摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第1章 绪论 | 第12-19页 |
·鸡在生命科学研究中的重要性 | 第12-13页 |
·鸡在进化中的重要性 | 第12页 |
·鸡在免疫学研究中的重要性 | 第12-13页 |
·鸡作为模式动物在科学研究中重要性 | 第13页 |
·TMEM9B 基因的研究进展 | 第13-14页 |
·TMEM9 基因的发现 | 第13页 |
·TMEM9B 基因的发现 | 第13-14页 |
·鸡 TMEM9B 基因的研究展望 | 第14页 |
·Akirin 基因的研究进展 | 第14-17页 |
·Akirin 基因的发现 | 第14页 |
·Akirin 基因的结构和分布 | 第14-15页 |
·Akirin 基因的功能研究进展 | 第15-16页 |
·鸡 Akirin2 基因的研究展望 | 第16-17页 |
·禽类免疫中存在的问题 | 第17页 |
·本研究的目的和意义 | 第17页 |
·本研究的主要内容与技术路线 | 第17-19页 |
第2章 鸡 TMEM9B 同源基因的克隆及特性研究 | 第19-43页 |
·实验材料 | 第19-20页 |
·实验动物 | 第19页 |
·质粒与菌种 | 第19页 |
·酶和生化制剂 | 第19页 |
·引物 | 第19-20页 |
·培养基 | 第20页 |
·主要仪器设备 | 第20页 |
·实验方法 | 第20-29页 |
·电子克隆 | 第20-21页 |
·总 RNA 的提取 | 第21页 |
·RT-PCR | 第21-23页 |
·PCR 扩增产物的电泳 | 第23页 |
·PCR 产物的胶回收纯化 | 第23-24页 |
·PCR 纯化产物与载体的连接 | 第24-25页 |
·连接产物的转化 | 第25页 |
·菌落 PCR 鉴定 | 第25-26页 |
·质粒提取 | 第26-27页 |
·重组质粒的双酶切鉴定及测序 | 第27页 |
·生物学信息分析 | 第27页 |
·半定量 RT-PCR 表达谱分析 | 第27页 |
·pcDNA3.1-tmem9B 重组表达载体的构建 | 第27-29页 |
·结果与分析 | 第29-40页 |
·pMD18-T-tmem9B(T-A)克隆 | 第29-32页 |
·生物信息学分析 | 第32-37页 |
·鸡 TMEM9B 表达谱和组织表达差异性分析 | 第37-39页 |
·pcDNA3.1-tmem9B 载体构建 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-42页 |
·鸡 TMEM9B 基因的进化性分析 | 第40-41页 |
·生物信息学分析 | 第41页 |
·TMEM9B 的细胞定位 | 第41页 |
·MicroRNA 与表达谱 | 第41-42页 |
·重组表达载体的构建 | 第42页 |
·本章小结 | 第42-43页 |
第3章 鸡 Akirin2 基因的亚克隆及免疫功能研究 | 第43-55页 |
·实验材料 | 第43-44页 |
·实验动物 | 第43页 |
·新城疫疫苗 | 第43-44页 |
·质粒 | 第44页 |
·引物 | 第44页 |
·实验方法 | 第44-49页 |
·pcDNA3.1-akirin2 表达载体的构建 | 第44-46页 |
·大量提取重组表达载体 pcDNA3.1-akirin2 和 pcDNA3.1-EGFP 质粒 | 第46-47页 |
·雏鸡免疫与重组质粒的注射 | 第47页 |
·血清的制备 | 第47页 |
·鸡红细胞悬液的制备 | 第47页 |
·HA 实验确定抗原滴度 | 第47-48页 |
·HI 实验确定血清新城疫抗体水平 | 第48-49页 |
·结果与分析 | 第49-53页 |
·载体构建 | 第49-51页 |
·Akirin2 的免疫增强结果 | 第51-53页 |
·讨论 | 第53-54页 |
·pcDNA3.1-akirin2 重组质粒免疫增强作用的科学假设 | 第53页 |
·Akirin2 基因的免疫增强作用 | 第53-54页 |
·本章小结 | 第54-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |