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梨f3h基因的克隆及植物载体的构建及应用RAPD技术对梨部分品种亲缘关系的探讨

中文摘要第1页
英文摘要第6-7页
第一部分 红巴梨f3h基因的克隆及植物载体的构建第7-35页
 1 文献综述第7-14页
   ·花色素简介第7-8页
   ·花色素的生物合成第8-9页
     ·影响花色素苷表现的因素第8-9页
     ·花色素苷生物合成的信号调控第9页
   ·花色素生物合成的遗传学背景第9-11页
     ·花色素生成相关基因第10-11页
     ·与液泡液pH相关的基因第11页
   ·花色素基因工程第11-14页
     ·反义抑制法第12页
     ·共抑制法第12页
     ·外源目的基因的导入第12页
     ·调节基因第12-13页
     ·其它方法第13-14页
 2 材料与试剂第14页
   ·实验材料第14页
   ·菌株第14页
   ·质粒第14页
   ·试剂第14页
   ·仪器与设备第14页
 3 花青素生成相关基因f3h基因的克隆第14-17页
   ·f3h基因全长序列的获得第14-15页
     ·全长的获得第14-15页
     ·添加酶切位点第15页
   ·DNA片段回收第15-16页
     ·回收第15-16页
     ·电泳检测回收片段纯度、大小第16页
   ·回收片段的连接第16页
   ·连接产物的转化第16页
     ·E.coli感受态细胞的制备第16页
     ·转化第16页
   ·质粒DNA的提取第16页
   ·插入片段的质粒检测第16-17页
     ·f3h基因cDNA的PCR检测第16-17页
     ·f3h基因cDNA的酶切检测第17页
   ·克隆片段的序列分析第17页
 4 植物表达载体的构建第17-18页
   ·f3h基因编码区的获得第17页
   ·载体pBI121的制备第17-18页
   ·连接、转化及重组克隆的筛选与鉴定第18页
 5 结果与分析第18-22页
   ·f3h基因全长的获得第18-21页
     ·引物A和B对cDNA的扩增结果第18-19页
     ·扩增产物的克隆和重组子的筛选第19页
     ·PCR检测变大的质粒图第19页
     ·酶切检测结果第19页
     ·测序结果第19-20页
     ·核酸和蛋白质同源性比较第20-21页
   ·植物表达载体的构建第21-22页
     ·f3h基因酶切结果第21页
     ·载体pBI121的制备第21页
     ·重组子的筛选第21页
     ·PCR检测结果第21-22页
 6 讨论第22-24页
   ·基因克隆第22页
   ·载体构建第22-24页
 参考文献第24-27页
 附录第27-35页
第二部分 应用RAPD技术对梨部分品种的鉴定及亲缘关系的探讨第35-59页
 1 文献综述第35-43页
   ·目前梨在落业果树中的地位及存在问题第35页
   ·果树分类研究方法第35-38页
     ·常规方法第35-36页
     ·分子标记第36-38页
   ·RAPD(随机扩增多态性DNA)简介第38-39页
   ·RAPD技术在果树上的应用第39-41页
     ·品种鉴定与分类第39页
     ·系谱分析第39页
     ·种质资源遗传多样性第39-40页
     ·体细胞变异和杂种后代的变异第40页
     ·构建遗传学图谱第40-41页
     ·目标基因的定位与分离第41页
   ·RAPD存在的问题第41-43页
 2 材料及方法第43-46页
   ·梨基因组DNA的提取及鉴定第43-44页
     ·材料第43-44页
     ·试剂第44页
     ·操作方法第44页
     ·DNA质量的检测第44页
   ·RAPD条件的优化第44-45页
     ·材料第44页
     ·试剂第44页
     ·PCR扩增条件第44-45页
     ·参数梯度设计第45页
     ·电泳检测第45页
   ·RAPD技术对梨部分品种的鉴定第45-46页
     ·材料第45页
     ·方法第45-46页
 3 结果与分析第46-49页
   ·DNA提取及鉴定第46页
     ·DNA提取和质量评估第46页
     ·试材选用第46页
   ·RAPD条件优化第46-47页
     ·Mg~(2+)浓度影响第46页
     ·随机引物浓度的影响第46页
     ·dNTP浓度的影响第46页
     ·Taq酶浓度影响第46-47页
     ·DNA模板浓度的影响第47页
   ·品种聚类分析第47-49页
     ·引物的选择及多态性分析第47页
     ·不同引物的扩增结果第47-48页
     ·聚类分析结果第48-49页
 4 讨论第49-51页
 参考文献第51-55页
 附录第55-59页

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