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Cry1Ac蛋白ELISA检测体系的建立

致谢第1-8页
摘要第8-11页
Abstract第11-14页
目录第14-17页
第一章 文献综述第17-27页
   ·Bt蛋白简介第17-18页
   ·转基因食品研究进展第18-19页
   ·转基因食品检测的意义第19页
   ·转基因食品检测方法及其应用第19-24页
     ·PCR、ELISA及其比较第20-22页
       ·PCR技术第20页
       ·ELISA技术第20-21页
       ·PCR技术与ELISA技术的比较第21-22页
     ·PCR在转基因食品检测中的应用第22-23页
     ·ELISA在转基因食品检测中的应用第23-24页
   ·本课题研究意义与目的第24-25页
   ·本课题研究内容及技术路线第25-27页
     ·研究内容第25-26页
     ·技术路线第26-27页
第二章 多克隆抗体的制备及鉴定第27-36页
   ·实验材料第27-29页
     ·主要实验试剂第27-28页
     ·主要实验设备第28-29页
     ·实验材料第29页
   ·实验方法第29-32页
     ·蛋白浓度的测定第29页
     ·Cry1Ac蛋白纯度分析第29页
     ·多抗血清的制备第29-30页
     ·多抗血清效价的测定第30-31页
     ·多抗血清的纯化第31页
     ·多克隆抗体纯度分析第31-32页
   ·结果与分析第32-35页
     ·蛋白浓度的测定第32页
     ·Cry1Ac蛋白纯度分析第32-33页
     ·多抗血清效价的测定第33-34页
     ·多克隆抗体的纯化第34页
     ·多克隆抗体纯度第34-35页
   ·本章小结第35-36页
第三章 单克隆抗体的制备和鉴定第36-49页
   ·实验材料第36-38页
     ·主要实验试剂第36-37页
     ·主要实验设备第37-38页
     ·实验动物第38页
     ·实验细胞第38页
   ·实验方法第38-41页
     ·细胞融合和杂交瘤细胞的筛选第38-40页
       ·细胞融合第38-39页
       ·杂交瘤细胞的筛选第39-40页
     ·单克隆抗体的纯化及鉴定第40页
     ·单克隆抗体效价的测定第40-41页
     ·单克隆抗体亲和常数的测定第41页
     ·抗Cry1Ac蛋白兔单克隆抗体与其他Bt-Cry蛋白的交叉反应第41页
   ·实验结果与分析第41-48页
     ·免疫效果测定第41-42页
     ·杂交瘤细胞筛选第42-44页
     ·单克隆抗体的纯化第44-45页
     ·单克隆抗体纯度鉴定第45-46页
     ·单克隆抗体效价测定第46页
     ·抗体亲和常数第46-47页
     ·兔单克隆抗体与其他Bt-Cry蛋白之间的交叉反应第47-48页
   ·本章小结第48-49页
第四章 Cry1Ac蛋白ELISA检测方法的建立第49-62页
   ·实验材料第49-51页
     ·主要实验试剂第49-50页
     ·主要实验设备第50-51页
   ·实验方法第51-54页
     ·HRP酶标抗体的制备第51页
     ·酶标抗体工作浓度的确定第51-52页
     ·间接ELISA测抗原第52页
     ·双抗夹心ELISA第52-53页
     ·ELISA检测方法与其他Bt蛋白的交叉反应第53页
     ·粗提取水稻叶片蛋白第53页
     ·ELISA检测方法精确度测定第53页
     ·ELISA检测方法准确性测定第53-54页
   ·实验结果与分析第54-60页
     ·酶标抗体工作浓度的确定第54页
     ·间接ELISA测抗原第54-55页
     ·双抗夹心ELISA第55-57页
     ·三种ELISA检测方法的比较第57页
     ·单抗-抗原-酶标多抗夹心ELISA方法的适用性第57-60页
       ·ELISA方法的特异性第58页
       ·ELISA方法的精确性第58-59页
       ·ELISA方法准确性的初步分析第59-60页
   ·本章小结第60-62页
第五章 结论与展望第62-66页
   ·抗原纯度及浓度分析测定第62页
   ·多抗血清纯化及多克隆抗体制备第62页
   ·杂交瘤细胞筛选及单克隆抗体制备第62-63页
   ·抗体HRP标记及其工作浓度的确定第63页
   ·ELISA方法的建立第63页
   ·ELISA方法适用性第63-64页
   ·创新性第64页
   ·实验展望第64-66页
参考文献第66-73页
作者简介第73页

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