| 内容提要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1 、 文献综述 | 第8-22页 |
| ·蜘蛛丝的特性及其应用 | 第8-9页 |
| ·蛛丝蛋白基因的结构 | 第9-11页 |
| ·蛛丝蛋白基因工程研究 | 第11-13页 |
| ·丝蛋白纤维生物材料与组织工程 | 第13-19页 |
| ·细胞生长的微环境 | 第13-14页 |
| ·丝蛋白纤维生物材料 | 第14-16页 |
| ·纤蛋白纤维生物材料应用于组织工程 | 第16-19页 |
| ·丝蛋白膜的制备及其在生物医学领域的应用 | 第19-21页 |
| ·本论文的研究目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 、 材料与方法 | 第22-35页 |
| ·材料 | 第22-24页 |
| ·菌株与载体 | 第22页 |
| ·工具酶 | 第22页 |
| ·重要试剂 | 第22页 |
| ·培养基与常用溶液 | 第22-24页 |
| ·化学合成的基因片段 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-35页 |
| ·寡核苷酸片段的设计与合成 | 第24-25页 |
| ·寡核苷酸片段磷酸化、退火、连接与鉴定 | 第25-30页 |
| ·RGD-蛛丝蛋白基因单体多聚化 | 第30-31页 |
| ·RGD-蛛丝蛋白基因多聚体重组表达质粒的构建 | 第31页 |
| ·RGD-蛛丝蛋白基因多聚重组体的表达和分析性纯化 | 第31-32页 |
| ·蛋白质印迹分析 | 第32页 |
| ·重组蛋白等电点测定及制备性分离纯化 | 第32-33页 |
| ·pNSR-16高密度发酵及产物的规模量分离纯化 | 第33-34页 |
| ·重组RGD-蛛丝蛋白的溶解及丝膜制备 | 第34-35页 |
| 3 、 结果与分析 | 第35-46页 |
| ·RGD-蛛丝蛋白基因单体克隆的结果 | 第35-36页 |
| ·RGD-蛛丝蛋白基因单体的多聚化与表达载体的构建 | 第36-39页 |
| ·RGD-蛛丝蛋白基因的表达、分析性纯化及鉴定 | 第39-41页 |
| ·pNSR-16分批补料高密度发酵 | 第41-42页 |
| ·重组蛋白的等电点及与分离纯化 | 第42-43页 |
| ·重组蛛丝蛋白质的溶解及丝膜制备 | 第43-46页 |
| 4 、 讨论 | 第46-50页 |
| ·基因设计与合成 | 第46-47页 |
| ·基因单体序列测定 | 第47页 |
| ·基因单体的多聚化与表达 | 第47-48页 |
| ·重组蛋白的等电点测定及分离纯化 | 第48页 |
| ·重组蛛丝蛋白膜的制备 | 第48-50页 |
| 5 、 主要结论及今后的工作设想 | 第50-51页 |
| 6 、 英文缩略词表 | 第51-52页 |
| 7 、 参考文献 | 第52-58页 |
| 8 、 附录 | 第58-63页 |
| ·RGD-蛛丝蛋白基因单体序列测序结果 | 第58-59页 |
| ·基因单体克隆及多聚体构建示意图 | 第59-60页 |
| ·pNSR-16表达产物的疏水性分析 | 第60-61页 |
| ·重组蛛丝蛋白膜外观图 | 第61-62页 |
| ·在学期间发表的论文 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 中文摘要 | 第64-65页 |