| 前 言 | 第1-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-41页 |
| ·抗生素生物合成机理的研究方法 | 第15-20页 |
| ·喂养试验法(刺激试验法)[13， | 第15页 |
| ·静息细胞法(洗涤菌丝悬浮法) | 第15-16页 |
| ·放射性同位素示踪法[ | 第16页 |
| ·稳定同位素核磁共振谱法[ | 第16-17页 |
| ·阻断突变株分析法 | 第17页 |
| ·无细胞提取物分析法 | 第17-18页 |
| ·原生质体试验法 | 第18页 |
| ·酶抑制剂应用法 | 第18页 |
| ·DNA 重组技术[ | 第18-20页 |
| ·各种抗生素生物合成和调控机理的研究进展 | 第20-28页 |
| ·内酰胺类抗生素的生物合成和调控机制[ | 第20-21页 |
| ·氨基糖苷类抗生素的生物合成和调控[ | 第21-22页 |
| ·四环素类抗生素的生物合成和调控机制[58, | 第22-24页 |
| ·大环内酯类抗生素的生物合成途径[6 | 第24-25页 |
| ·多肽类抗生素的生物合成[6 | 第25-26页 |
| ·蒽环类抗生素的生物合成机制[6 | 第26-27页 |
| ·苯羟基胺类抗生素的生物合成途径[71, | 第27-28页 |
| ·聚酮生物合成机理及其在抗生素生物合成中的作用 | 第28-9432页 |
| ·脂肪酸和聚酮化合物的生物合成机理[8 | 第28-32页 |
| 脂肪酸合成酶和聚酮合成酶(Polyketide synthase)的结构[82,87, | 第29-30页 |
| 脂肪酸的生物合成 | 第30页 |
| 聚酮的生物合成 | 第30-31页 |
| 芳香类聚酮的生物合成 | 第31页 |
| 复合多聚酮的生物合成 | 第31-32页 |
| ·FAS 与PKS的专一性:编辑的问题 | 第32-9432页 |
| ·特殊前体在抗生素生物合成中的作用 | 第9432-35页 |
| ·前体的来源 | 第33-34页 |
| ·内源前体 | 第33页 |
| ·外源前体 | 第33-34页 |
| ·前体的作用 | 第34-35页 |
| ·抗生素的构成单位 | 第34-35页 |
| ·诱导抗生素生物合成 | 第35页 |
| ·前体的限制性 | 第35页 |
| ·添加前体的策略 | 第35页 |
| ·抗生素生物合成的代谢工程 | 第35-38页 |
| ·本论文的立题背景、意义及主要研究内容 | 第38-41页 |
| 第二章 发酵液中抗生素AGPM测定方法的建立 | 第41-50页 |
| ·材料与方法 | 第41-42页 |
| ·实验仪器 | 第41-42页 |
| ·实验试剂 | 第42页 |
| ·抗生素AGPM紫外波长扫描 | 第42页 |
| ·色谱条件 | 第42页 |
| ·标准溶液的配制 | 第42页 |
| ·发酵液样品的预处理 | 第42页 |
| ·检测限的定义 | 第42页 |
| ·结果与讨论 | 第42-49页 |
| ·检测波长的选择 | 第42-43页 |
| ·色谱柱的选择 | 第43-45页 |
| ·流动相配比的选择 | 第45-46页 |
| ·乙酸铵溶液浓度对分离的影响 | 第46-47页 |
| ·pH 值对分离的影响 | 第47-48页 |
| ·流动相流速的选择 | 第48页 |
| ·几种主要组分的定量和定性分析 | 第48-49页 |
| ·结 论 | 第49-50页 |
| 第三章 抗生素AGPM生物合成前体分析 | 第50-61页 |
| ·材料与方法 | 第50-51页 |
| ·菌株 | 第50页 |
| ·培养基 | 第50-51页 |
| ·培养方法: | 第51页 |
| ·抗生素含量的测定方法: | 第51页 |
| ·菌体量测定方法 | 第51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-59页 |
| ·发酵合成培养基的选择 | 第51-53页 |
| ·前体添加时间的确定 | 第53-54页 |
| ·各种氨基酸对抗生素APGM的刺激试验 | 第54-55页 |
| ·添加短链脂肪酸对抗生素APGM产率的影响 | 第55-56页 |
| ·静息细胞培养体系中各种氨基酸对抗生素AGPM合成的影响 | 第56-57页 |
| ·静息细胞实验中短链脂肪酸对抗生素AGPM合成的影响 | 第57-58页 |
| ·抗生素AGPM合成前体的特征 | 第58-59页 |
| ·结 论 | 第59-61页 |
| 第四章 代谢途径抑制剂对抗生素AGPM合成的影响 | 第61-72页 |
| ·材料与方法 | 第62-63页 |
| ·特殊试剂来源 | 第62页 |
| ·菌株 | 第62页 |
| ·培养基和培养方法 | 第62页 |
| ·分 析 方 法 | 第62-63页 |
| ·结果与讨论 | 第63-70页 |
| ·氨基苯甲酸合成酶的抑制剂三甲胺对抗生素AGPM生物合成的影响 | 第63-64页 |
| ·甲羟戊酸合成途径的抑制剂对抗生素AGPM生物合成的影响 | 第64-65页 |
| ·聚酮途径中β-酮酯酰-ACP合成酶抑制剂对抗生素AGPM生物合成影响 | 第65-67页 |
| ·乙酰CoA羧化酶抑制剂二噁烷对抗生素AGPM生物合成的影响 | 第67-68页 |
| ·硫酯酶抑制剂2,4-二硝基氟苯对抗生素AGPM生物合成的影响 | 第68页 |
| ·一些金属离子对抗生素AGPM合成的影响 | 第68-69页 |
| ·甲基转移酶抑制剂氨基喋呤和磺胺对抗生素AGPM的合成影响 | 第69-70页 |
| ·小 结 | 第70-72页 |
| 第五章 抗生素AGPM中碳骨架来源的研究 | 第72-81页 |
| ·材料与方法 | 第72-73页 |
| ·同位素试剂 | 第72页 |
| ·菌株: | 第72页 |
| ·培养基 | 第72-73页 |
| ·培养方法 | 第73页 |
| ·抗生素AGPM的提取分离 | 第73页 |
| ·分析方法 | 第73页 |
| ·结果与讨论 | 第73-79页 |
| ·同位素标记样品和原始样品的核磁共振谱图对比分析 | 第73-77页 |
| ·抗生素AGPM碳骨架的合成模型 | 第77-79页 |
| ·结 论 | 第79-81页 |
| 第六章 藤黄灰链霉菌突变共合成和抗生素AGPM生物合成步骤的分析 | 第81-93页 |
| ·材料与方法 | 第81-83页 |
| ·出发菌株: | 第81页 |
| ·培养基: | 第81-82页 |
| ·培养方法: | 第82页 |
| ·菌株诱变 [147-148 | 第82-14982页 |
| ·无活性突变菌株的筛选 [32, | 第14982-15082页 |
| ·琼脂条互补方法 [32, | 第15082-82页 |
| ·液体培养共合成试验 | 第82-83页 |
| ·抗生素AGPM和突变菌株积累产物分析 | 第83页 |
| ·菌体中甲基丙二酰CoA变位酶(Methyl malonyl-CoA mutase)活性的测定 | 第83页 |
| ·结果与讨论 | 第83-92页 |
| ·无活性阻断突变株的突变频率和筛选 | 第83-84页 |
| ·无活性阻断突变株的互补菌株对 | 第84-85页 |
| ·无活性阻断突变株之间的液体培养共合成实验结果 | 第85-88页 |
| ·无活性阻断突变株生物合成途径的初步分析 | 第88-89页 |
| ·突变菌株产物分析 | 第89-90页 |
| ·正常菌株与突变菌株甲基丙二酰CoA变位酶活性对比分析 | 第90-92页 |
| ·小 结 | 第92-93页 |
| 第七章 抗生素AGPM间歇式发酵动力学模型和代谢通量分布 | 第93-119页 |
| ·材料与方法 | 第93-95页 |
| ·实验仪器 | 第93-94页 |
| ·菌种 | 第94页 |
| ·培养基 | 第94页 |
| ·培养方法 | 第94页 |
| ·分析方法 | 第94页 |
| ·各物质速率的计算 | 第94-95页 |
| ·矩阵的求解方法: | 第95页 |
| ·实验结果 | 第95-117页 |
| ·抗生素AGPM发酵动力学模型的建立 | 第95-98页 |
| ·抗生素AGPM发酵动力学模型的求解和模型验证 | 第98-103页 |
| ·抗生素AGPM的发酵动力学曲线 | 第98页 |
| ·菌体生长的动力学模型 | 第98-99页 |
| ·产物抗生素AGPM形成的动力学模型 | 第99-100页 |
| ·底物葡萄糖消耗的模型 | 第100-101页 |
| ·底物铵离子的消耗模型 | 第101页 |
| ·菌体在不同生长时期的各物质变化速率 | 第101-103页 |
| ·抗生素AGPM分批式发酵不同时期的代谢流分布 | 第103-117页 |
| ·藤黄灰链霉菌的代谢通量模型 | 第103-108页 |
| ·代谢通量计算方法 | 第108-109页 |
| ·藤黄灰链霉菌代谢网络模型方程及其求解 | 第109-112页 |
| ·抗生素AGPM分批式不同时期的代谢通量分布 | 第112-117页 |
| ·小 结 | 第117-119页 |
| 第八章 抗生素AGPM生物合成的代谢调控研究 | 第119-128页 |
| ·材料与方法 | 第119-120页 |
| ·菌株: | 第119页 |
| ·培养基和培养方法: | 第119-120页 |
| ·发酵液中葡萄糖、铵离子和丙酮酸的测定 | 第120页 |
| ·无机磷的测定 | 第120页 |
| ·琥珀酸脱氢酶活力测定 | 第120页 |
| ·葡萄糖－6－磷酸脱氢酶活力的测定 | 第120页 |
| ·6-磷酸葡萄糖的测定 | 第120页 |
| ·菌体浓度测定方法及抗生素含量的测定 | 第120页 |
| ·结果与讨论 | 第120-127页 |
| ·葡萄糖对抗生素AGPM生物合成的调控 | 第120-123页 |
| ·铵离子对抗生素AGPM合成的调控 | 第123-125页 |
| ·磷酸盐对抗生素AGPM合成的调控 | 第125-127页 |
| ·小 结 | 第127-128页 |
| 第九章 结论与展望 | 第128-131页 |
| ·结 论 | 第128-129页 |
| ·今后抗生素AGPM高产菌株定向推理选育的策略 | 第129-130页 |
| ·今后对抗生素AGPM生物合成途径和调控机制研究的展望 | 第130-131页 |
| 参 考 文 献 | 第131-143页 |
| 附 录 | 第143-148页 |
| 发表的论文和参加科研情况 | 第148-149页 |
| 致 谢 | 第149页 |
