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红树林耐盐基因(AOC)的克隆及其转化热研五号柱花草的初步探讨

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-8页
引言第8-10页
文献综述第10-19页
 1 抗盐种类及盐生植物的分类第10-11页
   ·抗盐种类第10页
   ·盐生植物的分类第10-11页
     ·真盐生植物第10页
     ·假盐生植物第10-11页
     ·泌盐盐生植物第11页
 2 植物抵抗盐胁迫的分子机理第11-13页
   ·植物拒盐的分子机理第11-13页
     ·无机离子的选择性吸收和运输第11-12页
     ·盐分区隔化第12页
     ·有机小分子的渗透调节作用第12-13页
   ·植物耐盐的分子机理第13页
     ·低盐条件下植物耐盐机制第13页
     ·在高盐离子条件下的耐盐机理第13页
 3 植物盐适应过程中的基因表达第13-17页
   ·有机小分子渗透调节剂合成酶基因第14页
   ·渗透调节蛋白基因第14页
   ·LEA基因及ABA应答基因第14-15页
   ·跨膜运输蛋白及其基因第15-17页
     ·质膜H~+-ATP第15页
     ·液泡膜H~+-ATPase第15-16页
     ·Ca~(2+)-ATPase第16-17页
 4 丙二烯环化氧化酶AOC的功能第17页
 5 茉莉酸类化合物的生理效应第17-18页
 6 红树林海莲丙二烯环化氧化酶AOC的功能第18-19页
海莲丙二烯环化氧化酶AOC基因转柱花草的研究第19-23页
 1 耐盐相关基因及其转基因研究进展第19页
 2 AOC基因与ipt基因的有机结合第19-20页
 3 技术路线和创新点第20-22页
 4 研究内容第22-23页
实验材料和方法第23-36页
 1 实验材料第23页
   ·植物第23页
   ·菌株第23页
   ·质粒第23页
   ·试剂第23页
 2 方法第23-36页
   ·热研五号柱花草遗传转化体系的建立第24-26页
   ·载体的构建方法第26-31页
     ·小量提取质粒的方法第26-27页
     ·大量提取质粒的方法第27-28页
     ·聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA第28-29页
     ·定向克隆方法第29页
     ·胶回收方法第29-30页
     ·大肠杆菌的转化方法第30-31页
       ·大肠杆菌的感受态制备方法第30页
       ·大肠杆菌感受态的检测和转化方法第30-31页
   ·红树林海莲总RNA的提取方法第31-32页
   ·RT-PCR第32-33页
     ·引物第32页
     ·反转录第32-33页
     ·PCR反应第33页
   ·琼脂糖凝胶电泳分离DNA第33页
   ·三亲交配转化农杆菌GV3101方法第33-34页
   ·农杆菌侵染热研五号柱花草第34-36页
结果第36-59页
 1 热研五号柱花草遗传转化体系第36-39页
   ·最优外植体的筛选第36页
   ·柱花草外植体愈伤形成、分化和伸长最适激素配比的筛选第36-37页
   ·柱花草愈伤组织生根培养第37页
   ·抗生素和除草剂浓度对热研五号柱花草愈伤形成的影响第37-39页
 2 红树林海莲AOC基因的分离与鉴定第39-41页
   ·海莲总RNA提取第39-40页
   ·RT-PCR第40页
   ·AOC基因序列分析第40-41页
 3 植物表达载体的构建第41-56页
   ·双35S启动子AOC和ipt转录融合表达载体35S-35S-0229AOC:::ipt构建第42-51页
     ·pBluescript-AOC载体的构建和鉴定第44-45页
     ·pBluescriptAOC:::ipt中间载体构建第45-47页
     ·pJIT60AOC:::ipt中间载体构建第47-49页
     ·35S-35S-0229AOC:::ipt植物表达载体构建第49-51页
   ·单35S启动子AOC和ipt转录融合表达载体35S-0229AOC:::ipt构建第51-56页
     ·pJIT61AOC:::ipt中间载体构建第53-54页
     ·35S-0229AOC:::ipt植物表达载体构建第54-56页
 4 农杆菌侵染热研五号柱花草第56-59页
讨论第59-63页
 1 热研五号柱花草遗传体系的建立第59-60页
 2 ipt基因转录融合AOC基因导入柱花草第60-62页
 3 实验的不足之处第62-63页
参考文献第63-69页
致谢第69页

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