中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
第一章 前言 | 第11-31页 |
·蛋白质折叠的研究 | 第12页 |
·蛋白质折叠的机制 | 第12-15页 |
·热力学与动力学控制学说 | 第12-13页 |
·多维能量景观学说 | 第13-14页 |
·蛋白质折叠机制假说 | 第14-15页 |
·蛋白质多肤链的折叠模型 | 第15-17页 |
·蛋白质的变性 | 第17-18页 |
·蛋白质复性 | 第18页 |
·蛋白质的复性技术 | 第18-25页 |
·稀释复性 | 第18页 |
·辅助因子和添加复性技术 | 第18-20页 |
·反向微团中的蛋白再折叠 | 第20页 |
·双水相复性法 | 第20-21页 |
·三相法 | 第21页 |
·二硫键的正确对接 | 第21-22页 |
·色谱法复性 | 第22-25页 |
·凝胶排阻色谱(SEC) | 第23页 |
·疏水色谱(HIC) | 第23-24页 |
·离子交换色谱(IEC) | 第24页 |
·亲和色谱(AFC) | 第24-25页 |
·复性过程的监测方法 | 第25-26页 |
·本研究的内容、目的与意义 | 第26-28页 |
参考文献 | 第28-31页 |
第二章 荧光检测法对牛血清白蛋白变性复性过程研究 | 第31-47页 |
·理论基础 | 第31-36页 |
·蛋白质的内源荧光 | 第31-32页 |
·荧光分析法 | 第32-34页 |
·相图法(Phrase Diagrams) | 第34-36页 |
·实验部分 | 第36-38页 |
·仪器 | 第36页 |
·试剂与材料 | 第36页 |
·实验方法 | 第36-38页 |
·非还原变性和还原变性牛血清白蛋白的制备 | 第36页 |
·牛血清白蛋白的荧光发射图谱 | 第36-37页 |
·脲和盐酸胍诱导细胞色素C去折叠的荧光相图 | 第37页 |
·脲和盐酸胍诱导牛血清白蛋白去折叠的荧光相图 | 第37页 |
·脲和盐酸胍变性牛血清白蛋白复性过程的荧光相图 | 第37-38页 |
·实验结果 | 第38-42页 |
·脲诱导牛血清白蛋白去折叠的过程的荧光发射图谱 | 第38页 |
·盐酸胍诱导牛血清白蛋白去折叠的过程的荧光发射图谱 | 第38-39页 |
·脲和盐酸胍诱导细胞色素C去折叠的荧光相图 | 第39页 |
·无还原剂存在时脲诱导牛血清白蛋白去折叠的荧光相图 | 第39-40页 |
·有还原剂存在时脲诱导牛血清白蛋白去折叠的荧光相图 | 第40页 |
·无还原剂存在时盐酸胍诱导牛血清白蛋白去折叠的荧光相图 | 第40页 |
·有还原剂存在时盐酸胍诱导牛血清白蛋白去折叠的荧光相图 | 第40-41页 |
·脲非还原变性牛血清白蛋白复性过程的荧光相图 | 第41页 |
·脲还原变性牛血清白蛋白复性过程的荧光相图 | 第41页 |
·盐酸胍非还原变性牛血清白蛋白复性过程的荧光相图 | 第41页 |
·盐酸胍还原变性牛血清白蛋白复性过程的荧光相图 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-46页 |
·脲诱导牛血清白蛋白去折叠过程 | 第42-43页 |
·盐酸胍诱导牛血清白蛋白去折叠过程 | 第43-44页 |
·牛血清白蛋白去折叠过程 | 第44页 |
·牛血清白蛋白的变性与复性过程 | 第44-45页 |
·还原剂对蛋白质变性和复性过程的影响 | 第45页 |
·脲和盐酸胍的变性机制 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-47页 |
第三章 疏水色谱法折叠变性牛血清白蛋白研究 | 第47-55页 |
·理论基础 | 第47-50页 |
·蛋白分子中的疏水作用力 | 第47-48页 |
·疏水色谱的折叠机理 | 第48-50页 |
·实验部分 | 第50-51页 |
·仪器 | 第50页 |
·试剂与材料 | 第50页 |
·实验方法 | 第50-51页 |
·天然、非还原变性与还原脲变性牛血清白蛋白的制备 | 第50页 |
·蛋白含量的测定-Bradford法 | 第50-51页 |
·用疏水色谱复性非还原变性牛血清白蛋白 | 第51页 |
·用疏水色谱复性还原变性牛血清白蛋白 | 第51页 |
·结果与讨论 | 第51-54页 |
·疏水色谱复性非还原变性牛血清白蛋白 | 第51-52页 |
·疏水色谱复性还原变性牛血清白蛋白 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-55页 |
第四章 体积排阻色谱法研究变性牛血清白蛋白复性过程中聚集体的形成 | 第55-66页 |
·基本原理 | 第56-57页 |
·凝胶过滤复性的原理 | 第56-57页 |
·十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第57页 |
·实验部分 | 第57-59页 |
·仪器 | 第57-58页 |
·试剂与材料 | 第58页 |
·实验方法 | 第58-59页 |
·天然、非还原变性与还原脲变性牛血清白蛋白的制备 | 第58页 |
·用排阻色谱复性非还原变性牛血清白蛋白 | 第58页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第58-59页 |
·结果与讨论 | 第59-65页 |
·排阻色谱复性非还原变性牛血清白蛋白 | 第59-60页 |
·体积排阻色谱复性还原变性牛血清白蛋白 | 第60-61页 |
·非还原脲变性牛血清白蛋白稀释复性液的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第61-62页 |
·还原脲变性牛血清白蛋白稀释复性液的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第62-65页 |
参考文献 | 第65-66页 |
第五章 研究总结与展望 | 第66-68页 |
·牛血清白蛋白的变性过程 | 第66-67页 |
·变性牛血清白蛋白的复性过程 | 第67页 |
·展望 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |