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蚕豆保卫细胞质膜钙通透性通道渗透调节机制研究及拟南芥TPC1基因的克隆与鉴定

中文摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
英文缩写表第11-12页
第一部分 文献综述第12-26页
 一 气孔运动及其调控第12-17页
  1 气孔运动:气孔的开放与关闭第13-14页
  2 气孔运动调控机理第14-17页
   ·质子泵对气孔运动的调控第14页
   ·K~+通道对气孔运动的调控第14-15页
   ·微丝骨架对气孔运动的调控第15页
   ·渗透势对气孔运动的调控第15-17页
 二 植物细胞的钙及钙通道第17-22页
  1 植物细胞离子通道概述第17-18页
  2 植物细胞的钙及钙信号第18-19页
  3 植物细胞钙通道研究进展第19-22页
 三 拟南芥离子通道的研究背景第22-25页
 四 本论文工作拟解决的科学问题及意义第25-26页
第二部分 论文研究工作第26-101页
 第一章 蚕豆保卫细胞质膜钙通透性通道的渗透调控机制第26-44页
  1 引言第26-27页
  2 材料及方法第27-29页
   ·材料培养第27页
   ·蚕豆保卫细胞原生质体的制备第27页
   ·膜片钳实验第27-28页
   ·保卫细胞胞质Ca~(2+)的测定第28-29页
   ·实验中的化学试剂第29页
  3 实验结果与分析第29-42页
   ·渗透势对蚕豆保卫细胞质膜钙通透性通道调控的全细胞记录、鉴定与分析第29-30页
   ·微丝骨架参与了渗透势对蚕豆保卫细胞质膜钙通透性通道调控过程第30-32页
   ·蚕豆保卫细胞质膜存在有张力激活型钙通透性通道第32-33页
   ·蚕豆保卫细胞质膜张力激活型钙通透性通道同样具有电压依赖性第33-34页
   ·蚕豆保卫细胞质膜张力激活型钙通透性通道电流对胞外Ba~(2+)的浓度依赖性第34-35页
   ·实验中的张力激活型通道对Ca~(2+)的通透性第35-37页
   ·利用钙通道抑制剂对蚕豆保卫细胞质膜张力激活型钙通透性通道的鉴定第37页
   ·微丝骨架调节剂对蚕豆保卫细胞质膜张力激活型钙通透性通道活性的调控第37-39页
   ·张力激活型钙通透性通道参与了渗透调控过程第39-40页
   ·渗透势及微丝骨架调节剂对蚕豆保卫细胞胞内自由钙浓度的调控第40-42页
  4 讨论与小结第42-44页
 第二章 微丝骨架参与蚕豆保卫细胞质膜电压依赖型钙通透性通道调控的实验证据第44-54页
  1 引言第44页
  2 材料及方法第44-45页
  3 实验结果与分析第45-52页
   ·全细胞水平微丝骨架参与调控电压依赖型钙通透性通道的实验证据第45-47页
   ·单通道水平对蚕豆保卫细胞质膜电压依赖型钙通透性通道的记录第47页
   ·蚕豆保卫细胞质膜电压依赖型钙通透性通道电流对胞外Ba~(2+)的浓度依赖性第47-48页
   ·蚕豆保卫细胞质膜电压依赖型通道对Ca~(2+)同样具有通透性第48页
   ·利用通道抑制剂Gd~(3+)对单通道水平电压依赖型钙通透性通道电流的鉴定第48-50页
   ·微丝骨架调节剂对蚕豆保卫细胞质膜电压依赖型钙通透性通道的调控第50-52页
  4 讨论与小结第52-54页
 第三章 蚕豆保卫细胞质膜电压依赖型钙通透性通道对K~+的通透性第54-63页
  1 引言第54页
  2 材料与方法第54-55页
  3 结果及分析第55-61页
   ·蚕豆保卫细胞质膜存在有电压依赖型钙通透性通道第55-56页
   ·利用钙通道抑制剂Gd~(3+)对通道进行的鉴定第56-57页
   ·该类通道电流对胞外Ca~(2+)浓度的依赖性第57-58页
   ·胞内K~+是影响通道逆转电位偏离理论平衡电位的原因第58-59页
   ·蚕豆保卫细胞质膜上存在有高电导的双通透性通道第59-61页
  4 小结和讨论第61-63页
 第四章 拟南芥TPC1基因的克隆及初步功能鉴定第63-83页
  1 引言第63页
  2 研究背景第63-65页
   ·环核苷酸门控类通道家族研究进展第63-64页
   ·谷氨酸受体类通道家族研究进展第64-65页
   ·拟南芥TPC1基因的研究进展第65页
  3 材料与方法第65-73页
   ·实验材料第65-66页
   ·培养基的配制第66页
   ·材料培养第66页
   ·常用溶液及缓冲剂的配制第66-67页
   ·实验中常用实验流程第67-72页
   ·实验药品第72-73页
  4 结果与分析第73-81页
   ·拟南芥TPC1基因的克隆第73-74页
   ·穿梭载体pYES2-AtTPC1的构建及对酵母细胞的转化第74-75页
   ·酵母的性状检测及AtTPC1对CCH1功能互补检验第75-77页
   ·AtTPC1在拟南芥植株中的组织表达定位及亚细胞定位第77-80页
   ·拟南芥TPC1基因相关突变体的获取第80-81页
   ·拟南芥TPC1基因在植株内生理功能的寻找第81页
  5 讨论与小结第81-83页
 第五章 爪蟾卵母细胞异源表达植物离子通道继以电压钳鉴定系统的建立第83-90页
  1 引言第83-84页
  2 材料与方法第84-89页
   ·目的基因cRNA的获取第84-85页
   ·爪蟾卵母细胞的获取第85-87页
   ·爪蟾卵细胞显微注射cRNA第87页
   ·爪蟾卵母细胞电压钳记录第87-89页
  3 实验结果及分析第89-90页
 第六章 CDPK参与拟南芥花粉及花粉管内向钾电流调控的实验证据第90-101页
  1 引言第90-92页
   ·花粉及花粉管中的Ca~(2+)及钙通道第90-91页
   ·花粉及花粉管中的K~+及钾通道第91页
   ·花粉及花粉管中的CDPK及作用第91-92页
  2 材料与方法第92-93页
   ·材料培养第92页
   ·花粉体外萌发第92页
   ·花粉及花粉管原生质体的制备第92-93页
   ·膜片钳实验第93页
  3 实验结果与分析第93-99页
   ·拟南芥花粉及花粉管原生质体内向K~+电流的测定和分析第93-94页
   ·拟南芥幼嫩、成熟花粉及花粉管全细胞内向钾通道电流差异第94-95页
   ·幼嫩、成熟花粉和花粉管原生质体内向钾电流对[Ca~(2+)]_(cyt)浓度变化反应的差异第95-97页
   ·某些CDPK参与了[Ca~(2+)]_(cyt)对花粉管内向钾通道调控的实验证据第97-99页
  4 小结与讨论第99-101页
结论及展望第101-102页
参考文献第102-115页
致谢第115页

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