| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-13页 |
| 第一章 麻疹病毒的分子生物学 | 第13-29页 |
| 1．1 麻疹病毒的结构和组成 | 第13-20页 |
| 1．1．1 麻疹病毒的病毒粒子和基因组结构 | 第14-15页 |
| 1．1．2 麻疹病毒基因组编码蛋白的功能 | 第15-20页 |
| 1．2 麻疹病毒的感染与复制 | 第20-23页 |
| 1．2．1 吸附和穿入 | 第20页 |
| 1．2．2 转录与翻译 | 第20-22页 |
| 1．2．3 RNA的复制 | 第22-23页 |
| 1．2．4 病毒粒子的装配和释放 | 第23页 |
| 1．3 麻疹病毒的培养和纯化 | 第23-27页 |
| 1．3．1 麻疹病毒的体外培养 | 第24-25页 |
| 1．3．2 细胞致病变效应 | 第25页 |
| 1．3．3 动物模型 | 第25-27页 |
| 1．4 麻疹病毒的免疫病理 | 第27-28页 |
| 1．5 麻疹工程病毒在基因治疗方面的应用 | 第28-29页 |
| 第二章 病毒的细胞受体 | 第29-43页 |
| 2．1 病毒受体的本质和特性 | 第29-30页 |
| 2．2 病毒受体的一般研究方法 | 第30-31页 |
| 2．3 病毒受体的鉴别 | 第31-33页 |
| 2．3．1 筛选易感细胞的cDNA文库鉴别受体蛋白 | 第31-32页 |
| 2．3．2 细胞膜上与病毒结合的蛋白的分析法 | 第32页 |
| 2．3．3 用特异性的单克隆抗体筛选受体 | 第32页 |
| 2．3．4 抗独特型抗体可模拟病毒结合从而识别病毒受体 | 第32-33页 |
| 2．3．5 根据既有知识的积累推测受体并经实验验证 | 第33页 |
| 2．4 麻疹病毒受体研究 | 第33-40页 |
| 2．4．1 CD46作为MV的细胞受体 | 第33-37页 |
| 2．4．1．1 CD46分子的结构与功能 | 第34-36页 |
| 2．4．1．2 CD46与MV的相互作用 | 第36-37页 |
| 2．4．2 SLAM作为MV的第二受体 | 第37-40页 |
| 2．4．2．1 SLAM受体功能的发现与鉴定 | 第37-38页 |
| 2．4．2．2 SLAM的结构 | 第38-39页 |
| 2．4．2．3 SLAM与MV感染的病理作用 | 第39-40页 |
| 2．5 本实验的研究背景及本文的研究目的 | 第40-43页 |
| 2．5．1 麻疹病毒第二受体Bip／mSLAM的发现及鉴定 | 第40页 |
| 2．5．2 Bip／mSLAM与麻疹病毒H蛋白的相互作用及其作用位点研究 | 第40-41页 |
| 2．5．3 麻疹病毒感染对受体CD46的调控影响研究 | 第41-42页 |
| 2．5．4 本论文的研究目的 | 第42-43页 |
| 第三章 分子生物学实验技术 | 第43-60页 |
| 3．1 质粒DNA的制备和纯化 | 第43-45页 |
| 3．1．1 质粒DNA的小量制备 | 第43页 |
| 3．1．2 质粒DNA的大量制备 | 第43-44页 |
| 3．1．3 Bacmid DNA(＞100kb)的提取与制备 | 第44-45页 |
| 3．2 限制性酶消化 | 第45页 |
| 3．3 DNA片段回收 | 第45-47页 |
| 3．3．1 低熔点琼脂糖凝胶法 | 第45-46页 |
| 3．3．2 玻璃奶(Glass—milk)法 | 第46-47页 |
| 3．4 DNA片段和载体的连接 | 第47页 |
| 3．5 感受态细胞的制备 | 第47-48页 |
| 3．5．1 冷氯化钙法制备新鲜感受态细胞 | 第47-48页 |
| 3．5．2 电转化感受态细胞的制备 | 第48页 |
| 3．6 质粒DNA的转化 | 第48-49页 |
| 3．6．1 常规转化法 | 第48页 |
| 3．6．2 质粒的快速转化法 | 第48-49页 |
| 3．6．3 质粒的电转化法 | 第49页 |
| 3．7 菌种的保存 | 第49页 |
| 3．8 菌落PCR | 第49-50页 |
| 3．9 PCR定点诱变 | 第50页 |
| 3．10 细胞培养基的配制 | 第50-51页 |
| 3．11 细胞传代培养 | 第51页 |
| 3．12 细胞的冻存与复苏 | 第51-52页 |
| 3．13 细胞转染 | 第52-54页 |
| 3．13．1 脂质体转染 | 第52-53页 |
| 3．13．2 电转染法 | 第53-54页 |
| 3．14 流式细胞术分析 | 第54页 |
| 3．15 用原核表达系统表达蛋白 | 第54-55页 |
| 3．16 Ni~(++)亲和层析法纯化蛋白质 | 第55-56页 |
| 3．17 抗体的制备 | 第56页 |
| 3．18 GST树脂pull-down分析 | 第56-58页 |
| 3．19 免疫共沉淀 | 第58-59页 |
| 3．20 Western blot | 第59-60页 |
| 第四章 麻疹病毒包膜糖蛋白与其受体相互作用 | 第60-78页 |
| 4．1 引言 | 第60-62页 |
| 4．2 材料与方法 | 第62-64页 |
| 4．2．1 细菌、细胞、基因及抗体 | 第62页 |
| 4．2．2 重组质粒的构建 | 第62-63页 |
| 4．2．3 SLAM△779—848蛋白的原核表 | 第63页 |
| 4．2．4 质粒转染和pull—down试验 | 第63页 |
| 4．2．5 免疫共沉淀和Westen—blot | 第63页 |
| 4．2．6 免疫荧光检测和细胞融合试验 | 第63-64页 |
| 4．2．7 co—capping试验和激光共聚焦 | 第64页 |
| 4．3 研究结果 | 第64-74页 |
| 4．3．1 重组质粒的鉴定 | 第64-67页 |
| 4．3．2 SLAM△779—848蛋白的原核表达及纯化 | 第67-68页 |
| 4．3．3 麻疹病毒H和F蛋白在体内的相互作用 | 第68-69页 |
| 4．3．4 麻疹病毒F、tF蛋白和细胞受体SLAM的相互作用 | 第69-70页 |
| 4．3．5 麻疹病毒H，F蛋白与细胞受体SLAM三者的体外相互作用 | 第70-71页 |
| 4．3．6 F，H和SLAM三种蛋白共同促进了细胞的融合 | 第71-73页 |
| 4．3．7 麻疹病毒H，F蛋白与细胞受体SLAM的共帽子现象(co-capping) | 第73-74页 |
| 4．4 讨论 | 第74-78页 |
| 第五章 麻疹病毒H蛋白与受体SLAM相互作用功能位点的鉴定 | 第78-92页 |
| 5．1 引言 | 第78-80页 |
| 5．2 材料与方法 | 第80-83页 |
| 5．2．1 细胞、质粒、试剂 | 第80页 |
| 5．2．2 流式细胞术分析 | 第80-81页 |
| 5．2．3 细胞融合试验 | 第81页 |
| 5．2．4 可溶性H蛋白的制备纯化 | 第81-82页 |
| 5．2．5 噬菌体文库筛选 | 第82-83页 |
| 5．2．6 ELISA | 第83页 |
| 5．3 研究结果 | 第83-90页 |
| 5．3．1 MV H蛋420-438位氨基酸特点分析 | 第83-84页 |
| 5．3．2 H蛋白及其突变体对B95-8细胞表面SLAM分子表达的影响 | 第84-86页 |
| 5．3．3 H蛋白及其突变体对B95-8细胞SLAM依赖性融合的影响 | 第86-87页 |
| 5．3．4 可溶性H蛋白的制备 | 第87-89页 |
| 5．3．5 与可溶性H蛋白结合的短肽及其序列 | 第89页 |
| 5．3．6 MV细胞受体SLAM蛋56-70位氨基酸特点分析 | 第89-90页 |
| 5．4 讨论 | 第90-92页 |
| 创新点 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-102页 |
| 硕士期间所发表和待发表论文 | 第102-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
