| 前言 | 第1-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-23页 |
| 1．1．肝脏与药物肝毒性 | 第12-16页 |
| 1．1．1．肝毒性药物醋氨酚、利福平、异烟肼的毒性机理 | 第14-16页 |
| 1．1．2．谷胱甘肽对醋氨酚肝毒性的解毒作用机理 | 第16页 |
| 1．2．新药筛选中与药物肝毒性相关的研究进展 | 第16-19页 |
| 1．2．1．连续细胞系应用于药物筛选的优缺点 | 第18页 |
| 1．2．2．原代肝细胞应用于药物筛选的优缺点 | 第18-19页 |
| 1．3．肝细胞的体外培养研究现状 | 第19-21页 |
| 1．3．1．单层贴壁培养(Monolayer Culture) | 第19-20页 |
| 1．3．2．三维组织化培养(Three-Dimensional Culture) | 第20-21页 |
| 1．4．研究思路 | 第21-23页 |
| 1．4．1．建立一种适用于药物高通量筛选的三维培养微型肝细胞反应器 | 第21页 |
| 1．4．2．评价微型反应器用于药物肝毒性和解毒作用研究的可行性 | 第21-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-29页 |
| 2．1．动物与细胞株 | 第23页 |
| 2．2．试剂与器材 | 第23-24页 |
| 2．2．1．主要试剂 | 第23页 |
| 2．2．2．主要器材 | 第23-24页 |
| 2．3．培养基与所用溶液配方 | 第24-25页 |
| 2．3．1．大鼠肝细胞培养基 | 第24页 |
| 2．3．2．L929细胞培养基 | 第24页 |
| 2．3．3．浓缩培养基 | 第24页 |
| 2．3．4．磷酸缓冲液(PBS) | 第24页 |
| 2．3．5．灌注液Ⅰ | 第24-25页 |
| 2．3．6．灌注液Ⅱ | 第25页 |
| 2．3．7．低碳酸盐培养基 | 第25页 |
| 2．4．大鼠肝细胞收获方法 | 第25页 |
| 2．5．肝细胞计数法 | 第25-26页 |
| 2．6．肝细胞平皿单层培养 | 第26页 |
| 2．7．细胞胶原凝胶包埋 | 第26页 |
| 2．8．分析方法 | 第26-27页 |
| 2．8．1．尿素分析 | 第26页 |
| 2．8．2．大鼠白蛋白分析 | 第26-27页 |
| 2．9．细胞形态观察和活率 | 第27-29页 |
| 2．9．1．台盼兰拒染法 | 第27页 |
| 2．9．2．MTT法 | 第27页 |
| 2．9．3．EB／FDA荧光染色法 | 第27-29页 |
| 第三章 构建用于药物肝毒性研究的微型反应器 | 第29-36页 |
| 3．1．寻找适合细胞培养的材料和包埋基质 | 第29-30页 |
| 3．1．1．中空纤维丝材质和截留分子量的选择 | 第29-30页 |
| 3．1．2．包埋基质的选择 | 第30页 |
| 3．2．微型中空纤维反应器传氧和传质性能的定性研究 | 第30-32页 |
| 3．2．1．微型中空纤维反应器构型和参数 | 第30-31页 |
| 3．2．2．以细菌生长情况表征微型中空纤维反应器硅胶管外壳的传氧性能 | 第31页 |
| 3．2．3．采用L929细胞凝胶包埋进一步研究中空纤维丝的传氧和传质性能 | 第31-32页 |
| 3．3．微型中空纤维反应器包埋、细硅胶管包埋和单层贴壁三种培养方式下大鼠肝细胞存活时间和细胞活性的研究 | 第32-35页 |
| 3．4．本章小结 | 第35-36页 |
| 第四章 微型中空纤维反应器用于醋氨酚、异烟肼和利福平肝毒性研究 | 第36-45页 |
| 4．1．微型中空纤维反应器用于醋氨酚肝毒性的研究 | 第36-41页 |
| 4．1．1．不同浓度的醋氨酚对单层贴壁培养细胞的肝毒性作用 | 第36-37页 |
| 4．1．2．醋氨酚对微型中空纤维反应器凝胶包埋大鼠肝细胞的肝毒性作用 | 第37-38页 |
| 4．1．3．醋氨酚对细硅胶管凝胶包埋大鼠肝细胞的肝毒性作用 | 第38-39页 |
| 4．1．4．醋氨酚作用下大鼠肝细胞三种不同培养方式的比较 | 第39-41页 |
| 4．2．微型中空纤维反应器用于利福平、异烟肼的肝毒性研究 | 第41-44页 |
| 4．2．1．利福平和异烟肼对单层贴壁培养细胞的肝毒性作用 | 第42页 |
| 4．2．2．利福平和异烟肼对微型中空纤维反应器培养细胞的肝毒性作用 | 第42-44页 |
| 4．3．本章小结 | 第44-45页 |
| 第五章 微型中空纤维反应器作为体外保肝药物模型的初步研究 | 第45-51页 |
| 5．1．GSH对于醋氨酚引起的药物肝毒性的解毒作用的研究 | 第45-51页 |
| 5．1．1．不同浓度醋氨酚和谷胱甘肽作用于微型中空纤维反应器和单层培养的条件实验 | 第45-48页 |
| 5．1．2．GSH对于单层贴壁培养细胞药物肝毒性的解毒作用 | 第48页 |
| 5．1．3．GSH对于中空纤维丝凝胶包埋培养细胞药物肝毒性的解毒作用 | 第48-50页 |
| 5．1．4．本章小结 | 第50-51页 |
| 第六章 结论与展望 | 第51-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
