |
| 4 植物PGIP基因及其表达特性 | 第34页 |
| 5 NCBI数据库中收录的PGIP现况分析 | 第34-44页 |
| ·NCBI核酸数据库中收录的PGIP现况分析 | 第34-40页 |
| ·NCBI蛋白数据库中收录的PGIP现况分析 | 第40-44页 |
| 6 PGIP在基因工程中的应用 | 第44页 |
| 7 展望 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 下篇 研究论文 | 第52-104页 |
| 第一章 梅和中国李PGIP基因的克隆及序列分析 | 第52-68页 |
| 1 材料与方法 | 第53-57页 |
| ·植物材料 | 第53页 |
| ·试剂 | 第53页 |
| ·方法 | 第53-57页 |
| ·模板DNA的制备 | 第53-54页 |
| ·DNA的定性与定量检测 | 第54页 |
| ·PCR引物的设计 | 第54页 |
| ·PGIP基因的扩增 | 第54页 |
| ·PGIP基因PCR产物的回收、纯化、连接、转化与测序 | 第54-56页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第55页 |
| ·感受态大肠杆菌DH5α的制备 | 第55页 |
| ·PGIP基因回收纯化PCR产物的连接 | 第55-56页 |
| ·连接产物的转化及重组质粒的抗生素、α互补筛选 | 第56页 |
| ·PGIP基因的测序 | 第56页 |
| ·测序结果的生物信息学分析 | 第56-57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-66页 |
| ·PGIP基因的克隆与测序 | 第57-59页 |
| ·PGIP基因的序列分析 | 第59-63页 |
| ·PGIP基因及其编码蛋白的结构分析 | 第59-61页 |
| ·PGIP基因序列聚类分析 | 第61-63页 |
| ·梅、李PGIP基因序列比较 | 第63-65页 |
| ·梅、李PGIP基因的登录 | 第65-66页 |
| 3 讨论 | 第66-68页 |
| 第二章 梅、中国李PGIP基因上游启动子的克隆及调控元件分析 | 第68-82页 |
| 1 材料与方法 | 第68-73页 |
| ·植物材料 | 第68页 |
| ·试剂 | 第68-69页 |
| ·寡聚核苷酸序列 | 第69页 |
| ·PGIP基因上游调控区染色体步行的接头序列 | 第69页 |
| ·接头引物 | 第69页 |
| ·PGIP基因特异性引物 | 第69页 |
| ·方法 | 第69-73页 |
| ·梅、李基因组总DNA的提取 | 第69页 |
| ·启动子的克隆 | 第69-73页 |
| ·PCR产物的克隆及测序 | 第73页 |
| 2 结果与分析 | 第73-80页 |
| ·连接介导的启动子PCR扩增 | 第73-75页 |
| ·PGIP基因启动子PCR扩增产物的克隆与测序 | 第75-77页 |
| ·启动子BLAST分析 | 第77-78页 |
| ·启动子调控元件分析 | 第78-79页 |
| ·PGIP基因启动子的登录 | 第79-80页 |
| 3 讨论 | 第80-82页 |
| 第三章 农杆菌介导梅PGIP基因转化烟草的研究 | 第82-100页 |
| 1 材料与方法 | 第82-93页 |
| ·实验材料 | 第82-83页 |
| ·植物材料和试剂 | 第83页 |
| ·菌种和质粒 | 第83页 |
| ·烟草组织培养培养基 | 第83页 |
| ·实验方法 | 第83-93页 |
| ·PGIP基因的PCR扩增 | 第83页 |
| ·含有PGIP目的基因的植物双元表达载体的构建 | 第83-85页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第84页 |
| ·P-Super1300+和PGIP基因的双酶切 | 第84页 |
| ·P-Super1300+和PGIP基因双酶切产物的回收和纯化 | 第84页 |
| ·上述双酶切回收产物的连接 | 第84页 |
| ·对连接产物中的目的基因进行测序 | 第84-85页 |
| ·构建好的植物双元表达载体转化感受态根癌农杆菌LBA4404 | 第85-86页 |
| ·感受态农杆菌LBA4404的制备 | 第85页 |
| ·细菌中质粒DNA的制备(采用碱裂解小量制备法) | 第85-86页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404的转化及保存 | 第86页 |
| ·烟草叶盘法遗传转化 | 第86-87页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第87-93页 |
| ·烟草基因组DNA的制备 | 第87页 |
| ·烟草植株总RNA的制各 | 第87-88页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第88页 |
| ·转基因植株的Southern-blot分析 | 第88-91页 |
| ·Southern杂交药品的制备 | 第88页 |
| ·探针制备 | 第88页 |
| ·探针的标记 | 第88-89页 |
| ·基因组DNA的酶切及电泳 | 第89页 |
| ·转膜 | 第89-90页 |
| ·预杂交及杂交 | 第90-91页 |
| ·预杂交及杂交温度 | 第90页 |
| ·预杂交及杂交程序 | 第90-91页 |
| ·洗膜 | 第91页 |
| ·免疫鉴定 | 第91页 |
| ·转基因植株的RT-PCR检测 | 第91-93页 |
| ·反转录反应 | 第91-92页 |
| ·PCR反应 | 第92页 |
| ·RT-PCR产物的回收、克隆、PCR检测与测序 | 第92-93页 |
| 2 结果与分析 | 第93-99页 |
| ·PGIP基因的PCR扩增 | 第93页 |
| ·含有PGIP目的基因的植物双元表达载体的构建 | 第93-95页 |
| ·烟草叶盘法遗传转化 | 第95页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第95-99页 |
| ·转基因烟草植株基因组DNA的质量检测 | 第95-96页 |
| ·转基因烟草PCR鉴定 | 第96-97页 |
| ·转基因烟草Southern杂交检测 | 第97页 |
| ·转基因烟草植株总RNA的提取与检测 | 第97-98页 |
| ·转基因烟草植株RT-PCR检测 | 第98页 |
| ·转基因烟草植株RT-PCR产物的测序 | 第98-99页 |
| 3 讨论 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-104页 |
| 全文结论 | 第104-105页 |
| 创新点 | 第105-106页 |
| 附录目录 | 第106-107页 |
| 附录1 | 第107-110页 |
| 附录2 | 第110-111页 |
| 附录3 | 第111-116页 |
| 附录4 | 第116-121页 |
| 附图1 | 第121-122页 |
| 博士期间发表论文 | 第122-123页 |
| 致谢 | 第123页 |
