| 缩略词 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 综述 | 第10-23页 |
| ·植物对环境的应答反应 | 第10-11页 |
| ·非生物胁迫 | 第10-11页 |
| ·生物胁迫 | 第11页 |
| ·转录因子的结构与功能及其在植物胁迫应答中的作用 | 第11-15页 |
| ·转录因子的结构功能 | 第11-13页 |
| ·转录因子的表达调控 | 第13-14页 |
| ·植物中胁迫相关的转录因子 | 第14-15页 |
| ·乙烯信号转导途径及EREBP类转录因子家族 | 第15-21页 |
| ·AP2／EREBP类转录因子概述 | 第15-18页 |
| ·和EREBP家族转录因子互作的顺式元件及该家族成员在胁迫信号应答中的作用 | 第18-21页 |
| ·EREBP家族成员表达改变后对植物造成的影响 | 第21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 第二章 JERFs超表达载体和反义载体的构建以及农杆菌阳性菌株的获得 | 第23-32页 |
| ·材料与方法 | 第23页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·酶及试剂 | 第23页 |
| ·常用溶液配制 | 第23-24页 |
| ·培养基配制 | 第23页 |
| ·一般溶液的配制 | 第23-24页 |
| ·实验试剂配制 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-30页 |
| ·质粒的提取 | 第24-25页 |
| ·质粒的酶切(30μl体系) | 第25页 |
| ·从质粒载体上扩增所需目的片段(50μl体系) | 第25-26页 |
| ·PCP产物的回收及酶切 | 第26页 |
| ·琼脂糖凝胶中DNA片段的回收 | 第26-27页 |
| ·表达载体的构建 | 第27-28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
| ·连接反应 | 第29页 |
| ·重组子pROK2-JERFs导入大肠杆菌 | 第29页 |
| ·重组子pROK2-JERFs以及pROK2-antiJERFs的鉴定 | 第29页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第29-30页 |
| ·电转化农杆菌 | 第30页 |
| ·阳性农杆菌菌株的鉴定 | 第30页 |
| ·结果与讨论 | 第30-31页 |
| ·JERFs超表达载体及反义载体的构建 | 第30-31页 |
| ·农杆菌超表达菌体的获得 | 第31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| 第三章 农杆菌介导JERFs转化烟草和番茄以及转基因烟草中含GCC-box基因表达分析 | 第32-45页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·常用溶液配制 | 第32-33页 |
| ·培养基配制 | 第32页 |
| ·基因组DNA提取缓冲液: | 第32页 |
| ·Northern杂交: | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-37页 |
| ·根癌农杆菌介导pROK2-JERFs转化烟草及pROK2-antiJERFs转化番茄 | 第33-34页 |
| ·鉴定转基因植株 | 第34-35页 |
| ·Northern杂交检测JERFs基因的表达情况及含GCC-box的基因的表达情况 | 第35-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-44页 |
| ·转JERFs基因烟草植株以及转anti-JERFs基因番茄植株的获得及PCR鉴定 | 第37-42页 |
| ·烟草超表达转基因苗的Northern鉴定以及含GCC box的基因表达情况检测 | 第42-44页 |
| ·33正4转基因株系的表型改变 | 第44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第四章 转基因烟草表型以及生理方面发生的改变 | 第45-52页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·实验材料 | 第45页 |
| ·实验试剂 | 第45页 |
| ·常用溶液配制 | 第45-46页 |
| ·培养基的配置 | 第45页 |
| ·一般试剂的配置 | 第45页 |
| ·Southern杂交 | 第45页 |
| ·Northern杂交 | 第45-46页 |
| ·实验方法 | 第46-48页 |
| ·转基因烟草表型变化的分析 | 第46页 |
| ·转基因烟草的抗逆性分析 | 第46页 |
| ·Southern杂交鉴定转基因植株 | 第46-48页 |
| ·Northern杂交检测JERFs基因的表达情况及含GCC-box的基因的表达情况 | 第48页 |
| ·结果与分析 | 第48-51页 |
| ·部分T2代种子的抗性筛选分离比率 | 第48-49页 |
| ·33正4T2代烟草表型改变 | 第49页 |
| ·转基因烟草的生长延迟现象 | 第49-50页 |
| ·转基因烟草的耐低温分析 | 第50页 |
| ·转基因烟草的耐旱分析 | 第50页 |
| ·33正4T2代植株的Southern blotting及Northern blotting实验 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 第五章 讨论 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
