中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-11页 |
1 绪论 | 第11-14页 |
·问题的提出和研究意义 | 第11-13页 |
·本文研究的目的和研究内容 | 第13-14页 |
2 成骨细胞的体外培养和鉴定 | 第14-20页 |
·前言 | 第14页 |
·成骨细胞的培养 | 第14-16页 |
·实验试剂 | 第14页 |
·实验器材、设备 | 第14-15页 |
·细胞培养过程 | 第15-16页 |
·成骨细胞的形态学观察结果 | 第16页 |
·原代培养的显微镜观察结果 | 第16页 |
·传代培养的显微镜观察结果 | 第16页 |
·成骨细胞的鉴定 | 第16-18页 |
·Von Kossa 法染色鉴定 | 第16页 |
·实验试剂 | 第16页 |
·实验方法 | 第16-17页 |
·鉴定结果 | 第17-18页 |
·讨论 | 第18-19页 |
·本章小节 | 第19-20页 |
3 拉伸应变加载装置的结构及原理 | 第20-26页 |
·前言 | 第20页 |
·周期性基底膜拉伸应变装置 | 第20-22页 |
·实验材料和设备 | 第20页 |
·周期性基底膜拉伸应变装置的结构和工作原理 | 第20-22页 |
·周期性基底膜拉伸应变装置标定和校正 | 第22页 |
·静态基底膜拉伸应变装置 | 第22-23页 |
·实验材料和设备 | 第22页 |
·静态基底膜拉伸应变装置的结构和工作原理 | 第22-23页 |
·讨论 | 第23-25页 |
·本章小结 | 第25-26页 |
4 拉伸刺激对成骨细胞增殖的影响 | 第26-33页 |
·前言 | 第26页 |
·材料与方法 | 第26-27页 |
·实验方案 | 第26-27页 |
·成骨细胞受载前后的形态学观察 | 第27页 |
·细胞周期的测定 | 第27页 |
·数据分析 | 第27页 |
·实验结果 | 第27-31页 |
·成骨细胞受载前后的形态学观察结果 | 第27-28页 |
·同一应变水平不同机械拉伸方式对成骨细胞增殖的影响 | 第28-31页 |
·讨论 | 第31-32页 |
·本章小结 | 第32-33页 |
5 机械拉伸对成骨细胞分化和矿化过程的影响 | 第33-42页 |
·前言 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-35页 |
·实验方案 | 第33页 |
·碱性磷酸酶活性的测定 | 第33-34页 |
·胞外无机钙质分泌的测定 | 第34页 |
·数据分析 | 第34-35页 |
·实验结果 | 第35-38页 |
·同一应变水平静态拉伸与周期性拉伸对成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响 | 第35-37页 |
·不同的应变水平和加载时间对成骨细胞无机钙质分泌的影响 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-40页 |
·本章小结 | 第40-42页 |
6 机械拉伸对成骨细胞 IGF-1、MGF mRNA 的影响 | 第42-61页 |
·前言 | 第42页 |
·材料 | 第42-44页 |
·细胞及菌株 | 第42页 |
·生化试剂 | 第42-43页 |
·主要设备和器材 | 第43页 |
·溶液的配制 | 第43-44页 |
·方法 | 第44-50页 |
·材料的获取 | 第44页 |
·总RNA 提取 | 第44-45页 |
·引物的设计与合成 | 第45-46页 |
·反转录合成单链cDNA | 第46页 |
·PCR 条件的优化 | 第46-47页 |
·PCR 扩增 | 第47页 |
·PCR 产物的回收和纯化 | 第47页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第47-48页 |
·靶DNA 片段与载体的体外连接 | 第48页 |
·连接产物的转化 | 第48-49页 |
·菌体PCR | 第49页 |
·酶切鉴定 | 第49-50页 |
·序列分析 | 第50页 |
·数据处理 | 第50页 |
·结果与分析 | 第50-61页 |
·细胞总RNA 的提取 | 第50页 |
·PCR 扩增结果 | 第50-51页 |
·PCR 条件的优化 | 第51-52页 |
·阳性克隆的鉴定 | 第52页 |
·测序结果及序列分析 | 第52-55页 |
·周期性拉伸和静态拉伸对IGF-1、MGF mRNA 的影响 | 第55-56页 |
·不同加载时间周期性拉伸和静态拉伸对IGF-1 mRNA 的影响 | 第56-57页 |
·不同加载时间周期性拉伸和静态拉伸对MGF mRNA 的影响 | 第57-58页 |
·讨论 | 第58-61页 |
7 结论与展望 | 第61-62页 |
·主要结论 | 第61页 |
·后期研究工作的展望 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
附录:作者在硕士学位期间发表的论文目录及测序结果 | 第69-74页 |
独创性声明 | 第74页 |
学位论文版权使用授权书 | 第74页 |