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白细胞起始黏附过程PSGL-1介导的信号的研究

前言第1-31页
 一、白细胞的其始黏附第14-15页
 二、选择素家族的组成及分子结构第15-17页
 三、选择素的基因表达与调控第17-18页
 四、选择素分子的配体第18-21页
  1.糖脂与选择素的结合第19-20页
  2.糖蛋白作为选择素理想的高亲和性配体第20-21页
 五、起始黏附过程中选择素及其配体介导的信号转导第21-22页
 六、PSGL-1的研究进展第22-30页
  1.PSGL-1的基本结构第23-24页
  2.PSGL-1适应与P-选择素结合的翻译后修饰第24-26页
  3.PSGL-1在组织中的分布及细胞膜上的定位第26-27页
  4.PSGL-1与选择素间的作用第27-29页
  5.PSGL-1与信号转导第29-30页
  6.PSGL-1的研究在诊断治疗方面的应用第30页
 七、本论文的研究目的和意义第30-31页
材料与方法第31-42页
 一、实验材料第31-32页
  1.细胞第31页
  2.抗体第31页
  3.试剂第31-32页
  4.质粒第32页
  5.引物第32页
  6.仪器设备第32页
 二、实验方法第32-42页
  1.细胞培养第32-33页
  2.外周血中性粒细胞的制备第33页
  3.PSGL-1的抗体交联第33页
  4.性粒细胞的细胞变形(shape change)实验第33-34页
  5.中性粒细胞PSGL-1的标记第34页
  6.中性粒细胞细胞骨架的标记第34-35页
  7.中性粒细胞膜可溶蛋白的去垢剂抽提第35页
  8.流式分析第35-36页
  9.免疫荧光双标记第36页
  10.质粒的制第36-39页
  11.哺乳动物细胞电穿孔转染第39页
  12.报告基因(荧光素酶双报告系统)检测第39-40页
  13.RNA提取第40页
  14.反转录(RT)第40-41页
  15.PCR第41-42页
实验结果第42-66页
 一、PSGL-1抗体交联对白细胞骨架的影响第42-57页
  1.PSGL-1抗体交联引起嗜中性粒细胞形态改变第42-45页
  2.PSGL-1成为交联活化后嗜中性粒细胞上与细胞骨架联系的成分第45-47页
  3.PSGL-1抗体交联引起嗜中性粒细胞内F-actin的聚合和重新分布第47-49页
  4.PSGL-1抗体交联引起的嗜中性粒细胞内F-actin的改变是酪氨酸磷酸化依赖的、c-Abl参与的第49-52页
  5.抗体交联活化的嗜中性粒细胞上PSGL-1极化分布第52-53页
  6.活化嗜中性粒细胞内F-actin的重新分布与PSGL-1的极化是时空相关的第53-55页
  7.活化嗜中性粒细胞内非受体酪氨酸激酶c-Abl重新分布第55-57页
 二、PSGL-1抗体交联对白细胞基因表达的影响第57-66页
  1.PSGL-1抗体交联增强了M-CSF基因启动子的转录活性第57-58页
  2.PSGL-1抗体交联增加了M-CSF的mRNA的表达第58-61页
  3.过表达c-Abl没有明显促进PSGL-1抗体交联引发的外源M-CSF启动子转录活性的上调第61-62页
  4.非受体酩氨酸激酶Syk参与了PSGL-1抗体交联引起的外源M-CSF启动子转录活性的上调第62-63页
  5.非受体酪氨酸激酶Syk的抑制剂抑制了PSGL-1抗体交联引起的内源M-CSF基因的转录第63-66页
讨论第66-74页
 一、黏附分子触发的白细胞活化过程中F-actin为结构基础的细胞骨架的改变是一个重要事件第66-67页
 二、黏附分子触发的白细胞活化过程中的基因转录调控第67-68页
 三、酪氨酸蛋白激酶在黏附分子触发的白细胞活化过程中扮演重要角色第68-74页
  1.c-Abl参与了PSGL-1抗体交联引起的人中性粒细胞中F-actin细胞骨架的改变第71-72页
  2.Syk参与了PSGL-1抗体交联引起的Jurkat细胞中CSF-1基因转录活性的上调第72-74页
结论第74-75页
本论文主要创新点第75-76页
参考文献第76-91页
致谢第91-92页
在读期间发表论著情况第92页

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