摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
1 文献综述 | 第10-26页 |
·植物转录因子研究现状 | 第10-17页 |
·植物转录因子的定义 | 第10页 |
·植物转录因子的分类 | 第10-12页 |
·转录因子的结构与功能 | 第12-16页 |
·转录因子的活性 | 第16-17页 |
·AP2/EREBP类转录因了的研究进展 | 第17-26页 |
·AP2/EREBP类转录因子的起源与进化 | 第18-19页 |
·AP2/EREBP类转录因子的DNA结合区 | 第19-21页 |
·AP2/EREBP类转录因子的分类 | 第21-22页 |
·AP2/EREBP类转录因子与目标DNA的结合 | 第22-23页 |
·与植物发育有关的AP2/EREBP类转录因子 | 第23-25页 |
·与植物胁迫应答有关的AP2/EREBP类转录因子 | 第25-26页 |
2 立题依据 | 第26页 |
3 材料与方法 | 第26-35页 |
·材料玉米自交系A318中AP2类转录因子的克隆 | 第26-31页 |
·植物材料的获得 | 第26页 |
·分子生物学试剂 | 第26页 |
·实验仪器 | 第26页 |
·引物设计 | 第26-27页 |
·实验方法 | 第27-31页 |
·AP2类转录因子的生物信息学分析 | 第31页 |
·原核表达载体的构建 | 第31-34页 |
·ORF扩增引物设计 | 第31-32页 |
·载体的制备 | 第32-33页 |
·目的插入片段的制备 | 第33页 |
·连接及转化 | 第33页 |
·阳性克隆的鉴定 | 第33-34页 |
·AP2基因实时荧光定量PCR检测 | 第34-35页 |
·供试材料 | 第34页 |
·仪器和试剂 | 第34页 |
·荧光定量PCR引物设计 | 第34页 |
·试验方法 | 第34-35页 |
4 结果与分析 | 第35-57页 |
·电子克隆方法克隆玉米AP2基因 | 第35-36页 |
·RT-PCR验证克隆试验 | 第36页 |
·自交系A318胚RNA的提取 | 第36页 |
·克隆片段的序列分析 | 第36-48页 |
·目的片段克隆 | 第36-37页 |
·测序结果的分析 | 第37-40页 |
·与相关转录因子的核苷酸和氨基酸序列比较 | 第40-41页 |
·BT039300.1转录因子的功能域和二级结构预测 | 第41-43页 |
·BT039300.1转录因子推导的氨基酸序列的疏水性/亲水性分析 | 第43-44页 |
·BT039300.1跨膜结构预测 | 第44页 |
·BT039300.1转录因子的卷曲螺旋和核定位信号预测分析 | 第44-45页 |
·BT039300.1与AP2/EREBP类转录因子的进化树构建 | 第45-46页 |
·BT039300.1编码的氨基酸的理化性质分析 | 第46-47页 |
·BT039300.1转录因子的三级结构预测与分析 | 第47-48页 |
·原核表达载体的构建 | 第48-49页 |
·实时荧光定量PCR检测BT039300.1基因表达 | 第49-57页 |
·RNA纯度和完整性分析 | 第49-51页 |
·BT039300.1和GAPDH基因标准曲线的绘制 | 第51-52页 |
·检测BT039300.1和GAPDH基因表达的准确性 | 第52-53页 |
·cDNA模板梯度稀释扩增曲线 | 第53-54页 |
·BT039300.1基因扩增的溶解曲线分析 | 第54页 |
·BT039300.1基因表达的重复性检测 | 第54-56页 |
·不同组织 BT039300.1基因的表达情况 | 第56-57页 |
5 小结与讨论 | 第57-62页 |
·电子克隆 | 第57页 |
·玉米材料的获得 | 第57-58页 |
·RNA的提取 | 第58页 |
·BT039300.1基因的结构与功能预测 | 第58-59页 |
·荧光定量PCR的选择使用 | 第59-60页 |
·pET32a表达载体的选择与BT039300.1蛋白的展望 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-67页 |
致谢 | 第67页 |