| 前言 | 第1-24页 |
| 1 转录激活因子AP-2基因家族 | 第9-17页 |
| 2 神经胶质瘤扩增序列41(GAS41)的简介 | 第17-24页 |
| 第一部分 材料与方法 | 第24-43页 |
| 1 材料 | 第24-28页 |
| 2 实验方法 | 第28-43页 |
| ·表达载体的构建 | 第28-33页 |
| ·融合蛋白质的表达和抗体的制备 | 第33-37页 |
| ·细胞培养 | 第37-38页 |
| ·AP-2β与GAS41之间的相互作用分析 | 第38-40页 |
| ·GAS41与AP-2β相互作用后对AP-2β的转录活性的影响 | 第40-41页 |
| ·GAS41与AP-2β相互作用后对AP-2β的DNA结合活性的影响 | 第41-43页 |
| 第二部分 结果与分析 | 第43-53页 |
| 1 表达载体的构建 | 第43-44页 |
| ·GAS41、GAS41N和GAS41C表达载体的构建 | 第43-44页 |
| ·AP-2β、AP-2βN和AP-2βC表达载体的构建 | 第44页 |
| 2 蛋白质的表达和纯化及抗体的制备 | 第44-46页 |
| ·GST-AP-2β、GST-AP-2βN、GST-AP-2βC及GST的表达与纯化 | 第44-45页 |
| ·His-GAS41、His-GAS41N和His-GAS41C的表达与纯化 | 第45页 |
| ·抗血清用Western-Blot检测 | 第45-46页 |
| 3 蛋白质相互作用的分析 | 第46-49页 |
| ·免疫共沉淀分析(Co-IP) | 第46-47页 |
| ·细胞共定位分析(Co-localization) | 第47-48页 |
| ·Pull-down分析 | 第48-49页 |
| 4 GAS41与AP-2β相互作用后对AP-2β转录活性的影响 | 第49-50页 |
| 5 GAS41与AP-2β相互作用后对AP-2β结合活性的影响(EMSA) | 第50-53页 |
| ·DNA结合实验检测所表达AP-2β蛋白质的活性 | 第50-51页 |
| ·表达蛋白质AP-2β与标记探针和非标记的探针的竞争性结合 | 第51页 |
| ·GAS41与AP-2β相互作用后对AP-2β结合活性的影响 | 第51-53页 |
| 第三部分 讨论 | 第53-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 附录1 | 第68-69页 |
| 附录2 | 第69页 |
