| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 符号说明 | 第15-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-23页 |
| 1． 缺血性疾病 | 第16-18页 |
| 1．1 缺血性疾病的概况 | 第16页 |
| 1．2 缺血性疾病的发病机制 | 第16-17页 |
| 1．3 缺血性疾病的治疗现状及存在问题 | 第17页 |
| 1．4 血管生成理论与治疗性血管生成 | 第17页 |
| 1．5 治疗性血管生成与缺血性疾病 | 第17-18页 |
| 2． 肝素与血管生成 | 第18-21页 |
| 2．1 血管内皮与血管生成的关系 | 第18页 |
| 2．2 肝素与血管内皮具有高度亲合性 | 第18-19页 |
| 2．3 肝素与促血管生成因子的作用 | 第19-21页 |
| 2．3．1 促血管生长因子的种类及特性 | 第19页 |
| 2．3．2 VEGF与血管生成 | 第19-20页 |
| 2．3．3 FGF与血管生成 | 第20-21页 |
| 2．3．4 临床实验 | 第21页 |
| 3． 本课题的设想 | 第21-23页 |
| 第二章 肝素衍生物的制备与检测 | 第23-32页 |
| 1． 材料 | 第23页 |
| 1．1 试剂 | 第23页 |
| 1．2 器材 | 第23页 |
| 2． 方法 | 第23-26页 |
| 2．1 肝素衍生物的制备 | 第23-25页 |
| 2．1．1 精品肝素分级沉淀 | 第24页 |
| 2．1．2 精品肝素的降解 | 第24页 |
| 2．1．3 多硫酸化修饰 | 第24页 |
| 2．1．4 脱硫酸化修饰 | 第24页 |
| 2．1．5 高分子肝素肼的合成 | 第24-25页 |
| 2．1．6 肝素衍生物的纯化 | 第25页 |
| 2．2 样品有机硫酸根含量测定 | 第25页 |
| 2．2．1 电导率法测定肝素有机硫酸根含量方法的建立 | 第25页 |
| 2．2．2 样品测定 | 第25页 |
| 2．3 抗凝效价的测定 | 第25-26页 |
| 2．4 平均分子量测定 | 第26页 |
| 3． 结果 | 第26-30页 |
| 3．1 肝素衍生物的有机硫酸根含量 | 第26-27页 |
| 3．2 肝素衍生物的抗凝效价 | 第27页 |
| 3．3 平均分子量测定图谱及结果 | 第27-30页 |
| 3．4 肝素衍生物样品测定结果 | 第30页 |
| 4． 讨论 | 第30-31页 |
| 4．1 肝素的过氧化氢降解 | 第30-31页 |
| 4．2 肝素的脱硫酸化修饰 | 第31页 |
| 4．3 肝素的多硫酸化修饰 | 第31页 |
| 4．4 肝素衍生物的有机硫酸根含量测定方法 | 第31页 |
| 5． 结论 | 第31-32页 |
| 第三章 肝素衍生物对心肌缺血小鼠血管生成的影响及作用机制的研究 | 第32-50页 |
| 实验1． 肝素衍生物对心肌缺血小鼠血管生成的影响 | 第32-39页 |
| 1 材料 | 第32页 |
| 1．1 试剂 | 第32页 |
| 1．2 动物 | 第32页 |
| 2 方法 | 第32-34页 |
| 2．1 心肌缺血损伤小鼠模型的制备 | 第32页 |
| 2．2 肝素衍生物促进缺血心肌血管生长的实验步骤 | 第32-34页 |
| 3 结果 | 第34-39页 |
| 3．1 肝素衍生物体内抗凝活性 | 第34-35页 |
| 3．2 小鼠缺血损伤心肌的病理形态学特征 | 第35页 |
| 3．3 HE病理切片结果 | 第35-36页 |
| 3．4 免疫组织化学染色结果 | 第36-39页 |
| 实验2． 肝素衍生物对心肌缺血小鼠血管生长影响的机制研究 | 第39-50页 |
| 一． 小鼠心肌缺血状态下aFGF、VEGF表达的检测 | 第39-44页 |
| 1 材料 | 第39页 |
| 1．1 试剂 | 第39页 |
| 1．2 动物 | 第39页 |
| 1．3 仪器 | 第39页 |
| 2 方法 | 第39-41页 |
| 2．1 心肌缺血损伤小鼠模型的制备 | 第39页 |
| 2．2 aFGF、VEGF检测标本的制备 | 第39-40页 |
| 2．3 免疫组化操作步骤 | 第40-41页 |
| 2．3．1 aFGF免疫组化染色操作步骤 | 第40页 |
| 2．3．2 VEGF免疫组化染色操作步骤 | 第40-41页 |
| 2．4 数据处理 | 第41页 |
| 3 结果 | 第41-44页 |
| 3．1 aFGF检测结果 | 第41-43页 |
| 3．1．1 aFGF免疫组化结果 | 第42页 |
| 3．1．2 aFGF免疫组化检测定量分析结果 | 第42-43页 |
| 3．2 VEGF检测结果 | 第43-44页 |
| 3．2．1 VEGF免疫组化结果 | 第43页 |
| 3．2．2 VEGF免疫组化定量检测结果 | 第43-44页 |
| 二． aFGF、VEGF与肝素衍生物在缺血小鼠心肌表达的复合染色 | 第44-47页 |
| 1． 材料 | 第44-45页 |
| 1．1 试剂 | 第44页 |
| 1．2 动物 | 第44页 |
| 1．3 试剂配制 | 第44-45页 |
| 2． 方法 | 第45-47页 |
| 2．1 肝素衍生物染色步骤 | 第45页 |
| 2．2 免疫组化染色步骤 | 第45页 |
| 2．3 免疫组化染色结果 | 第45-47页 |
| 2．3．1 aFGF与肝素复合染色结果 | 第45-46页 |
| 2．3．2 aFGF与肝素复合染色定量分析结果 | 第46页 |
| 2．3．3 VEGF与肝素复合染色结果 | 第46页 |
| 2．3．4 VEGF与肝素复合染色定量分析结果 | 第46-47页 |
| 讨论 | 第47-49页 |
| 1 心肌缺血损伤模型小鼠的构建 | 第47页 |
| 2 肝素衍生物分子量及硫酸化程度对心肌缺血小鼠血管生长的影响 | 第47-48页 |
| 2．1 分子量的影响 | 第47-48页 |
| 2．2 硫酸化程度的影响 | 第48页 |
| 3 aFGF与 VEGF在心肌缺血小鼠的表达 | 第48-49页 |
| 4 aFGF、VEGF与肝素在心肌缺血小鼠的复合染色 | 第49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 第四章 肝素衍生物对鸡胚绒毛尿囊血管生成作用的研究 | 第50-53页 |
| 1 材料 | 第50页 |
| 1．1 试剂 | 第50页 |
| 1．2 仪器 | 第50页 |
| 2 方法 | 第50-51页 |
| 2．1 CAM模型的建立 | 第50-51页 |
| 2．1．1 种蛋的选择 | 第50页 |
| 2．1．2 种蛋的消毒 | 第50页 |
| 2．1．3 种蛋的孵育 | 第50页 |
| 2．1．4 孵育中的转蛋 | 第50-51页 |
| 2．1．5 鸡胚的检查 | 第51页 |
| 2．1．6 假气室的制备 | 第51页 |
| 2．2 肝素衍生物对 CAM血管生成的影响试验 | 第51页 |
| 3 结果 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 第五章 肝素衍生物在烧伤小鼠创面愈合中的作用研究 | 第53-59页 |
| 1． 材料 | 第53页 |
| 1．1 实验药品 | 第53页 |
| 1．2 实验动物 | 第53页 |
| 1．3 实验试剂的制备 | 第53页 |
| 1．3．1 实验药物的配制 | 第53页 |
| 1．3．2 硫化钠脱毛剂的配制 | 第53页 |
| 2． 方法 | 第53-55页 |
| 2．1 动物模型的建立 | 第53-54页 |
| 2．2 给药及观察方法 | 第54-55页 |
| 3． 结果 | 第55-57页 |
| 3．1 伤口肉眼观察结果 | 第55页 |
| 3．2 创面愈合时间 | 第55页 |
| 3．3 创面愈合率 | 第55页 |
| 3．4 组织学检查 | 第55-56页 |
| 3．4．1 HE染色结果 | 第56页 |
| 3．4．2 结果评定 | 第56页 |
| 3．5 免疫组化染色结果 | 第56-57页 |
| 3．5．1 免疫组化染色 | 第56页 |
| 3．5．2 免疫组化染色结果定量分析 | 第56-57页 |
| 4． 讨论 | 第57-58页 |
| 5． 结论 | 第58-59页 |
| 第六章 具有促血管生长活性的肝素衍生物的结构测定 | 第59-63页 |
| 1． 药品和仪器 | 第59页 |
| 2． 方法 | 第59页 |
| 2．1 红外光谱扫描 | 第59页 |
| 2．2 核磁共振~(13)C图谱测定 | 第59页 |
| 3． 结果 | 第59-62页 |
| 3．1 肝素衍生物的红外扫描图谱 | 第59-60页 |
| 3．2 肝素衍生物的核磁共振~(13)C-NMR图谱测定 | 第60-62页 |
| 4． 讨论 | 第62-63页 |
| 小结 | 第63-65页 |
| 附图 | 第65-99页 |
| 参考文献 | 第99-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第106-107页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第107页 |
