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机械拉伸对大鼠成骨细胞生理活性及IGF-1、力生长因子表达的影响

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-11页
1 绪论第11-14页
   ·问题的提出和研究意义第11-13页
   ·本文研究的目的和研究内容第13-14页
2 成骨细胞的体外培养和鉴定第14-20页
   ·前言第14页
   ·成骨细胞的培养第14-16页
     ·实验试剂第14页
     ·实验器材、设备第14-15页
     ·细胞培养过程第15-16页
   ·成骨细胞的形态学观察结果第16页
     ·原代培养的显微镜观察结果第16页
     ·传代培养的显微镜观察结果第16页
   ·成骨细胞的鉴定第16-18页
     ·Von Kossa 法染色鉴定第16页
     ·实验试剂第16页
     ·实验方法第16-17页
     ·鉴定结果第17-18页
   ·讨论第18-19页
   ·本章小节第19-20页
3 拉伸应变加载装置的结构及原理第20-26页
   ·前言第20页
   ·周期性基底膜拉伸应变装置第20-22页
     ·实验材料和设备第20页
     ·周期性基底膜拉伸应变装置的结构和工作原理第20-22页
     ·周期性基底膜拉伸应变装置标定和校正第22页
   ·静态基底膜拉伸应变装置第22-23页
     ·实验材料和设备第22页
     ·静态基底膜拉伸应变装置的结构和工作原理第22-23页
   ·讨论第23-25页
   ·本章小结第25-26页
4 拉伸刺激对成骨细胞增殖的影响第26-33页
   ·前言第26页
   ·材料与方法第26-27页
     ·实验方案第26-27页
     ·成骨细胞受载前后的形态学观察第27页
     ·细胞周期的测定第27页
     ·数据分析第27页
   ·实验结果第27-31页
     ·成骨细胞受载前后的形态学观察结果第27-28页
     ·同一应变水平不同机械拉伸方式对成骨细胞增殖的影响第28-31页
   ·讨论第31-32页
   ·本章小结第32-33页
5 机械拉伸对成骨细胞分化和矿化过程的影响第33-42页
   ·前言第33页
   ·实验方法第33-35页
     ·实验方案第33页
     ·碱性磷酸酶活性的测定第33-34页
     ·胞外无机钙质分泌的测定第34页
     ·数据分析第34-35页
   ·实验结果第35-38页
     ·同一应变水平静态拉伸与周期性拉伸对成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响第35-37页
     ·不同的应变水平和加载时间对成骨细胞无机钙质分泌的影响第37-38页
   ·讨论第38-40页
   ·本章小结第40-42页
6 机械拉伸对成骨细胞 IGF-1、MGF mRNA 的影响第42-61页
   ·前言第42页
   ·材料第42-44页
     ·细胞及菌株第42页
     ·生化试剂第42-43页
     ·主要设备和器材第43页
     ·溶液的配制第43-44页
   ·方法第44-50页
     ·材料的获取第44页
     ·总RNA 提取第44-45页
     ·引物的设计与合成第45-46页
     ·反转录合成单链cDNA第46页
     ·PCR 条件的优化第46-47页
     ·PCR 扩增第47页
     ·PCR 产物的回收和纯化第47页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化第47-48页
     ·靶DNA 片段与载体的体外连接第48页
     ·连接产物的转化第48-49页
     ·菌体PCR第49页
     ·酶切鉴定第49-50页
     ·序列分析第50页
     ·数据处理第50页
   ·结果与分析第50-61页
     ·细胞总RNA 的提取第50页
     ·PCR 扩增结果第50-51页
     ·PCR 条件的优化第51-52页
     ·阳性克隆的鉴定第52页
     ·测序结果及序列分析第52-55页
     ·周期性拉伸和静态拉伸对IGF-1、MGF mRNA 的影响第55-56页
     ·不同加载时间周期性拉伸和静态拉伸对IGF-1 mRNA 的影响第56-57页
     ·不同加载时间周期性拉伸和静态拉伸对MGF mRNA 的影响第57-58页
   ·讨论第58-61页
7 结论与展望第61-62页
   ·主要结论第61页
   ·后期研究工作的展望第61-62页
致谢第62-63页
参考文献第63-69页
附录:作者在硕士学位期间发表的论文目录及测序结果第69-74页
独创性声明第74页
学位论文版权使用授权书第74页

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