| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-32页 |
| ·PRV的分子生物学 | 第11-26页 |
| ·PRV的病毒粒子结构 | 第11-15页 |
| ·PRV基因表达调控元件的特征 | 第15-19页 |
| ·PRV增殖过程中的分子生物学 | 第19-25页 |
| ·PRV潜伏感染的分子生物学 | 第25-26页 |
| ·α-疱疹病毒UL48、UL49、UL14及UL15基因的研究 | 第26-32页 |
| ·UL48 | 第26-28页 |
| ·UL49 | 第28-30页 |
| ·UL15 | 第30-31页 |
| ·UL14 | 第31-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-45页 |
| ·材料 | 第32-35页 |
| ·病毒及细胞 | 第32页 |
| ·质粒及菌株 | 第32页 |
| ·培养基 | 第32-33页 |
| ·酶及试剂盒 | 第33页 |
| ·其它相关试剂 | 第33页 |
| ·主要溶液 | 第33-35页 |
| ·方法 | 第35-45页 |
| ·PRV的增殖 | 第35页 |
| ·PRV病毒基因组DNA的提取 | 第35页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第35-36页 |
| ·大肠杆菌(E.coli)感受态细胞的制备 | 第36页 |
| ·连接产物的转化 | 第36页 |
| ·重组质粒的快速鉴定 | 第36页 |
| ·质粒的少量制备(碱裂解法) | 第36-37页 |
| ·质粒的大量制备(碱裂解法)及PEG纯化 | 第37页 |
| ·DNA胶快速回收试剂盒的使用 | 第37页 |
| ·DNA重组技术(DNA酶切、连接) | 第37-38页 |
| ·序列测定 | 第38页 |
| ·Southern杂交 | 第38-39页 |
| ·大肠杆菌BL21(DE3)plysS的表达诱导与样本处理 | 第39页 |
| ·包涵体的提取 | 第39页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第39-40页 |
| ·Western blot | 第40-41页 |
| ·哺乳动物细胞的转染 | 第41页 |
| ·gN基因的PCR扩增 | 第41-42页 |
| ·mut4EGFP基因的PCR扩增 | 第42页 |
| ·UL48基因的PCR扩增 | 第42-43页 |
| ·UL49基因的PCR扩增 | 第43页 |
| ·UL14基因的PCR扩增 | 第43-44页 |
| ·包含剪接位点的UL15基因部分编码区的RT-PCR扩增 | 第44-45页 |
| 3 结果 | 第45-69页 |
| ·含UL49基因的PRV基因组片段的克隆与序列分析 | 第45-46页 |
| ·含UL49基因片段的确定 | 第45页 |
| ·SalI 2.8kb片段的克隆与鉴定 | 第45页 |
| ·测序质粒的构建 | 第45-46页 |
| ·序列测定与分析 | 第46页 |
| ·UL48基因的克隆与表达 | 第46-54页 |
| ·UL48基因的PCR扩增与克隆 | 第46页 |
| ·序列分析与同源性比较 | 第46-52页 |
| ·原核表达质粒的构建与鉴定 | 第52页 |
| ·UL48基因在BL21(DE3)plysS中的表达与检测 | 第52页 |
| ·真核表达质粒的构建与鉴定 | 第52-53页 |
| ·UL48基因在Hela细胞中的表达与定位 | 第53-54页 |
| ·UL49基因的克隆与表达 | 第54-61页 |
| ·UL49基因的PCR扩增与克隆 | 第54-56页 |
| ·序列测定与分析 | 第56-58页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第58页 |
| ·UL49基因在BL21(DE3)plysS中的表达 | 第58页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第58-60页 |
| ·UL49基因在Hela细胞中的表达及其定位 | 第60-61页 |
| ·PRV BamHI-3、BamHI-4的克隆与未知区段的序列测定 | 第61-65页 |
| ·PRV BamHI-3、BamHI-4的克隆 | 第61-62页 |
| ·序列测定 | 第62-65页 |
| ·UL15基因剪接位点的确定 | 第65-67页 |
| ·包含UL15基因剪接位点片段的RT-PCR扩增 | 第65页 |
| ·RT-PCR产物的序列测定与剪接位点的确定 | 第65-67页 |
| ·UL14基因的克隆与表达 | 第67-69页 |
| ·UL14基因的PCR扩增 | 第67页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第67页 |
| ·UL14基因在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中的高效表达 | 第67-69页 |
| 4 讨论 | 第69-73页 |
| ·Sal I 2.8kb片段的克隆与测序 | 第69页 |
| ·UL48基因的克隆与表达 | 第69-70页 |
| ·UL49基因的克隆与表达 | 第70-71页 |
| ·BamHI-3、BamHI-4片段的序列测定 | 第71页 |
| ·UL15基因剪接位点的确定 | 第71-72页 |
| ·展望 | 第72-73页 |
| 5 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
