中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-8页 |
引言 | 第8-10页 |
文献综述 | 第10-19页 |
1 抗盐种类及盐生植物的分类 | 第10-11页 |
·抗盐种类 | 第10页 |
·盐生植物的分类 | 第10-11页 |
·真盐生植物 | 第10页 |
·假盐生植物 | 第10-11页 |
·泌盐盐生植物 | 第11页 |
2 植物抵抗盐胁迫的分子机理 | 第11-13页 |
·植物拒盐的分子机理 | 第11-13页 |
·无机离子的选择性吸收和运输 | 第11-12页 |
·盐分区隔化 | 第12页 |
·有机小分子的渗透调节作用 | 第12-13页 |
·植物耐盐的分子机理 | 第13页 |
·低盐条件下植物耐盐机制 | 第13页 |
·在高盐离子条件下的耐盐机理 | 第13页 |
3 植物盐适应过程中的基因表达 | 第13-17页 |
·有机小分子渗透调节剂合成酶基因 | 第14页 |
·渗透调节蛋白基因 | 第14页 |
·LEA基因及ABA应答基因 | 第14-15页 |
·跨膜运输蛋白及其基因 | 第15-17页 |
·质膜H~+-ATP | 第15页 |
·液泡膜H~+-ATPase | 第15-16页 |
·Ca~(2+)-ATPase | 第16-17页 |
4 丙二烯环化氧化酶AOC的功能 | 第17页 |
5 茉莉酸类化合物的生理效应 | 第17-18页 |
6 红树林海莲丙二烯环化氧化酶AOC的功能 | 第18-19页 |
海莲丙二烯环化氧化酶AOC基因转柱花草的研究 | 第19-23页 |
1 耐盐相关基因及其转基因研究进展 | 第19页 |
2 AOC基因与ipt基因的有机结合 | 第19-20页 |
3 技术路线和创新点 | 第20-22页 |
4 研究内容 | 第22-23页 |
实验材料和方法 | 第23-36页 |
1 实验材料 | 第23页 |
·植物 | 第23页 |
·菌株 | 第23页 |
·质粒 | 第23页 |
·试剂 | 第23页 |
2 方法 | 第23-36页 |
·热研五号柱花草遗传转化体系的建立 | 第24-26页 |
·载体的构建方法 | 第26-31页 |
·小量提取质粒的方法 | 第26-27页 |
·大量提取质粒的方法 | 第27-28页 |
·聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA | 第28-29页 |
·定向克隆方法 | 第29页 |
·胶回收方法 | 第29-30页 |
·大肠杆菌的转化方法 | 第30-31页 |
·大肠杆菌的感受态制备方法 | 第30页 |
·大肠杆菌感受态的检测和转化方法 | 第30-31页 |
·红树林海莲总RNA的提取方法 | 第31-32页 |
·RT-PCR | 第32-33页 |
·引物 | 第32页 |
·反转录 | 第32-33页 |
·PCR反应 | 第33页 |
·琼脂糖凝胶电泳分离DNA | 第33页 |
·三亲交配转化农杆菌GV3101方法 | 第33-34页 |
·农杆菌侵染热研五号柱花草 | 第34-36页 |
结果 | 第36-59页 |
1 热研五号柱花草遗传转化体系 | 第36-39页 |
·最优外植体的筛选 | 第36页 |
·柱花草外植体愈伤形成、分化和伸长最适激素配比的筛选 | 第36-37页 |
·柱花草愈伤组织生根培养 | 第37页 |
·抗生素和除草剂浓度对热研五号柱花草愈伤形成的影响 | 第37-39页 |
2 红树林海莲AOC基因的分离与鉴定 | 第39-41页 |
·海莲总RNA提取 | 第39-40页 |
·RT-PCR | 第40页 |
·AOC基因序列分析 | 第40-41页 |
3 植物表达载体的构建 | 第41-56页 |
·双35S启动子AOC和ipt转录融合表达载体35S-35S-0229AOC:::ipt构建 | 第42-51页 |
·pBluescript-AOC载体的构建和鉴定 | 第44-45页 |
·pBluescriptAOC:::ipt中间载体构建 | 第45-47页 |
·pJIT60AOC:::ipt中间载体构建 | 第47-49页 |
·35S-35S-0229AOC:::ipt植物表达载体构建 | 第49-51页 |
·单35S启动子AOC和ipt转录融合表达载体35S-0229AOC:::ipt构建 | 第51-56页 |
·pJIT61AOC:::ipt中间载体构建 | 第53-54页 |
·35S-0229AOC:::ipt植物表达载体构建 | 第54-56页 |
4 农杆菌侵染热研五号柱花草 | 第56-59页 |
讨论 | 第59-63页 |
1 热研五号柱花草遗传体系的建立 | 第59-60页 |
2 ipt基因转录融合AOC基因导入柱花草 | 第60-62页 |
3 实验的不足之处 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
致谢 | 第69页 |